葫芦轻花叶病毒及其侵染性克隆载体、构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116836947A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310825349.8

    申请日:2023-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种葫芦轻花叶病毒及其侵染性克隆载体、构建方法和应用,所述葫芦轻花叶病毒(Cucurbit mild mosaic virus,CuMMV)的RNA1和RNA2全基因组序列如SEQ IDNo:21‑22所示。该葫芦轻花叶病毒的侵染性克隆载体分别由葫芦轻花叶病毒RNA1和RNA2的全基因组序列融合到带35S启动子和核酶Rz的载体pCB301制备得到。通过农杆菌介导转化后在寄主体内转录、复制、侵染,以用于病毒的功能基因组研究。本发明为研究该病毒基因组结构和功能,以及其与葫芦科作物的相互作用研究提供了成熟的体系。

    基于CRISPR/Cas9 SunTag系统抑制双生病毒侵染的载体及其构建和应用

    公开(公告)号:CN111088277B

    公开(公告)日:2022-01-18

    申请号:CN201911411234.4

    申请日:2019-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9 SunTag系统抑制双生病毒侵染的载体及其构建和应用,该方法利用搭载甲基转移酶DRM2的CRISPR/dCas9 Sun Tag系统,构建针对TYLCCNV和TYLCCNB特定区域的sgRNA,从而使得TYLCCNV和TYLCCNB特定区域被DRM2识别并被甲基化。为了增强识别和甲基化的效果,分别设计了三个sgRNA(g16/g17/g9A)靶标TYLCCNV和三个sgRNA(g1/g14/g9B)靶标TYLCCNB的甲基化敏感区域,并将三个sgRNA依次插入pEG302载体,从而得到可以定点靶标并进行甲基化修饰TYLCCNV的pEG302‑A和定点靶标并进行甲基化修饰TYLCCNB的pEG302‑β的抑制双生病毒侵染的载体。

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