芜菁花叶病毒P3蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用

    公开(公告)号:CN110129362B

    公开(公告)日:2021-02-09

    申请号:CN201910476535.9

    申请日:2019-06-03

    Abstract: 本发明公开了一种芜菁花叶病毒P3蛋白插入标签的方法及其重组载体和应用,该方法将Myc标签和Myc‑GFP标签插入到TuMV侵染性克隆pCambia2300‑TuMV中的P3位置的N端,使其能够表达出具有标签的Myc‑P3蛋白和Myc‑GFP‑P3蛋白。构建出的重组载体pCambia2300‑TuMV:Myc‑P3和pCambia2300‑TuMV:Myc‑GFP‑P3具有以下特征和优势:(1)具有侵染性,插入的标签不会影响TuMV的侵染性;(2)能够表达出特异的标签融合蛋白,可用于后续分析TuMV P3蛋白的功能;(3)由于融合蛋白的高表达性,证明P3是TuMV重要的功能基因,可利用标签抗体进行免疫共沉淀,筛选出与P3互作的寄主蛋白;(4)插入具有GFP荧光标签的P3蛋白,能够观察在病毒侵染下的TuMV P3蛋白真实的功能。

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