一种双酶放大汞离子生物传感器的构建

    公开(公告)号:CN108676844B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN201810510442.9

    申请日:2018-05-24

    IPC分类号: C12Q1/48 C12Q1/44 C12Q1/00

    摘要: 本发明提供了一种双酶放大汞离子生物传感器的构建。本发明传感器,根据汞离子与胸腺嘧啶之间可以形成配位键,使得核酸双链之间形成稳定的平末端,激活外切酶Ⅲ(ExoⅢ),切割平末端的3’端,使得核酸链的3’‑OH端暴露。而末端脱氧核糖转移酶(TdT)在3’‑OH端暴露、无模板的情况下就可以进行链的延伸,通过控制核酸体系中脱氧核糖的配比就可以产生大量的富G序列,富G序列在TMB存在的情况下显色,完成对Hg2+的比色定量检测。在一个具体的实施例中,本发明传感器的检出限为0.2nmol/L、加标回收率在98.75%‑103%。本发明所述传感器及Hg2+检测方法,是一种新的、廉价、快速、灵敏、特异性强、准确度高的产品及方法,丰富了现有检测技术或方法,为新的检测产品或方法的研发提供了思路。

    一种铜的耐高盐核酸传感器及其应用

    公开(公告)号:CN107976436B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN201711024308.X

    申请日:2017-10-27

    IPC分类号: G01N21/78 G01N21/25

    摘要: 本发明公开了一种铜的耐高盐核酸传感器及其应用。所述传感器,包括分子识别元件、信号放大元件和信号转换元件,所述分子识别元件包括铜离子脱氧核酶;所述铜离子脱氧核酶由底物链与酶链组成;所述信号放大元件包括等温扩增体系,所述等温扩增体系包括扩增模板;所述信号转换元件包括氯高铁血红素和显色剂。本发明的传感器,特异性识别铜离子,通过等温指数放大反应进行信号一级的扩大和转化;在氯高铁血红素诱导下形成具有活性的G‑四链体结构,催化显色剂显色,从而产生二级放大与转化,转化成可视化的信号,可以进行高盐环境中的定性和定量的检测。

    一种快速鉴定食品中鹅源成分的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109852708B

    公开(公告)日:2021-01-01

    申请号:CN201910290311.9

    申请日:2019-04-11

    摘要: 本发明提供一种快速鉴定食品中鹅源成分的试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个鹅源通用内标准基因CCNB1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在鹅物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定鹅源的靶基因。以该基因为靶序列设计了非对称扩增引物,非对称PCR反应产物用于DNA银纳米簇检测。非对称PCR反应结合DNA银纳米簇检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的鹅源成分,检测灵敏度可达2%(w/w)。本发明非对称PCR‑DNA银纳米簇通用荧光试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。

    一种快速鉴定食品中绵羊源成分的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN110195113B

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN201910290315.7

    申请日:2019-04-11

    摘要: 本发明提供一种快速鉴定食品中绵羊源成分的试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个绵羊源通用内标准基因calponin,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在绵羊物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定绵羊源的靶基因。以该基因为靶序列设计了非对称扩增引物,非对称PCR反应产物用于DNA银纳米簇检测。非对称PCR反应结合DNA银纳米簇检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的绵羊源成分,检测灵敏度可达4%(w/w)。本发明非对称PCR‑DNA银纳米簇通用荧光试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。

    一种食品中绵羊源成分快速检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN110195111B

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN201910290267.1

    申请日:2019-04-11

    摘要: 本发明提供一种食品中绵羊源成分快速检测试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个绵羊源通用内标准基因CALPONIN,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在绵羊物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定绵羊源的靶基因。以该基因为靶序列设计了PCR扩增引物,与PCR反应液一起进行扩增,PCR反应产物用于铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条检测。PCR反应结合基于铂钯纳米颗粒的免疫层析试纸条检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的绵羊源成分,检测灵敏度可达0.8%(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。

    一种食品中山羊源成分快速检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109852709B

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN201910290312.3

    申请日:2019-04-11

    摘要: 本发明提供一种食品中山羊源成分快速检测试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个山羊源通用内标准基因TSPY,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在山羊物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定山羊源的靶基因。以该基因为靶序列设计了PCR扩增引物,与PCR反应液一起进行扩增,PCR反应产物用于铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条检测。PCR反应结合基于铂钯纳米颗粒的免疫层析试纸条检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的山羊源成分,检测灵敏度可达0.8%(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。

    一种食品中驴源成分快速检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109811069B

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN201910289677.4

    申请日:2019-04-11

    摘要: 本发明提供一种食品中驴源成分快速检测试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个驴源通用内标准基因LOC106825524,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在驴物种中拷贝数恒定,可作为鉴定驴源的靶基因。以该基因为靶序列设计了PCR扩增引物,与PCR反应液一起进行扩增,PCR反应产物用于铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条检测。PCR反应结合基于铂钯纳米颗粒的免疫层析试纸条检测构成快速检测试剂盒,可快速灵敏地检测食品中驴源成分,检测灵敏度可达0.8%。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,适于现场实时检测,在动物源性食品监督与抵御肉制品掺假方面应用前景广阔。

    一种食品中绵羊源成分快速检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN109811066B

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN201910289658.1

    申请日:2019-04-11

    摘要: 本发明提供一种食品中绵羊源成分快速检测试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个绵羊源通用内标准基因Calponin,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在绵羊物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定绵羊源的靶基因。以该基因为靶序列设计了LAMP扩增引物,与LAMP反应液一起进行恒温扩增,LAMP反应产物用于胶体金核酸试纸条检测。LAMP反应结合胶体金核酸试纸条检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的绵羊源成分,检测灵敏度可达0.16%(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。

    一种锌离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器

    公开(公告)号:CN108949931B

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN201810634857.7

    申请日:2018-06-20

    IPC分类号: C12Q1/686

    摘要: 本发明提供一种锌离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器,包括:(1)切割体系,(2)sPCR扩增体系,(3)HCR体系,(4)包含ABTS显色液的检测体系。本发明通过巧妙地设计引物、模板及探针,使得在锌离子存在下可对模板进行超快扩增,扩增产物通过促发HCR反应,使得产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色,解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题,实现了对锌离子的快速、可视化检测。不仅如此,本发明提供的传感器对锌离子具有高特异、高灵敏的特点,检测结果更加客观、准确。

    一种铜离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器

    公开(公告)号:CN108841938B

    公开(公告)日:2020-10-02

    申请号:CN201810639041.3

    申请日:2018-06-20

    IPC分类号: C12Q1/686

    摘要: 本发明提供一种铜离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器,包括:(1)切割体系,(2)sPCR扩增体系,(3)HCR体系,(4)包含ABTS显色液的检测体系。本发明通过巧妙地设计引物、模板及探针,使得在铜离子存在下可对模板进行超快扩增,扩增产物通过促发HCR反应,使得产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色,解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题,实现了对铜离子的快速、可视化检测。不仅如此,本发明提供的传感器对铜离子具有高特异、高灵敏的特点,检测结果更加客观、准确。