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公开(公告)号:CN1428420A
公开(公告)日:2003-07-09
申请号:CN02139883.6
申请日:2002-12-30
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 一种D-氨基酸氧化酶提取纯化方法,先用稀盐酸将发酵生产的发酵液调pH,再用加入20%的氯化钙,然后加入的壳聚糖,最后用稀碱将pH调到7.6-7.8,离心得离心菌液。控制菌液活力8-10u/ml,加入表面活性剂,用稀碱调pH用热水升温,搅拌,自然搅拌浸泡3-5小时,纯化过程则是用氯化钙溶液下调浸泡后菌液pH,板框过滤收集酶清液,用氢氧化钠溶液上调酶清液pH至7.6-8.0,再板框过滤收集清液。本发明可使酶液的比活力提高一倍以上。
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公开(公告)号:CN115340587B
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202211035118.9
申请日:2022-08-26
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
IPC: C07J9/00
Abstract: 本发明涉及药物提取领域,具体涉及一种从家禽胆汁中制备牛磺鹅去氧胆酸和牛磺胆酸的方法,对家禽胆汁进行水提,将水提液和疏水溶剂混合并采用改性超疏水海绵进行油水分离处理,得到除杂水提液;所述的改性超疏水海绵包括海绵基底,复合在海绵基底骨架上的CNTs,包覆海绵骨架以及CNTs的聚多巴胺,以及修饰在聚多巴胺上的碳链长度为16~20的长链伯胺;对除杂水提液进行酸化,随后进行柱色谱梯度洗脱,其中,柱色谱的分离柱的填料为三甲基氯硅烷封端的改性反相填料;洗脱液为甲醇水溶液。本发明中,创新地采用所述改性超疏水海绵辅助进行油水分离,进一步配合特殊改性填料和洗脱条件的联合,可以协同改善牛磺胆酸、牛磺鹅去氧胆酸的提取收率和纯度。
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公开(公告)号:CN118460492A
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202410668167.9
申请日:2024-05-28
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 本发明属于酶领域,具体涉及一种异丙醇脱氢酶的突变体,为SEQ ID NO 1所示的氨基酸序列的第W131、R257、T219、D230、T78位点中的至少一个位点进行突变的突变体。本发明还公开了利用所述的异丙醇脱氢酶的突变体催化异丙醇脱氢合成丙酮和辅酶的反应,并进一步利用该反应和PPO酶促合成L‑PPT的反应联合,实现L‑PPT的高效、稳定合成。
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公开(公告)号:CN117448295A
公开(公告)日:2024-01-26
申请号:CN202311665348.8
申请日:2023-12-06
Applicant: 江南大学 , 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种S‑腺苷甲硫氨酸合成酶突变体,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明通过对氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的S‑腺苷甲硫氨酸合成酶的第56位谷氨酸、第105位谷氨酰胺分别同时突变为天冬酰胺或谷氨酰胺、精氨酸得到最优S‑腺苷甲硫氨酸合成酶突变体E56N/Q105R和E56Q/Q105R;其产物抑制程度得到大幅度减弱,在产物抑制的缓解和转化率的提高使得底物损耗降低,产物得率提高,热稳定性的提高也延长了酶的可使用时间和使用次数,在降低成本的同时提高了利润,在SAM的工业化生产中具有极大的应用前景。
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公开(公告)号:CN116621753A
公开(公告)日:2023-08-22
申请号:CN202310624078.X
申请日:2023-05-30
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术和化工结合领域,涉及一种生物结合化学法制备D‑脯氨酸的方法。通过在工程菌中实现谷氨酸消旋酶和D‑谷氨酸环化酶的共表达,以此工程菌株为全细胞催化剂,以L‑谷氨酸为底物,结合化学方法实现D‑脯氨酸的高效合成。利用本发明的基因工程重组菌株结合化学方法应用于D‑脯氨酸的合成,相比现有技术,原料来源简单,成本更低,产物得率更高,手性纯度更好。
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公开(公告)号:CN115029326A
公开(公告)日:2022-09-09
申请号:CN202210584371.3
申请日:2022-05-27
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明属于酶工程领域,涉及一种酶交联聚集体及其制备方法和应用,该方法相比现有传统的酶交联聚集体的制备方法,不需要用到有毒的化学交联试剂戊二醛,无需添加蛋白沉淀剂、省略了蛋白沉淀步骤,本发明所制备的酶交联聚集体酶活回收率高、热稳定性和有机溶剂耐受性好。利用本发明制备的酶交联聚集体用于茶黄素的催化合成,具有更高的产率和更多的批次使用性。
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公开(公告)号:CN113481189B
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202110868362.2
申请日:2021-07-30
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
IPC: C12N9/90 , C12N11/089 , C12N15/70 , C12P19/24 , C12P19/12
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,涉及一种蔗糖异构酶突变体及其应用。所述的突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的野生型蔗糖异构酶中突变R434P与E273N。突变体较野生型蔗糖异构酶热稳定性和发酵活力均显著提高。利用突变体制备的固定化酶活力更高,稳定性显著增加,蔗糖转化率和异麦芽酮糖生成率有所提高,杂质含量更低,更适用于工业应用。
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公开(公告)号:CN111235126B
公开(公告)日:2021-08-20
申请号:CN202010250584.3
申请日:2020-04-01
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,涉及一种S‑腺苷甲硫氨酸合成酶突变体及利用其的制备方法。所述的突变体在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的野生型S‑腺苷甲硫氨酸合成酶中突变多个氨基酸位点,突变的多个氨基酸位点包括C9R与K224R。利用本发明的S‑腺苷甲硫氨酸合成酶突变体及利用其的制备方法,能够使突变体较野生型S‑腺苷甲硫氨酸合成酶具有更高的比活力,并能在催化制备S‑腺苷甲硫氨酸时具有更高的产物收率与更低的酶活下降。
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公开(公告)号:CN109182284B
公开(公告)日:2020-12-04
申请号:CN201811135213.X
申请日:2018-09-28
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供了一种7β‑羟基类固醇脱氢酶突变体、编码序列、重组表达载体、基因工程菌及应用。对来源于产气柯林斯菌的7β‑羟基类固醇脱氢酶进行突变,获得的突变体Ca7β‑2的还原活力提高了7.6倍,还原氧化活力比值提高了4倍,在浓度为100mM的UDCA条件下孵育1小时,活力仅下降了8.4%;在30℃,pH8.0条件下催化合成UDCA和T‑UDCA,转化时间由24小时缩短到2小时,其中底物7‑KLCA的摩尔转化率为100%,底物T‑7‑KLCA摩尔转化率为99.5%。突变后的7β‑HSDH极大程度地降低了生产成本,提高了生产效率,更适合于工业化应用。
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公开(公告)号:CN107267471B
公开(公告)日:2020-07-14
申请号:CN201710543648.7
申请日:2017-07-05
Applicant: 湖南福来格生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种双功能谷胱甘肽合成酶突变体、核苷酸序列及其制备方法和应用,GshF突变体的氨基酸序列第3位、第123位、第161位、第194位、第382位和第390位中的至少一个位点与唾液链球菌野生型GshF氨基酸序列的相应位点氨基酸不同,从而获得了合成活性高、反应速率快、转化效率好的GshF突变体。其中GshF‑4突变体合成活力提高了12.8倍,比活提高了11倍,最适温度提高了20℃,在55℃条件下60min保持91.3%的活力,其固定化酶在50℃,pH8.0条件下催化合成GSH,反应60min,GSH浓度可达21g/L,可连续使用300批次以上,具有很好的操作稳定性。
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