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    一种PAGE的高效银染方法
    44.
    发明公开
    一种PAGE的高效银染方法 无效

    公开(公告)号：CN104458388A

    公开(公告)日：2015-03-25

    申请号：CN201410727628.1

    申请日：2014-12-01

    申请人： 中国农业科学院棉花研究所

    发明人： 崔兴雷 ,  孟菲 ,  蔡小彦 ,  刘方 ,  周忠丽 ,  王星星 ,  王春英 ,  王玉红 ,  王坤波

    IPC分类号： G01N1/30 ,  G01N27/447

    摘要： 本发明属于分子遗传学领域，具体涉及一种适用于聚丙烯酰氨凝胶的高效银染方法。所述方法包括步骤：1)取下凝胶，浸泡在固定液中，处理2分钟，所述固定液的配方为：10％Ethanol；1.0％Acetic acid；2)把凝胶取出放入0.2％AgNO3渗透液中处理3分钟，取出凝胶，迅速放至水中，清洗20秒；3)把凝胶放进显色液中，2分钟即可显色，所述显色液配方为2％NaOH；20mL 37％HCOH/L；0.0175‰Na2S2O3。本发明的银染过程可在10分钟内完成，几乎是已报到的银染方法中需时最少的，显著提高了实验的效率。

    筛选高抗草甘膦半野生棉材料的方法
    45.
    发明公开
    筛选高抗草甘膦半野生棉材料的方法 失效

    公开(公告)号：CN104012398A

    公开(公告)日：2014-09-03

    申请号：CN201410263839.4

    申请日：2014-06-13

    申请人： 中国农业科学院棉花研究所

    发明人： 王园园 ,  周忠丽 ,  刘方 ,  王春英 ,  蔡小彦 ,  王星星 ,  黎绍惠 ,  王坤波

    IPC分类号： A01H1/04

    摘要： 本发明涉及筛选高抗草甘膦半野生棉材料的方法，所述方法包括步骤：(1)采用0.09％和0.15％的草甘膦对半野生棉自然群体进行局部处理，在群体中识别出高抗0.15％草甘膦的半野生棉材料，对选择出的高抗草甘膦半野生棉材料喷施0.1％的草甘膦，进一步选出高抗单株；(2)选出的高抗单株进行自交，分株收摘、装袋、分轧、分贮；(3)进入“单株播种、出苗-药剂处理-抗性识别-单株选择-自交-分收”的程序，如此循环5次，最后从半野生棉自然群体中筛选到稳定的高抗草甘膦的材料。

    沉默两个抗性基因防治烟灰虱的方法
    46.
    发明公开
    沉默两个抗性基因防治烟灰虱的方法 失效

    公开(公告)号：CN102690837A

    公开(公告)日：2012-09-26

    申请号：CN201210025653.6

    申请日：2012-02-07

    申请人： 中国农业科学院棉花研究所 ,  江苏省农业科学院

    发明人： 刘方 ,  张保龙 ,  王坤波 ,  陈天子 ,  蔡小彦

    IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00

    摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及沉默两个抗性基因防治烟灰虱的方法。根据本发明的方法包括以下步骤：选取烟粉虱抗药性CYP6CM1基因和coe1基因为RNAi靶基因；通过Overlap PCR将CYP6CM1基因和coe1基因的部分序列嵌合并以之构建反向重复序列的RNAi载体；RNAi载体转化目的植物，获得具有防治烟粉虱的转基因植物。本发明是对以杀虫剂为主的烟粉虱防治方法的重要补充。本发明利用RNAi技术干扰烟粉虱体内的抗药性相关基因的表达，为防治烟粉虱提供了技术支持。

    棉花叶片棉球定位鉴定除草剂抗性的方法
    47.
    发明公开
    棉花叶片棉球定位鉴定除草剂抗性的方法 失效

    公开(公告)号：CN102577857A

    公开(公告)日：2012-07-18

    申请号：CN201210019682.1

    申请日：2012-01-24

    申请人： 中国农业科学院棉花研究所

    发明人： 王园园 ,  张香娣 ,  王坤波 ,  刘方 ,  王春英 ,  王玉红 ,  黎绍惠 ,  蔡小彦

    IPC分类号： A01G7/06

    摘要： 本发明涉及植物生理学和农药学，具体地，本发明涉及棉花叶片棉球定位鉴定除草剂抗性的方法。根据本发明的方法，包括步骤：1)材料处理叶片的选择：选择完好无损无受害现象的功能叶或其邻位叶；2)棉球定位处理：在每株的功能叶正面自叶柄处开始顺时针或逆时针方向设定作用位置，将大小基本一致的棉球蘸满设定浓度的除草剂工作液，按固定方向依序放置各种浓度药剂浸泡的棉球于叶片表面的相应作用位置；3)观察处理部位反应情况来确定其抗性水平。该方法可大大节省材料，减小实验规模，大大减少人为误差，结果精确可靠，对精确定义材料抗性水平提供了技术保障，也为材料当代单株进行深入的抗性研究提供保证，操作极其简单，容易掌握。

    海南棉花露天无叶扦插方法
    48.
    发明授权
    海南棉花露天无叶扦插方法 失效

    公开(公告)号：CN101766087B

    公开(公告)日：2012-02-01

    申请号：CN201010002688.9

    申请日：2010-01-22

    申请人： 中国农业科学院棉花研究所

    发明人： 张香娣 ,  王坤波 ,  黎绍惠 ,  张西岭 ,  刘方 ,  王春英 ,  王玉红

    IPC分类号： A01G1/00

    摘要： 本发明涉及作物发育生物学，具体地，本发明涉及海南棉花露天无叶扦插方法。根据本发明的海南棉花露天无叶扦插方法包括在海南岛的扦插圃中插入棉花枝条的步骤，其中，扦插圃的土壤持水量在70％以上。本发明为挽救不能够正常开花结实的棉花提供了技术保障，实质性解决了棉花高效扦插的问题，扦插成活率提高到86％以上，简化了扦插设施要求，且成本低、操作极其简单，容易掌握和推广应用。

    南繁棉花低位灌溉方法
    49.
    发明公开
    南繁棉花低位灌溉方法 失效

    公开(公告)号：CN101743889A

    公开(公告)日：2010-06-23

    申请号：CN201010101853.6

    申请日：2010-01-28

    申请人： 中国农业科学院棉花研究所

    发明人： 张西岭 ,  王坤波 ,  张海棠 ,  黎绍惠 ,  王宝连

    IPC分类号： A01G25/02

    CPC分类号： Y02A40/237

    摘要： 本发明涉及作物栽培领域，具体地，本发明涉及南繁棉花低位灌溉方法。根据本发明的南繁棉花低位灌溉方法，包括以下步骤：1)铺设管网，每排PVC支管走向与棉行垂直，PVC管通过三通水平连接，三通的一端连接软管，其中，所述软管上下两个平面均有预制好的喷水孔，在每一排PVC支管进水口设立一级开关，每条软管与PVC支管连接处设二级开关，软管被置于两个棉垄中央、并与棉行平行；2)灌溉时，首先打开5～7个二级开关，然后打开一级开关。根据本发明的方法节省灌溉用水和劳动力、提高灌溉效率和质量，为安全有效南繁奠定了技术基础。