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公开(公告)号：CN112458034A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011420749.3
申请日：2020-12-08
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了一种基因构建的重组大肠杆菌及生物合成6’‑唾液乳糖的方法，属于代谢工程领域。所述重组大肠杆菌是通过代谢工程的方法(包括删除竞争途径基因和表达关键途径基因)对大肠杆菌中6’‑唾液乳糖合成相关基因进行对应改造后得到的。利用该菌株进行摇瓶发酵24 h，可以得到4~5 g/L的6’‑唾液乳糖。该菌株能够协同利用葡萄糖和甘油碳源高效合成6’‑唾液乳糖。本发明构建的重组大肠杆菌具有广阔的应用前景，为生物法生成6’‑唾液乳糖提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN112375834A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011317071.6
申请日：2020-11-23
申请人： 南开大学
摘要： 本发明涉及一种用于小肠结肠耶尔森菌4个主要致病型O抗原血清型的实时荧光PCR检测方法及应用。主要是采用MGB探针的实时荧光PCR反应快速检测体系对小肠结肠耶尔森菌O3，O5，O8和O9共4个O抗原血清型进行检测。本发明以小肠结肠耶尔森菌O3型的wbbU基因、O5型的wzt基因，O8型的wzy基因、以及O9型的per基因为靶基因，设计了并筛选了针对每一个血清型的Taqman特异性引物及MGB探针，并建立了实时荧光PCR检测方法。利用本发明提供的方法可以准确、快速、灵敏地对小肠结肠耶尔森菌4个主要致病型O抗原血清型菌株进行分子生物学检测。
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公开(公告)号：CN107586861B
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN201710849106.2
申请日：2017-09-20
申请人： 南开大学
摘要： 本发明提供了用于检测产气肠杆菌血清型1‑8型的特异寡核苷酸序列，该寡核苷酸包括：（1）产气肠杆菌1型、2型、3型、5型、6型、7型和8型的wzy基因中选取的一种DNA片段；（2）产气肠杆菌4型的orf8基因中选取的一种DNA片段。本发明结合Bio‑Rad公司的Bio‑Plex 200悬液芯片系统，建立了一套用于检测产气肠杆菌血清型1‑8型的悬液芯片检测系统及其检测方法，填补了关于产气肠杆菌的血清学分型技术的空白，对于这一重要致病菌的临床检测和流行病学监测具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111850145A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010649558.8
申请日：2020-07-08
申请人： 南开大学
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
摘要： 本发明涉及一种对亲水气单胞菌O7、O16、O19、O24、O30、O35血清型O抗原分子分型的环介导等温扩增（LAMP）检测方法。本发明以亲水气单胞菌的O抗原基因簇内的特异基因为靶基因，设计并筛选用于亲水气单胞菌O7、O16、O19、O24、O30、O35的O抗原分型的各四条引物，并建立了相应的LAMP检测方法，为亲水气单胞菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的LAMP引物检测水、食品、下水道、河水及土壤等环境中的亲水气单胞菌，并且对其进行O抗原分型，具有操作简单、快速高效、高灵敏度等诸多优点。
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公开(公告)号：CN111850144A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010649431.6
申请日：2020-07-08
申请人： 南开大学
摘要： 本发明涉及一种对亲水气单胞菌血清型O抗原分子分型的检测方法及应用。本发明以亲水气单胞菌O抗原基因簇特异基因为靶基因，设计并筛选了用于亲水气单胞菌的O抗原分型的引物及MGB探针，并建立了相应的实时荧光PCR（RT-PCR）检测方法，为利用分子生物学手段对亲水气单胞菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的MGB探针检测水中的亲水气单胞菌，并且对其进行O抗原分型，具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。
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公开(公告)号：CN111549154A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010401875.8
申请日：2020-05-13
申请人： 南开大学
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6837 , C12Q1/04 , C12R1/63
摘要： 本发明提供了用于检测副溶血弧菌7种常见致病性K抗原血清型的特异寡核苷酸序列，连接在标记有不同荧光染料磁性微球上的寡核苷酸探针，该寡核苷酸包括：从副溶血弧菌K6、K8、K25、K41、K56和K68共6种血清型的wzy基因中，以及K60的wzx基因中各自选取的一种DNA片段。本发明结合Bio-Rad公司的Bio-Plex 200悬液芯片系统，建立了一套用于检测副溶血弧菌7种常见致病性K抗原血清型的悬液芯片检测系统及其检测方法，填补了利用分子生物学方法对副溶血弧菌常见致病性K抗原血清型检测的技术空白，对于这一重要致病菌的临床鉴定和流行病学监测具有重要意义。
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公开(公告)号：CN106520645B
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201610851735.4
申请日：2016-09-27
申请人： 南开大学
摘要： 本发明公开了绞股蓝糖基转移酶的工程菌及其构建方法与应用。所述的绞股蓝糖基转移酶，可以催化原人参二醇合成稀有人参皂苷CK。其名称为UGTGp4。本发明同时也公开了合成稀有人参皂苷CK的方法与应用。本发明通过将来自于绞股蓝的糖基转移酶基因在大肠杆菌中异源表达，体外酶促反应进行了功能鉴定。对其产物进行ESI质谱和HPLC检测都显示有较高的信号。本发明所制备的人参皂苷具有得率高，副产物少，容易工业化生产等优点，为绞股蓝皂苷异源生物合成奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105154439B
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201510473545.9
申请日：2015-08-04
申请人： 南开大学
摘要： 本发明涉及对蜂房哈夫尼亚菌G5902，G5903，G5904，G5906特异的核苷酸及其应用，所述核苷酸包括1）SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸中的一种。这些核苷酸可用于制备检测蜂房哈夫尼亚菌的PCR试剂盒和基因芯片。本发明是蜂房哈夫尼亚菌G5902，G5903，G5904，G5906特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片，该技术操作方法简便，检测周期短，检测成本较低，准确性高，灵敏度高，易于产业化生产。
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公开(公告)号：CN105256028B
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201510681496.8
申请日：2015-10-20
申请人： 南开大学
摘要： 本发明涉及柠檬酸杆菌017和O39血清型特异的核苷酸及其应用，所述核苷酸为SEQ ID NO:1‑4所示的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测柠檬酸杆菌用PCR试剂盒。所述的柠檬酸杆菌可以取样于消化道、尿液、血液和伤口培养物的粗提液，也可以从人类和动物粪便环境中分离得到。本发明对柠檬酸杆菌017和O39血清型特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒，PCR试剂盒配制方法简便，检测周期短、速度快，可操作性强，易于产业化生产，而检测成本却相对较低；准确性高；灵敏度高。
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公开(公告)号：CN105154438B
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201510470856.X
申请日：2015-08-04
申请人： 南开大学
摘要： 本发明涉及对蜂房哈夫尼亚菌G5907，G5908，G5913，G5916特异的核苷酸及其应用，所述核苷酸包括SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸中的一种。这些核苷酸可用于制备检测蜂房哈夫尼亚菌的PCR试剂盒和基因芯片。本发明是蜂房哈夫尼亚菌G5907，G5908，G5913，G5916特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片，该技术操作方法简便，检测周期短，检测成本较低，准确性高，灵敏度高，易于产业化生产。
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