公开(公告)号：CN111748559B

公开(公告)日：2022-06-17

申请号：CN202010602465.X

申请日：2020-06-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈赞谋 ,  张哲 ,  李加琪 ,  李丽莹 ,  袁晓龙 ,  张豪

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/87 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开CTNNB1基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明检测了猪不同时期卵巢组织、不同大小卵泡及其颗粒细胞中CTNNB1mRNA的相对表达量，以及超表达和抑制CTNNB1后颗粒细胞的增殖、凋亡及类固醇激素的分泌情况。结果显示，CTNNB1基因参与促进颗粒细胞的增殖和雌二醇的分泌，抑制颗粒细胞的凋亡和睾酮、孕酮的分泌，说明CTNNB1基因参与母猪卵巢卵泡的发育和成熟。本发明为母猪卵巢卵泡发育过程中的分子机制研究积累了材料。

公开(公告)号：CN110467663B

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN201910747933.X

申请日：2019-08-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  袁晓龙 ,  何颖婷 ,  李加琪 ,  张豪

IPC: C07K14/47 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了RSPO3基因在母猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以直径为3～5和7～10mm的两种卵泡为实验材料，采用测序技术研究H3K4me3与卵巢卵泡发育相关基因表达水平的关系。通过ChIP‑Seq发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因启动子区的H3K4me3富集程度有显著差异；通过qRT‑PCR发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因的表达量有显著差异；通过促进或抑制母猪卵巢颗粒细胞中H3K4me3的程度发现促进H3K4me3程度可促进RSPO3基因的转录，抑制H3K4me3程度可抑制RSPO3基因的转录；通过超表达或干扰RSPO3发现RSPO3可促进母猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋亡。

公开(公告)号：CN109182533B

公开(公告)日：2021-01-22

申请号：CN201811026592.9

申请日：2018-09-04

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张豪 ,  邹嘉琪 ,  李加琪 ,  张哲 ,  陈赞谋 ,  袁晓龙

IPC: C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开一种IGF1基因启动子区的(CA)n微卫星位点的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以IGF1基因为研究对象，将不同基因型的(CA)n、Poly T和(CA)n‑Tn分别与长白猪的生长性状进行关联分析，最后获得对长白猪生长性状促进作用最大的基因型。本发明设计周详，结果可靠。为证实Poly T位点和(CA)n微卫星位点与长白猪生长性状之间的联系，本发明从多层次、多角度验证，在转录活性水平、细胞水平上进行验证，最后在个体中验证。本发明通过找到IGF1基因启动子区多态性位点(CA)n和Poly T对长白猪生长的促进作用的应用，对于研究IGF1基因对猪生长的影响具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN111996194A

公开(公告)日：2020-11-27

申请号：CN202010800554.5

申请日：2020-08-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 钟玉宜 ,  李加琪 ,  袁晓龙 ,  张哲 ,  云冰

IPC: C12N15/12 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了RUNX1基因在卵巢颗粒细胞中的应用。本发明通过研究H3K27me3对RUNX1转录表达、卵巢颗粒细胞功能的影响，发现H3K27me3靶向结合RUNX1，抑制RUNX1的转录表达，从而影响卵巢颗粒细胞中的类固醇合成、细胞的凋亡和增殖。本发明拓宽了我们对组蛋白翻译后表观调控颗粒细胞功能的认识，进一步阐明了RUNX1基因在卵泡发育、成熟过程中对颗粒细胞类固醇合成、细胞凋亡和增殖的调控机制。

公开(公告)号：CN110467663A

公开(公告)日：2019-11-19

申请号：CN201910747933.X

申请日：2019-08-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  袁晓龙 ,  何颖婷 ,  李加琪 ,  张豪

IPC: C07K14/47 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了RSPO3基因在母猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以直径为3～5和7～10mm的两种卵泡为实验材料，采用测序技术研究H3K4me3与卵巢卵泡发育相关基因表达水平的关系。通过ChIP-Seq发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因启动子区的H3K4me3富集程度有显著差异；通过qRT-PCR发现，在不同大小卵泡中RSPO3基因的表达量有显著差异；通过促进或抑制母猪卵巢颗粒细胞中H3K4me3的程度发现促进H3K4me3程度可促进RSPO3基因的转录，抑制H3K4me3程度可抑制RSPO3基因的转录；通过超表达或干扰RSPO3发现RSPO3可促进母猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋亡。

公开(公告)号：CN110305870A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910524967.2

申请日：2019-06-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  李加琪 ,  李忠慧 ,  张哲 ,  孔亚茹

