一种基于RCA技术的DNA纳米传感器快速检测肺炎克雷伯菌的方法

    公开(公告)号:CN118652992A

    公开(公告)日:2024-09-17

    申请号:CN202310227949.4

    申请日:2023-03-10

    摘要: 本发明公开了一种快速检测肺炎克雷伯菌的方法。该方法依次包括如下步骤:取固定了引物的载玻片,之后与能够被K.pTopIV融合蛋白特异识别的DNA底物进行杂交;加入待测样本和Mg2+,孵育;进行RCA反应,得到RCA产物;将探针和RCA产物进行杂交,根据杂交情况判断待测样本是否含有肺炎克雷伯菌和/或待测样本中肺炎克雷伯菌的含量;K.pTopIV融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;引物的3’末端与DNA底物的部分核苷酸序列反向互补;探针和与DNA底物的部分核苷酸序列相同或反向互补。采用该方法检测肺炎克雷伯菌,具有较高的准确性、特异性和敏感性。本发明具有重要的应用价值。

    用于检测哈维弧菌群的基因芯片及其使用方法

    公开(公告)号:CN105296617B

    公开(公告)日:2024-09-17

    申请号:CN201510649243.2

    申请日:2015-10-10

    申请人: 宁波大学

    摘要: 本发明公开了用于检测哈维弧菌群的基因芯片及其使用方法,特点是芯片载体上固载有用于检测溶藻弧菌、坎氏弧菌、哈维氏弧菌、需钠弧菌、副溶血弧菌和轮虫弧菌的核苷酸探针,各个弧菌的探针均使用toxR基因为靶基因,各探针的基因序列如SEQ ID NO.11‑14所示,样品PCR扩增步骤中针对哈维弧菌群不同菌种的toxR基因所设计的PCR扩增的正向引物和带地高辛标记的反向引物的基因序列如SEQ ID NO.15‑26所示,优点是能并行性的快速高效检测病原哈维弧菌群的6种致病弧菌,且准确性和灵敏度高、特异性强。

    一种布鲁氏菌DNA荧光PCR检测试剂盒

    公开(公告)号:CN118600063A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202411071462.2

    申请日:2024-08-06

    摘要: 本发明公开了一种布鲁氏菌DNA荧光PCR检测试剂盒,本发明提供用于布鲁氏菌DNA检测的特异性引物和探针,并建立了应用荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qPCR)对待检样本中布鲁氏菌特异性DNA进行检测的布鲁氏菌DNA荧光qPCR检测方法。本发明的特异性引物探针和检测方法特异性强、灵敏度高、具有良好重复性和稳定性,为布鲁氏菌的感染诊断和鉴别诊断提供了快速、敏感、特异的临床检测方法。

    一种耐药基因检测方法及系统
    66.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118600052A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410730267.X

    申请日:2024-06-06

    IPC分类号: C12Q1/689 C12Q1/686 C12N15/11

    摘要: 本发明提供一种耐药基因检测方法,涉及基因检测技术领域。基于多重荧光标记,单管完成复合扩增,通过收集相关耐药基因序列,比对选择基因保守区域,设计特异性扩增引物。本发明首次实现了在单次检测中,同时检测多个耐药基因的检测。经过筛查之后确定了引物序列及引物加量。复合扩增引物做了减少扩增时间的测试,最终确定了复合扩增的程序。使用片段分析软件分析收集的数据。解决了传统细菌耐药性检测方法虽能提供细菌耐药的表型信息,需要长时间的培养和鉴定,且无法检测耐药基因的问题,突破现有技术的限制,可以在不进行长时间培养和鉴定的情况下,进行检测耐药基因,实现高效快速检测。

    肺炎克雷伯菌快速药敏质谱检测及其耐药性预测系统

    公开(公告)号:CN118599956A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410646690.1

    申请日:2024-05-23

    申请人: 浙江医院

    摘要: 本发明公开了一种肺炎克雷伯菌快速药敏质谱检测方法,包括:采用阳离子调节的MuellerHinton肉汤培养基对细菌悬浮液进行稀释至特定浓度,然后加入至载有不同量抗生素的微孔板中,获得一系列含不同浓度抗生素的细菌悬浮液,37℃孵育2h后,离心、洗涤,随后加入质谱基质液裂解细菌,再将其全部转移至质谱靶板中,常规执行质谱检测,将不能成功获得质谱鉴定结果的对应抗生素浓度判读为最低抑菌浓度。本发明可根据质谱鉴定结果快速判断肺炎克雷伯菌对待测抗生素的敏感性,以CLSI推荐的微量肉汤稀释法这一金标准法为参照,采用加权Cohen's Kappa检验法评价快速药敏质谱检测法和微量肉汤稀释法检测细菌耐药性的一致性。

    检测伤口感染相关病原体的组合物、试剂盒及其用途

    公开(公告)号:CN118581248A

    公开(公告)日:2024-09-03

    申请号:CN202410862686.9

    申请日:2024-06-28

    摘要: 本发明属于分子生物学检测领域,具体地,涉及伤口感染相关病原菌的检测,更具体地,涉及弗氏柠檬酸杆菌、普通变形杆菌、破伤风杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌等至少三种病原体的检测。本发明提供的联检的组合物,主要利用多重荧光PCR分析方法,通过检测不同病原体上的靶点,对不同病原体进行检测,从而在单管反应体系中同时实现弗氏柠檬酸杆菌、普通变形杆菌、破伤风杆菌,和嗜麦芽窄食单胞菌的检测和区分。本发明的组合物,其检测的灵敏度更高,达到500拷贝/mL,特异性好,检测更为准确。

    一种羊溶血性曼氏杆菌LAMP方法及应用

    公开(公告)号:CN118562984A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410713286.1

    申请日:2024-06-04

    摘要: 本发明公开了一种羊溶血性曼氏杆菌LAMP方法及应用,该检测方法包括菌种的培养、细菌基因组DNA的提取、LAMP引物的设计与合成、阳性质粒的构建、质粒的提取、LAMP反应体系建立以及采用LAMP检测方法,所述的LAMP检测方法是采用特异性检测、灵敏度检测和临床样品检测的方法,反应温度为63℃、反应在20‑35min间出现扩增,引物包括外引物、内引物、环引物和上下游引物,所述的外引物是F3和B3;所述的内引物是FIP和BIP;所述的环引物是LF和LB;所述的上下游引物是3F和13R;本发明建立了一种快速、简便的羊溶血曼氏杆菌LAMP方法,可用于临床检测。