一种制备玉米黄粉高F值寡肽的方法

    公开(公告)号:CN112680491A

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN201910987553.3

    申请日:2019-10-17

    Abstract: 本发明公开了一种高F值活性肽的制备方法,属于玉米蛋白深加工技术领域。本发明以玉米黄粉为原料,以纳豆芽孢杆菌为蛋白酶生产菌,通过发酵45h后得到的酶活较高的发酵粗酶液酶解玉米蛋白得到初步酶解产物,再使用风味蛋白酶对上述产物进行顺次酶解,然后利用活性炭吸附脱芳,最后对处理后的产物经过分离纯化后冷冻干燥得到高F值活性肽成品。本发明能够提高玉米黄粉的利用率,酶解液中寡肽含量达到17.8mg/ml,蛋白利用率达53%,同时吸附后寡肽F值达到24。本发明技术作用条件温和,更多地保留了制备的高F值活性肽和原料本身所含其它功能性成分的生物学活性,有着良好的应用前景。

    一种强化农林生物质原料浓醪酶解产糖的方法

    公开(公告)号:CN110157755B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201910467348.4

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种强化农林生物质原料浓醪酶解产糖的方法,属于酶工程技术领域。该方法按如下方法进行:(1)通过分批补料的方式将基质浓度提升至20%‑35%;(2)向(1)添加纤维素酶至酶载量为0.1‑3FPU/g;(3)复配表面活性剂辅助酶解过程,在50℃条件下酶解24‑96h后可发酵性糖浓度至150‑230g/L。本发明首次提出在低酶载量、复配表面活性剂条件下实施纤维素酶解,可使发酵性糖产量高,生产过程简单,极大地降低了生产成本,是一种可行的利用农林生物质原料浓醪酶解产糖的方法。

    水平酶活达到了410U/mL,发酵上清液中蛋白含一种提高木质纤维素基质水解酶产量的方 量达到了0.37mg/mL。法

    公开(公告)号:CN106434735A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610892831.3

    申请日:2016-10-12

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N15/815 C12N9/2482 C12N2800/22 C12Y302/01008

    Abstract: 本发明公开提供了一种提高半纤维素酶、纤维素酶或木质纤维素水解辅助酶蛋白在毕赤酵母中异源表达量的方法。本发明通过毕赤酵母密码子偏好的特性,对来源于黑曲霉Aspergillus niger的木聚糖酶(XynC)基因进行密码子优化,其优化后的核苷酸序列(AxynC)经人工合成,并构建重组毕赤酵母表达载体pPIC9K-AxynC和pPICZαA-AxynC。利用两步电击转化法,构建高产木聚糖酶的重组毕赤酵母,即将线性化的pPIC9K-AxynC转化毕赤酵母GS115,获得了一株产酶能力较强的菌株。以该高酶活菌株作为宿主菌进行第二次电击转化,将线性化的pPICZαA-AxynC电击转化该菌株,获得了一株高产木聚糖酶的双质粒重组毕赤酵母。通过检测表明,经过密码子优化的木聚糖酶基因能够在毕赤酵母中成功表达,而且利用两步电击转化法构建的高产木聚糖酶重组菌能稳定高效生产木聚糖酶,摇瓶

