一种基因突变原位成像方法

    公开(公告)号:CN116083534B

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202310210105.9

    申请日:2023-03-07

    申请人: 四川大学

    摘要: 本发明公开了一种利用点亮RNA适配体的单碱基突变成像方法,属于细胞内基因原位检测领域。通过连接酶辅助转录反应实现对单核苷酸位点变异(SNV)的识别,使用点亮的RNA适配体作为报告体,消除了非特异性探针结合和清洗过程,与使用荧光原位杂交方法相比,信号显著提高。因此,本发明可以精确定量细菌混合物中的耐药菌株,并鉴定从家禽养殖场分离出的耐药沙门氏菌。

    提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法

    公开(公告)号:CN118165908A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202410569994.2

    申请日:2024-05-09

    申请人: 四川大学

    摘要: 本发明属于微生物技术领域,公开了一种提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法。本发明将谷氨酸添加到多变拟威克酵母盐胁迫培养体系中,通过酶标仪测定吸光度来反映酵母菌的盐耐受能力。结果表明,在12%盐胁迫条件下培养36 h,多变拟威克酵母菌培养液吸光值为0.167,而相同条件下添加1 g/L谷氨酸后多变拟威克酵母培养液吸光值为1.267;在18%盐胁迫条件下培养168 h,多变拟威克酵母菌培养液吸光值为0.083,而相同条件下添加1 g/L谷氨酸后多变拟威克酵母培养液吸光值为1.002可以较为明显地提高多变拟威克酵母盐耐受能力。

    一种山椒素的快速检测方法
    3.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117470925A

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202311580805.3

    申请日:2023-11-24

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: G01N27/26 G01N27/30 G01N27/48

    摘要: 本发明属于电化学检测技术领域,公开了一种山椒素的快速检测方法。本发明通过电化学的方法实现对于花椒及其制品中酰胺类物质的快速检测,以未经修饰的三电极丝网印刷电极为检测电极,以含量为0.1mol/L的盐酸溶液作为支撑电解质,通过检测前富集处理,采用示差脉冲法进行扫描,本发明方法在2‑50mg/L的范围内,电化学的响应电流值与山椒素的浓度之间呈良好的线性关系,检出限为0.22mg/L,重复性好(RSD≤5%),该方法与紫外分光光度法具有良好的检测一致性,能够作为对花椒及其制品中的山椒素含量准确定量的快速检测方法。与现有技术相比,本方法灵敏度高,特异性强,操作简单,同时,采用未修饰的丝网印刷电极作为检测元件,有效地控制了检测成本,有利于快检技术的落地。

    一种沙门氏菌活菌可视化检测方法

    公开(公告)号:CN116590443A

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202310681374.3

    申请日:2023-06-09

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C12Q1/689 C12Q1/6844 C12R1/42

    摘要: 本发明公开了一种沙门氏菌活菌可视化检测方法,属于核酸检测领域。本发明以沙门氏菌RNA为靶标,通过滚环扩增(RCA)实现了在恒温条件下对靶标的信号放大,并通过荧光成像直接计数扩增产物,实现了对沙门氏菌活菌的高灵敏、宽线性范围的可视化检测。本发明所构建的方法能够在101‑107 CFU/mL的范围内对沙门氏菌活菌进行定量,线性范围广,其检出限为10 CFU/mL。该方法能够在活/死菌混合体系内,检测低至0.1%的沙门氏菌活菌。本发明应用于巴氏杀菌法的杀菌效果评估,与标准培养法相比,回收率在85.84%‑116.51%之间,为食品微生物控制方法提供了一种新的筛选和评估工具。

    一种基因突变原位成像方法

    公开(公告)号:CN116083534A

    公开(公告)日:2023-05-09

    申请号:CN202310210105.9

    申请日:2023-03-07

    申请人: 四川大学

    摘要: 本发明公开了一种利用点亮RNA适配体的单碱基突变成像方法,属于细胞内基因原位检测领域。通过连接酶辅助转录反应实现对单核苷酸位点变异(SNV)的识别,使用点亮的RNA适配体作为报告体,消除了非特异性探针结合和清洗过程,与使用荧光原位杂交方法相比,信号显著提高。因此,本发明可以精确定量细菌混合物中的耐药菌株,并鉴定从家禽养殖场分离出的耐药沙门氏菌。

    一种基于核酶-CRISPR的食品铅污染检测方法

    公开(公告)号:CN114480581A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210171887.5

