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公开(公告)号：CN116904402A
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202310846981.0
申请日：2023-07-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开一株分泌猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用，该杂交瘤细胞株的保藏编号为：CGMCC NO.45603。本发明筛选出一株具有PRRSV阳性血清阻断效果的单抗12E1，成功建立可PRRSV N蛋白阻断ELISA抗体检测方法。该方法具有较高的敏感性和特异性，与IDEXX PRRSV ELISA抗体检测试剂盒符合率94.3％，可用于PRRSV抗体检测和血清流行病学调查。
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公开(公告)号：CN114014916B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202111422353.7
申请日：2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/005 , G01N33/68 , C07K16/08
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用，本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60‑120aa的基因片段删除，得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因，将该编码基因克隆至pET32a，再转化至Rosseta感受态细胞，经IPTG诱导表达，可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达，可与His标签抗体结合，采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫，可以得到多克隆抗体，该多克隆抗体效价高，与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板，对PCV3进行间接ELISA抗体检测，具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号：CN115927745A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210943330.9
申请日：2022-08-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种检测6种猪冠状病毒的RT‑PCR检测方法。本发明的检测方法可用于检测6种猪冠状病毒，实验结果表明，本发明的方法通过一对引物即可检测6种猪源冠状病毒的核酸，提高了检测效率，可节省检测的费用，对于临床发病猪未知样品检测具有重要应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109762052B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201910046124.6
申请日：2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用，本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第1‑120aa或60‑120aa的基因片段删除，得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因，将该编码基因克隆至pET32a，再转化至Rosseta感受态细胞，经IPTG诱导表达，可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达，可与His标签抗体结合，采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫，可以得到多克隆抗体，该多克隆抗体效价高，与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板，对PCV3进行间接ELISA抗体检测，具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号：CN107841507B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201711177363.2
申请日：2017-11-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种高效表达的猪圆环病毒2型Cap‑穿膜肽融合蛋白基因及其应用，该融合蛋白的编码基因为(1)～(3)中的任意一种：(1)融合穿膜肽TAT基因序列的Cap基因；(2)融合穿膜肽ppTG20基因序列的Cap基因；(3)融合蜜蜂信号肽HBM基因序列的Cap基因。本课题组研究发现，穿膜肽与pVAX‑Cap质粒混合制备的DNA疫苗能提高其在小鼠体内的免疫应答水平。本研究将TAT、ppTG20，HBM与PCV2 Cap蛋白N端融合，成功构建重组杆状病毒，实现了Cap蛋白有效表达，为PCV2基因工程疫苗研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106511991B
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201611139167.1
申请日：2016-12-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K39/215 , A61K39/39 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12N15/85
Abstract: 本发明涉及基因疫苗技术领域，特别涉及一种Ii基因序列在猪流行性腹泻病毒基因疫苗中的应用，Ii基因碱基序列见序列表中序列8。将Ii基因载体和S1（m）基因载体混合或者将Ii基因与S1（m）基因连接后用于猪流行性腹泻病毒基因疫苗的制备，S1（m）基因碱基序列见序列表中序列10。在经密码子优化的S1基因的基础上，成功构建了真核表达质粒pVAX‑S1（m）和pVAX‑Ii‑S1（m），小鼠免疫试验验证S1蛋白的免疫原性和Ii作为分子佐剂在提高体液和细胞免疫中发挥的作用，首免后63d出现特异性抗体，首免后84d抗体明显升高，为研制PEDV疫苗提出新的思路，为猪体试验奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110221064A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910435600.3
申请日：2019-05-23
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/535
Abstract: 本发明提供一种猪塞尼卡谷病毒ELISA抗体检测方法及应用，该方法以SVV 3AB重组蛋白作为包被抗原，本发明的3AB ELISA抗体检测方法作为一种检测工具，可用于临床血清检测，为疫病的诊断、SVV抗体检测试剂盒的研发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103695376A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310560761.8
申请日：2013-11-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株以及所述的杂交瘤细胞株在制备猪圆环病毒2型Cap蛋白的单克隆抗体中的应用，其中所述杂交瘤细胞株保藏编号CGMCC No.8169，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明所涉及的杂交瘤细胞具有稳定的抗体分泌能力，所分泌的单克隆抗体与猪圆环病毒2型Cap蛋白具有良好的反应特异性。此研究为以后进行PCV2病原学及其致病机理的研究奠定了良好的物质基础。
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