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公开(公告)号:CN116676319A
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202310743143.0
申请日:2023-06-21
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种NbG3BP1基因在调控植物抗双生病毒中的应用及转基因植物培育方法,所述双生病毒为TYLCV、TYLCCNV和TLCYnV,NbG3BP1基因的转录本序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过克隆本氏烟NbG3BP1基因,将其构建为带有绿色荧光蛋白的NbG3BP1‑GFP载体,通过农杆菌转化的方法,将NbG3BP1‑GFP载体导入烟草中进行遗传转化,获得NbG3BP1过表达转基因植物。获得的NbG3BP1过表达转基因植物能够显著阻碍TYLCV的侵染,同时也能显著抑制TYLCCNV、TLCYnV的侵染。
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公开(公告)号:CN114045304B
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202111362595.1
申请日:2021-11-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9体系编辑本氏烟基因的载体及构建方法和应用,所述本氏烟基因为NbbZIP60基因,如SEQ ID NO:4所示;针对本氏烟NbbZIP60基因编码区序列靠近5’端的PAM位点设计特异性靶向NbbZIP60的gRNA,构建pCambia 1300‑BKG‑g1载体。将本发明的载体通过遗传转化的方法导入到本氏烟,获得的编辑后代生长状态正常,与野生型本氏烟相比没有明显的发育缺陷,获得基因敲除的植物能够有效抑制双生病毒的侵染。
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公开(公告)号:CN114891801A
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202210429524.7
申请日:2022-04-22
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种本氏烟Pelota基因在调控植物抗病毒中的应用及转基因植物培育方法,所述病毒为马铃薯Y病毒科病毒,Pelota基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过克隆本氏烟中的Pelota基因并构建融合有Flag标签的双元转化载体,使用农杆菌介导的T‑DNA方式进行遗传转化,构建了本氏烟的转基因植物。本发明获得的本氏烟Pelota转基因植物能够对马铃薯Y病毒科内的多种病毒具有广谱的抗病功能。
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公开(公告)号:CN113215189B
公开(公告)日:2022-04-19
申请号:CN202110544185.2
申请日:2021-05-19
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种番茄褐色皱纹果病毒的侵染性克隆载体及其构建方法和应用,在获得番茄褐色皱纹果病毒基因组全序列的基础上,构建了该病毒的侵染性克隆,将包含35S启动子的番茄褐色皱纹果病毒cDNA序列构建入双元载体pCB301中,通过农杆菌介导转化后在寄主体内转录、复制、侵染,以用于病毒的功能基因组研究。本发明方法为研究该病毒基因组结构和功能及病毒与寄主之间的相互作用研究提供了成熟的体系。
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公开(公告)号:CN114317460A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210023201.8
申请日:2022-01-10
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了瓜蒌斑驳花叶病毒及其侵染性克隆载体、构建方法和应用,所述瓜蒌斑驳花叶病毒的微生物保藏编号为CGMCC NO:21930,其序列如SEQ ID NO:15所示。该病毒的侵染性克隆载体由瓜蒌斑驳花叶病毒的全序列融合到带35S启动子和核酶Rz的载体pCB301制备得到。通过农杆菌介导转化后在寄主体内转录、复制、侵染,以用于病毒的功能基因组研究。本发明为研究该病毒的基因组结构和功能以及病毒与寄主之间的相互作用提供了成熟的体系。
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公开(公告)号:CN114045304A
公开(公告)日:2022-02-15
申请号:CN202111362595.1
申请日:2021-11-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9体系编辑本氏烟基因的载体及构建方法和应用,所述本氏烟基因为NbbZIP60基因,如SEQ ID NO:4所示;针对本氏烟NbbZIP60基因编码区序列靠近5’端的PAM位点设计特异性靶向NbbZIP60的gRNA,构建pCambia 1300‑BKG‑g1载体。将本发明的载体通过遗传转化的方法导入到本氏烟,获得的编辑后代生长状态正常,与野生型本氏烟相比没有明显的发育缺陷,获得基因敲除的植物能够有效抑制双生病毒的侵染。
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公开(公告)号:CN113999872A
公开(公告)日:2022-02-01
申请号:CN202111362605.1
申请日:2021-11-17
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了烟草DCP1/ATG8i基因在抑制番茄黄曲叶病毒侵染中的应用,利用农杆菌介导的表达系统,在本氏烟中单独或者共同表达烟草DCP1和ATG8i能够显著减弱番茄黄曲叶病毒的侵染,说明烟草DCP1和ATG8i基因可调控番茄黄曲叶病毒的侵染。本发明方案具有以下优势:(1)操作简易,周期较短;(2)安全高效;(3)表达效率高,表达时间长;(4)在植株叶片上过表达烟DCP1/ATG8i基因抑制番茄黄曲叶病毒的侵染,不会对植物造成损伤,保证植株的完整性。
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公开(公告)号:CN113215189A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110544185.2
申请日:2021-05-19
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种番茄褐色皱纹果病毒的侵染性克隆载体及其构建方法和应用,在获得番茄褐色皱纹果病毒基因组全序列的基础上,构建了该病毒的侵染性克隆,将包含35S启动子的番茄褐色皱纹果病毒cDNA序列构建入双元载体pCB301中,通过农杆菌介导转化后在寄主体内转录、复制、侵染,以用于病毒的功能基因组研究。本发明方法为研究该病毒基因组结构和功能及病毒与寄主之间的相互作用研究提供了成熟的体系。
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公开(公告)号:CN110150138B
公开(公告)日:2021-04-20
申请号:CN201910474933.7
申请日:2019-06-03
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6895 , A01H1/02 , A01H1/04
Abstract: 本发明公开了一种拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体的培育方法及应用,本发明的培育方法通过遗传杂交的方式将xpo1a突变体和xpo1b突变体进行杂交,筛选后代获得拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体。通过本发明方法获得的T3代拟南芥xpo1a/xpo1b±双突变体植物能够显著阻碍芜菁花叶病毒(TuMV)的侵染。
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公开(公告)号:CN110129362B
公开(公告)日:2021-02-09
申请号:CN201910476535.9
申请日:2019-06-03
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/82 , C12N15/65 , C12N15/40 , C07K14/08 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种芜菁花叶病毒P3蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用,该方法将Myc标签和Myc‑GFP标签插入到TuMV侵染性克隆pCambia2300‑TuMV中的P3位置的N端,使其能够表达出具有标签的Myc‑P3蛋白和Myc‑GFP‑P3蛋白。构建出的重组载体pCambia2300‑TuMV:Myc‑P3和pCambia2300‑TuMV:Myc‑GFP‑P3具有以下特征和优势:(1)具有侵染性,插入的标签不会影响TuMV的侵染性;(2)能够表达出特异的标签融合蛋白,可用于后续分析TuMV P3蛋白的功能;(3)由于融合蛋白的高表达性,证明P3是TuMV重要的功能基因,可利用标签抗体进行免疫共沉淀,筛选出与P3互作的寄主蛋白;(4)插入具有GFP荧光标签的P3蛋白,能够观察在病毒侵染下的TuMV P3蛋白真实的功能。
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