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公开(公告)号：CN112921073A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110277681.6
申请日：2021-03-15
申请人： 四川大学
IPC分类号： C12Q1/6834 , C12Q1/6806
摘要： 本发明公开了一种小麦病原真菌可视化检测试剂盒，属于分子检测领域。所述试剂盒包括样品预处理、探针识别、检测结果可视化和数据管理三部分；样品预处理，采用加热提取法，时间5min以内；检测探针采用一类嵌有银离子的DNA双链；结果可视化由试纸反应池，智能手机信号采集和监测数据管理云网页组成。检测原理基于致病菌RNA置换错配链，释放银离子，灭活脲酶，阻止尿素分解，纸基芯片在苯酚红作用下呈现黄色，反之为红色。本试剂盒可以同时筛查多种包括条锈、根腐、禾谷镰孢等常见的小麦致病菌病害。测试结果可以通过图像管理网页计算得到条锈菌RNA的量，估测致病菌的活菌数量，准确判断小麦染病情况，进一步提高小麦病害检测的准确性、稳定性和便捷性。
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公开(公告)号：CN112501248A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011644377.2
申请日：2020-12-30
申请人： 四川大学华西医院
摘要： 本发明公开了一种可视化核酸检测试剂盒，属于分子检测领域。所述试剂盒包括分子识别试剂和信号转换试剂；所述分子识别试剂是嵌有金属离子的DNA双链分子，所述DNA双链分子由底物链和错配链碱基互补配对而成，其中底物链与错配链各有一个或多个C或者T碱基，在金属离子的作用下相互配对；所述信号转换试剂由脲酶、尿素和pH指示剂组成。当样品中存在靶标核酸时，靶标核酸序列与错配链竞争性结合底物链，置换出错配链，金属离子游离出来，抑制脲酶活性，进而抑制尿素分解；若无靶标核酸，脲酶会催化尿素分解产生氨，溶液pH增加，可通过pH指示剂表征。本发明的试剂盒不依赖核酸扩增反应，具有操作简便性和可视化结果呈现的功能。
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公开(公告)号：CN109490260B
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201811123343.1
申请日：2018-09-26
申请人： 四川大学
IPC分类号： G01N21/64
摘要： 本发明提供了一种低背景和温度稳定的功能核酸荧光传感器，包括分子识别元件和信号转换元件，分子识别元件为铅离子依赖型脱氧核酶，铅离子脱氧核酶由脱氧核酶底物链和脱氧核酶酶链组成，脱氧核酶底物链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示，脱氧核酶酶链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示；信号转换元件由5’端被荧光染色基团标记的Sub F和3’端被荧光猝灭基团标记的Sub Q组成，Sub F与Sub Q的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明还提供了一种该荧光传感器在铅离子检测中的应用。本发明提供的荧光传感器可提高现有生物传感器法检测铅离子的灵敏度和对检测环境的耐受性。
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公开(公告)号：CN109385426B
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN201811052993.1
申请日：2018-09-10
申请人： 四川大学
IPC分类号： C12N15/115 , C12Q1/6851
摘要： 本发明所述识别增强型亚稳态核酸适配体探针，熔炼温度Tm低于45℃，为末端互补的发卡形结构；当有目标物质存在时，该核酸适配体探针能够与目标物质结合，并进而打开其末端茎部，通过聚合酶的作用引发滚环扩增反应，当无目标物质存在时，该核酸适配体探针形成闭合结构，并可通过延长末端茎部使其双链结构更稳定，不能在聚合酶的作用下引发滚环扩增反应。优选的识别增强型亚稳态核酸适配体探针，核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所述。该识别增强型亚稳态核酸适配体探针在目标物质计数分析中应用，可提升对目标分子的响应灵敏性和识别效率，回收率达88～110％。
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公开(公告)号：CN111500685A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010360739.9
申请日：2020-04-30
申请人： 四川大学
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12Q1/14 , C12Q1/06 , G01N21/64
摘要： 一种基于酶切保护适配体传感器的金黄色葡萄球菌快速检测方法。所述的适配体传感器包含两条DNA序列：核酸适配体SA43和分子信标MB。该方法的作用机理在于适配体-金黄色葡萄球菌结合体的酶切保护作用(图1)：适配体SA43能快速识别并特异性结合金黄色葡萄球菌，从而防止被外切酶酶切。进一步地，适配体可与分子信标MB稳定杂交，打开MB的发卡结构，显著提高荧光信号。相反，当样品不含金黄色葡萄球菌时，SA43易被外切酶切断，导致其无法与MB杂交。此时，MB将呈头尾自杂交结构，实现荧光猝灭。通过荧光强度与菌浓度的线性曲线，即可定量检测金黄色葡萄球菌。该方法具有适配体易合成、免培养、免分离和灵敏度高等优点。
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公开(公告)号：CN111471743A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010416742.8
申请日：2020-05-15
申请人： 四川大学华西医院
摘要： 本发明公开了一种microRNA let-7a的检测试剂盒，属于分子检测领域。所述试剂盒包括分子识别试剂和信号转换试剂；所述分子识别试剂是一类嵌有银离子的DNA双链分子，所述DNA双链分子由底物链和错配链碱基互补配对而成，其中底物链与错配链各有一个胞嘧啶碱基C，在银离子的作用下相互配对；所述信号转换试剂由脲酶、尿素和苯酚红组成。当样品中存在let-7a时，let-7a与错配链竞争性结合底物链，置换出错配链，银离子游离出来，抑制脲酶活性，尿素-苯酚红溶液体系始终保持黄色；若没有let-7a，尿素-苯酚红溶液体系呈红色。本发明的试剂盒具有良好的稳定性、灵敏度和便捷性。
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公开(公告)号：CN109946274A
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201910198063.5
申请日：2019-03-15
申请人： 四川大学
摘要： 本发明公开了一种基于适配体固有构象诱导的检测黄曲霉毒素B1的方法，利用TAMRA荧光分子标记黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）的核酸适配体，并加入能特异性识别并嵌入DNA双链结构而发强光的EvaGreen分子，基于荧光共振能量转移（FRET）机制，通过核酸适配体分子对目标分子固有构象响应的变化，结合双链染料EvaGreen的荧光显色，对AFB1进行快速均相定量。本发明公开的方法只利用了核酸适配体的自身结构，避免了核酸探针的复杂设计，另一方面，所有反应在室温下的一个管内进行一次混合步骤即可，消除了分离和温度控制的步骤。该方法具有原理简单、成本低廉、灵敏度高以及选择性好等优点，对AFB1的检测限为0.32 ng/ml，并能对不同食品基质的样品进行检测，是具有竞争力的AFB1快速检测方法。
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公开(公告)号：CN109490260A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811123343.1
申请日：2018-09-26
申请人： 四川大学
IPC分类号： G01N21/64
CPC分类号： G01N21/6428 , G01N2021/6432
摘要： 本发明提供了一种低背景和温度稳定的功能核酸荧光传感器，包括分子识别元件和信号转换元件，分子识别元件为铅离子依赖型脱氧核酶，铅离子脱氧核酶由脱氧核酶底物链和脱氧核酶酶链组成，脱氧核酶底物链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示，脱氧核酶酶链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示；信号转换元件由5’端被荧光染色基团标记的Sub F和3’端被荧光猝灭基团标记的Sub Q组成，Sub F与Sub Q的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明还提供了一种该荧光传感器在铅离子检测中的应用。本发明提供的荧光传感器可提高现有生物传感器法检测铅离子的灵敏度和对检测环境的耐受性。
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