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公开(公告)号：CN105671025A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610123619.0
申请日：2016-03-04
申请人： 江南大学
CPC分类号： C12N9/485
摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB基因及应用。本发明提供了一种来源于大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacB，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述dacB的编码基因dacB。本发明的D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-丙氨酸(D-Ala)，导致转肽反应中供体不可用，从而控制肽聚糖的网状交联水平，可以提高E.coli蛋白胞外分泌水平。
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公开(公告)号：CN104774817A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510179542.4
申请日：2015-04-15
申请人： 江南大学
CPC分类号： C12N9/1051 , C12P19/18 , C12Y204/01099
摘要： 本发明涉及基因工程领域，具体地，一种果糖基转移酶FWT01及其编码基因与应用。本发明提供了一种来源于黑曲霉(Aspergillus niger)的果糖基转移酶FWT01，其氨基酸序列如序列1所示，且本发明提供了编码上述果糖基转移酶的编码基因FWT-01。本发明的果糖基转移酶具有以下性质：1)可在毕赤酵母(Pichia pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等宿主中异源表达；2)具有较宽的温度稳定性性，在50以下酶稳定；3)具有较宽的pH稳定范围：在pH4.0-9.0条件下稳定(酶活力残留＞90％)；4)具有高低聚果糖转化率，其浓度为57.3％(w/w)。
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公开(公告)号：CN118240859A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410298243.1
申请日：2024-03-15
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种产角鲨烯的热带假丝酵母工程菌及其构建方法，属于微生物技术领域。本发明以热带假丝酵母DC03为出发菌株，将来源于酿酒酵母的角鲨烯合成酶基因通过CRISPR‑Cas9技术整合至热带假丝酵母菌株DC03的基因组上。通过代谢工程改造，整合表达了异源角鲨烯合酶基因ScERG9，并在过表达基因ScERG9后，将其与法尼基焦磷酸合酶基因ERG20进行融合表达，并敲除DPP1基因、弱化BTS1基因、下调ERG1基因表达等组合策略后，经发酵体积优化，重组热带假丝酵母的角鲨烯产量达到了202.5mg/L。本发明的制备方法具有成本低、效率高、操作简易、前景广等特点。
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公开(公告)号：CN117802061A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202211207521.5
申请日：2022-09-30
申请人： 新加坡国立大学 , 苏州工业园区新国大研究院 , 江南大学
摘要： 本申请涉及酶工程技术领域，尤其涉及一种胺脱氢酶突变体及其应用。本申请通过对原始酶TM_pheDH进行饱和突变，筛选获得具有高酶活力的胺脱氢酶突变体TM_pheDH/A62M，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，通过对该胺脱氢酶突变体TM_pheDH/A62M纯化分析，酶比活力和催化效率常数kcat值分别提高至原始酶TM_pheDH的1.12倍和1.16倍，而且热稳定性好，同时利用该胺脱氢酶突变体TM_pheDH/A62M催化酮基底物如苄基丙酮、对溴苯乙酮、间氯苯乙酮等进行不对称还原胺化反应，不仅转化率高，而且产物立体选择性好，因此在α‑手性胺生产领域中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN117802056A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311770042.9
申请日：2023-12-21
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用，属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1，通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变，以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞，分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体，筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株，产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L，并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。
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公开(公告)号：CN117487680A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311417949.7
申请日：2023-10-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种合成ω‑氨基脂肪酸的酵母工程菌株构建及应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种重组热带假丝酵母，所述重组热带假丝酵母为，敲除了基因组上的肉毒碱乙酰基转移酶基因、脂肪醛脱氢酶基因CtALD1、CtALD2，同时，在基因组上分别整合NADPH‑P450还原酶基因CtNCP、细胞色素氧化酶基因CYP52A17、长链脂肪酸转运蛋白基因CtFAT1、脂肪醇氧化酶基因FAO1基因和/或ω‑转氨酶基因CvTA基因，得到菌株在摇瓶发酵中产量从最初的30mg/L提高到了3075mg/L，在5L发酵罐中最终产量达到了20.3g/L，提高产量的同时为ω‑氨基脂肪酸生产菌株的研究提供思路。
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公开(公告)号：CN117487675A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311745114.4
申请日：2023-12-19
申请人： 江南大学
摘要： 一株稳定表达人乳铁蛋白的里氏木霉菌株及其应用，属于微生物及发酵工程技术领域。本发明通过在里氏木霉不同的宿主菌中表达人乳铁蛋白基因，筛选表达产物稳定的重组菌。进一步通过诱变育种获得生长速度快同时产物稳定的菌株，其中编号为CJ2095的菌株的生长速度正常而表达产物的稳定性明显高于其它菌株。该菌株命名为Trichoderma sp.CJ2095，中文名为里氏木霉CJ2095，该菌株已保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 20231481。该菌株发酵获得的重组人乳铁蛋白在发酵液中能较长时间的保持稳定，在大规模发酵制备重组人乳铁蛋白时能减轻企业后提取工作压力、降低后提取成本，有效减少了后提取工段的设备投资。
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公开(公告)号：CN116694589A
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202310663759.7
申请日：2023-06-06
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种7β‑羟基类固醇脱氢酶的突变体及其应用。所述的7β‑HSDH突变体在SEQ ID NO.1所示的野生型上进行单点突变、两两复合突变和三点复合突变，经筛选获得复合突变体T189V/V207M，在此基础上进一步筛选出25个氨基酸残基位点，通过定点饱和突变，提高7β‑HSDH的催化效率以及热稳定性的突变体T189V/V207M/V91P、T189V/V207M/M144H、T189V/V207M/G146A、T189V/V207M/A158S、T189V/V207M/V183I。本发明构建的突变后的7β‑HSDH突变体相较于出发7β‑HSDH酶活力提高了3.8倍，突变后的7β‑HSDH突变体在催化100g·L‑1的7‑酮基‑石胆酸转化率可达到91％，具有工业化生产前景。
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公开(公告)号：CN114736918B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202210356043.8
申请日：2022-03-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种整合表达生产红景天苷的重组大肠杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明采用E.coli YMGR5A作为宿主菌株，整合表达了来源于拟南芥的糖基转移酶基因UGT85A1，即在宿主菌株中，在不同位点整合表达的UGT85A1基因，获得多拷贝数的产红景天苷重组大肠杆菌菌株；E.coli 5A8S菌株在装有50mL M9Y培养基的250mL摇瓶发酵后，红景天苷的产量为2.42g/L。在装有2.5L M9Y培养基的5L发酵罐发酵后，红景天苷最高产量为9.34g/L，单位菌体浓度的产量为0.27g/(L·OD600)，而且该整合表达菌株相比质粒表达菌株而言，具有良好的遗传稳定性和生长状况。
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公开(公告)号：CN114277040B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202111597793.6
申请日：2021-12-24
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种高效合成β‑胡萝卜素菌株的构建方法及其应用，属于代谢工程领域。所述构建方法为将β‑胡萝卜素合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达，从IPP和DMAPP到β‑胡萝卜素合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达，从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株β‑胡萝卜素产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后发酵液中菌体干重可达213g/L，β‑胡萝卜素产量可达6.5g·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成β‑胡萝卜素，具有良好的应用前景。
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