    一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法

    公开(公告)号:CN105420269A

    公开(公告)日:2016-03-23

    申请号:CN201510918697.5

    申请日:2015-12-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。

    高产反式-4-羟脯氨酸sucA基因敲除菌的构建

    公开(公告)号:CN105385703A

    公开(公告)日:2016-03-09

    申请号:CN201510702317.4

    申请日:2015-10-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 高产反式-4-羟脯氨酸sucA基因敲除菌的构建。本发明公开了一种利用基因敲除获得反式-4-羟基-L-脯氨酸的生物合成方法。在大肠杆菌BL21(DE3)△putA的基础上敲除基因sucA,打断TCA循环中由α-酮戊二酸生成琥珀酸(由α-酮戊二酸脱氢酶复合体催化的)的过程,同时插入反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶基因(hyp),之后转入质粒pUC19-Ptrp2-hyp-vgb。由羟化酶取代α-酮戊二酸脱氢酶的作用,“回补”TCA循环过程,保证TCA循环进行的同时产生羟脯氨酸。本发明还公开了所述重组大肠杆菌在生产反式-4-羟脯氨酸中的应用,摇瓶发酵结果表明,培养基优化后的羟脯氨酸产量为1344.1mg/L,是优化前的5.53倍左右。与同样转入质粒pUC19-Ptrp2-hyp-vgb的原菌相比,在产羟脯氨酸方面具有优势。

    一种提取甘蔗渣纤维素的方法

    公开(公告)号:CN105018546A

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201410189593.0

    申请日:2014-04-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种提取甘蔗渣纤维素的方法,其特征在于:以甘蔗渣为原料,采用循环应用甘油/水预处理的方法,蒸煮温度为200℃-240℃,蒸煮时间1小时-5小时,并运用蒸煮过程中的抽滤、洗涤的甘油可7次循环蒸煮处理甘蔗渣,而蒸发、洗涤、抽滤的水则回收用于沉淀木质素,达到了提取甘蔗渣纤维素的目的,采用美国能源实验室NREL法测定其纤维素组分,纤维素保留率为94%,木质素去除率为55%以上,酶解效率48%,实现了循环应用甘油/水预处理甘蔗汁渣废料为纤维素再利用目标,又节省了大量的甘油/水,为今后大规模乃至工业化生产起到积极的作用。

    一种农林生物质废弃物浓醪发酵产纤维素乙醇的方法

    公开(公告)号:CN104862344A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510212735.5

    申请日:2015-04-29

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P7/10 Y02E50/16 C12P19/14

    Abstract: 本发明提供了一种农林生物质废弃物浓醪发酵产纤维素乙醇的方法,生物质废弃物甘油溶液混合后加热升温至150~240℃,保温蒸煮0.5~5hr;蒸煮结束后,加入沸水使甘油浓度在30~70%时充分离解15~60min;离解疏散后过滤或者离心即获得粗纤维素,甘油溶液和沸水分别洗涤1~4次后,即获得甘油有机溶剂预处理纤维素;以初始基质浓度10~40%的该纤维素为基质,按10~80FPU/g干基质添加纤维素酶,按6~20g/L添加硫酸铵作氮源,按6~14%质量比接入酿酒酵母种子液后在32~42℃下进行糖化发酵40~120hr产乙醇含量可达80g/L以上。本发明在预处理时使用甘油作蒸煮剂,发酵抑制物少,有希望同时推进生物柴油和纤维素乙醇的工业化,发酵培养基简单经济,乙醇产量高。

    一种利用外源气体辅助蒸汽爆破生物质废弃物制备固体燃料的方法

    公开(公告)号:CN104212531A

    公开(公告)日:2014-12-17

    申请号:CN201410497348.6

    申请日:2014-09-25

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02E50/10 Y02E50/30

    Abstract: 本发明公开了一种利用外源气体辅助蒸汽爆破生物质废弃物制备固体燃料的生产方法,涉及废弃物资源化利用和生物质能源领域。包括如下步骤:生物质废弃物破碎至2-30×10-150×10-30mm,调湿至含水量15-50%;将物料装入汽爆罐,密封后通入外源气体,通气时间10-90秒至压力0.5-2.0MPa,再通入饱和水蒸气0-60秒直至压力2.0-3.0MPa,维持2-20min后突然卸阀实现物料的瞬间减压释放;汽爆物料通过挤压成型生产生物质固体燃料。本发明:1)汽爆处理可代替部分机械粉碎;2)汽爆打破生物质废弃物致密顽抗性组成结构,使物料变得松散细软,有助于挤压成型;2)外源气体代替水蒸汽可避免汽爆后物料含水量过高。本发明具有简便易行、处理效率高、原料成本低和便于大规模工业化生产的特点。

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