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了p65基因在卵巢颗粒细胞中调控FGFR1基因的应用。本发明通过预测FGFR1基因启动子区p65潜在结合位点，以及通过启动子活性分析初步判定了p65基因对FGFR1基因启动子活性的调控作用，并在超表达和干扰p65基因后检测了FGFR1基因mRNA表达变化和FGFR1启动子活性，发现p65基因能够促进FGFR1基因mRNA的表达，且能增强FGFR1基因启动子活性，这为p65基因和FGFR1基因在卵巢颗粒细胞中的表达调控机制研究积累材料；同时，本发明的结果显示p65靶向结合于FGFR1启动子区促进FGFR1的转录表达。

公开(公告)号：CN116814685B

公开(公告)日：2025-05-06

申请号：CN202310652751.0

申请日：2023-06-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  廖伟莉 ,  张哲 ,  李加琪 ,  吕媛媛 ,  周尹祺 ,  杨景昊

IPC: C12N15/85 ,  A61K31/7088 ,  A61P15/08 ,  C07K14/47

Abstract: 本发明公开了ZFP42基因在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以ZFP42基因为切入点，采用细胞生物学方法研究其对猪卵巢颗粒细胞自噬和凋亡的影响，过表达ZFP42后细胞自噬水平显著性增加，敲低ZFP42后自噬水平显著性降低；过表达ZFP42后细胞凋亡率显著增加，敲低ZFP42后凋亡率显著性下降。本发明技术方案设计周详，结果可靠。证实ZFP42促进猪卵巢颗粒细胞自噬和凋亡这些对研究对卵巢卵泡发育及母猪繁殖性能的影响机制具有很好的应用价值。为提高母猪繁殖力提供技术支持，同时对养猪业的实际生产具有重要经济价值。

公开(公告)号：CN119614634A

公开(公告)日：2025-03-14

申请号：CN202411826951.4

申请日：2024-12-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 何颖婷 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  张哲 ,  高亚辉 ,  周尹祺 ,  李念 ,  李硕

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明提供了一种PAFAH1B1基因在卵巢颗粒细胞周期中的应用，涉及基因表达调控的技术领域。包括调控所述卵巢颗粒细胞中PAFAH1B1基因表达调控所述卵巢颗粒细胞周期，包括增加PAFAH1B1基因表达量或活性的步骤；或者包括减少PAFAH1B1基因表达量或活性的步骤；或者包括在受体细胞中促进或抑制PAFAH1B1基因表达产物与细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶结合的步骤。本申请验证了PAFAH1B1基因表达水平能够显著影响颗粒细胞的细胞周期，为调控颗粒细胞周期提供了一种简单、有效的新途径。揭示了PAFAH1B1基因影响细胞周期的分子机制及其应用，为后续调控哺乳动物卵巢颗粒细胞功能、卵泡发育及初情启动提供了参考。开发并验证了能够对PAFAH1B1基因表达起到敲低基因表达的干扰片段，为抑制PAFAH1B1基因表达提供了有效的新的研究材料。

公开(公告)号：CN119410782A

公开(公告)日：2025-02-11

申请号：CN202411502454.9

申请日：2024-10-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  高亚辉 ,  张哲 ,  李加琪 ,  刘楚桥 ,  杨甜甜 ,  缪汾 ,  周菁钰

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了MMP2基因启动子区SNP位点及其在猪育种中的应用。本发明是以MMP2基因启动子区域为研究对象，采用分子和细胞生物学方法研究其与母猪性成熟的相关性：发现g.30088284G＞A位点、g.30088004C＞T位点与杜黑猪群体性成熟日龄显著相关；然后通过转染不同载体，研究上述位点不同基因型对IRS1基因启动子活性的影响不同。进一步以母猪卵巢颗粒细胞为实验材料，采用转录组测序、总铁比色法、丙二醛比色法等实验技术，研究MMP2基因对母猪卵巢颗粒细胞转录水平、铁死亡的影响，发现MMP2基因影响细胞转录组差异基因主要富集到细胞分化等信号通路，促进细胞发生铁死亡。

公开(公告)号：CN118834938A

公开(公告)日：2024-10-25

申请号：CN202411082820.X

申请日：2024-08-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李加琪 ,  何颖婷 ,  袁晓龙 ,  张哲 ,  周小枫 ,  李硕 ,  杨景昊

IPC: C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  G01N21/76 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明公开了褪黑素在调控卵巢颗粒细胞中RSPO3启动子转录水平的应用。本发明通过实验发现，褪黑素可以提高卵巢颗粒细胞中RSPO3的mRNA的表达水平，提高RSPO3蛋白的表达水平，提高RSPO3启动子的转录活性，褪黑素还可以通过增加RSPO3启动子‑1450～‑950区染色可及性，促进H3K4me3与RSPO3结合，进而促进RSPO3的表达。因此，可将褪黑素用于调控卵巢颗粒细胞中RSPO3启动子的转录水平。