    申请日:2022-02-24

    申请人: 四川大学

    摘要: 本发明公开了一种基于核酶‑CRISPR的食品铅污染检测方法,利用核酶对铅离子的高度选择性及CRISPR相关蛋白Cas12a的反式切割活性的灵敏性对铅离子进行高灵敏定性、定量分析。通过报告分子的荧光强度变化指示铅离子的存在与否及浓度变化情况,将痕量铅离子浓度信号转化为荧光信号,提高检测灵敏度,降低实验检出限。同时避免了核酸扩增带来的假阳性问题。铅离子作为核酶酶链的辅酶,可以激活酶链的酶切活性并高效地切割底物链,缩短反应时间,为食品、环境中的痕量铅污染的快速检测提供了可能。本发明是不依赖于扩增的一管混反应,不仅灵敏,同时简化了实验操作。本发明对向导RNA(gRNA)的序列、预引物的长度、dsDNA靶标的长度及核酶臂长进行了优化,检出限为0.027nM。

    一种桑叶发酵茶及其制备方法

    公开(公告)号:CN113749169A

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202010490935.8

    申请日:2020-06-02

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: A23F3/34

    摘要: 本发明公开了一种桑叶发酵茶及其制备方法。本发明所述的桑叶发酵茶是以新鲜桑叶为原料,经过清洗、萎凋、去柄切条后揉捻、发酵,再通过干燥、提香,将其包装后即得所述桑叶发酵茶。利用本发明制得的桑叶发酵茶外形卷曲、色泽乌黑,茶汤透明清亮、呈橘红色,香气带水果甜香或季节性花香,滋味浓厚绵长、不苦不涩、且具有桑叶的特征滋味并伴有回甜,具有降血压、降血糖等保健功能。

    一种功能核酸荧光传感器及其在铅离子检测中的应用

    公开(公告)号:CN109490260B

    公开(公告)日:2020-12-22

    申请号:CN201811123343.1

    申请日:2018-09-26

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: G01N21/64

    摘要: 本发明提供了一种低背景和温度稳定的功能核酸荧光传感器,包括分子识别元件和信号转换元件,分子识别元件为铅离子依赖型脱氧核酶,铅离子脱氧核酶由脱氧核酶底物链和脱氧核酶酶链组成,脱氧核酶底物链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示,脱氧核酶酶链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示;信号转换元件由5’端被荧光染色基团标记的Sub F和3’端被荧光猝灭基团标记的Sub Q组成,Sub F与Sub Q的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明还提供了一种该荧光传感器在铅离子检测中的应用。本发明提供的荧光传感器可提高现有生物传感器法检测铅离子的灵敏度和对检测环境的耐受性。

    识别增强型亚稳态核酸适配体探针及在目标物质计数分析中的应用

    公开(公告)号:CN109385426B

    公开(公告)日:2020-11-27

    申请号:CN201811052993.1

    申请日:2018-09-10

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: C12N15/115 C12Q1/6851

    摘要: 本发明所述识别增强型亚稳态核酸适配体探针,熔炼温度Tm低于45℃,为末端互补的发卡形结构;当有目标物质存在时,该核酸适配体探针能够与目标物质结合,并进而打开其末端茎部,通过聚合酶的作用引发滚环扩增反应,当无目标物质存在时,该核酸适配体探针形成闭合结构,并可通过延长末端茎部使其双链结构更稳定,不能在聚合酶的作用下引发滚环扩增反应。优选的识别增强型亚稳态核酸适配体探针,核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所述。该识别增强型亚稳态核酸适配体探针在目标物质计数分析中应用,可提升对目标分子的响应灵敏性和识别效率,回收率达88~110%。

    一种低背景和温度稳定的功能核酸荧光传感器及其在铅离子检测中的应用

    公开(公告)号:CN109490260A

    公开(公告)日:2019-03-19

    申请号:CN201811123343.1

    申请日:2018-09-26

    申请人: 四川大学

    IPC分类号: G01N21/64

    CPC分类号: G01N21/6428 G01N2021/6432

    摘要: 本发明提供了一种低背景和温度稳定的功能核酸荧光传感器,包括分子识别元件和信号转换元件,分子识别元件为铅离子依赖型脱氧核酶,铅离子脱氧核酶由脱氧核酶底物链和脱氧核酶酶链组成,脱氧核酶底物链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示,脱氧核酶酶链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示;信号转换元件由5’端被荧光染色基团标记的Sub F和3’端被荧光猝灭基团标记的Sub Q组成,Sub F与Sub Q的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明还提供了一种该荧光传感器在铅离子检测中的应用。本发明提供的荧光传感器可提高现有生物传感器法检测铅离子的灵敏度和对检测环境的耐受性。