有机溶剂耐受性提高的卤代烷脱卤酶DhaA突变体及其应用

    公开(公告)号:CN115820598A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211032106.0

    申请日:2022-08-26

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N9/14 C12N15/70 C12N15/55

    摘要: 本发明是有机溶剂耐受性提高的卤代烷脱卤酶DhaA突变体及其应用,卤代烷脱卤酶DhaA突变体包括E16R/E257R,氨基酸序列SEQ ID NO.3;E121R/E257R,氨基酸序列SEQ ID NO.4;E16R/E93R/E257R,氨基酸序列SEQ ID NO.5;E16R/E121R/E257R,氨基酸序列SEQ ID NO.6;E93R/E121R/E257R,氨基酸序列SEQ ID NO.7;E16R/E93R/E121R/E257R,氨基酸序列SEQ IDNO.8。本卤代烷脱卤酶DhaA突变体应用提高有机溶剂半衰期至100‑385分钟、提高有机溶剂耐受性至2.5‑4.9倍。

    一种具有类漆酶活性的人工酶及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115518691A

    公开(公告)日:2022-12-27

    申请号:CN202211264345.9

    申请日:2022-10-14

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及一种具有类漆酶活性的人工酶及制备方法和应用,向二苯甲酮丙氨酸的碱性水溶液中加入过渡金属铜或锌的氯化盐水溶液,并搅拌使二者混合均匀以完成配位螯合反应,置于30‑80℃的水浴锅中静置0‑60h完成自组装;以8000‑10000rpm离心10‑20min,弃去上清液收集沉淀,之后使用超纯水清洗沉淀,将最后离心所得的沉淀通过真空干燥得到BpA‑Cu和BpA‑Zn固体。本发明的制备条件简单,非天然氨基酸的合成条件成熟且价格低廉,来源广泛;在碱性条件下活性可以保持原始活性的50.2%和在90℃高温下活性保持89.9%活性,可应用于印染等领域的水体中酚类有机污染物的去除。

    双酶分层级联纳米晶体的构建及其作用PET塑料降解的方法

    公开(公告)号:CN114891776A

    公开(公告)日:2022-08-12

    申请号:CN202210618204.6

    申请日:2022-05-24

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明公开双酶分层级联纳米晶体的构建及其作用PET塑料降解的方法;包括基因表达及纯化带有SpyCatcher标签的MHETase,溶解于PBS缓冲液中,然后在溶液中添加CaCl2,形成杂化纳米颗粒;将带有SpyTag标签的DuraPETase通过SpyCatcher‑SpyTag间的相互作用形成稳定的共价键,从而将DuraPETase固定在纳米颗粒表面,制备得到DuraPETase@MHETase纳米晶体;构建的双酶分层级联杂化纳米材料的高比表面积可以提高底物对酶的可及性,并提高酶对自然界不利条件的耐性以及催化活性,增强酶对高结晶度PET的降解效率,从而推动酶处理PET废弃物的工业化应用进程。

    双酶和金纳米粒子共固定化级联催化淀粉生产葡萄糖酸的方法

    公开(公告)号:CN114774401A

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202210393205.5

    申请日:2022-04-14

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N11/14 C12N11/18 C12P7/58

    摘要: 本发明涉及双酶和金纳米粒子共固定化级联催化淀粉生产葡萄糖酸的方法;以核锥结构花状硅球为主体,对其进行巯基化后利用金硫键将Au纳米粒子吸附于孔道内,再通过金硫键对葡萄糖淀粉酶与葡萄糖氧化酶进行定向固定,从而实现天然酶‑纳米酶共固定。在GA的作用下,淀粉转化为葡萄糖,在GOx的催化下,葡萄糖被氧化为葡萄糖酸,但在此过程中产生了H2O2,H2O2具有强氧化性,会对天然酶的活性造成一定的影响,甚至使其完全失活,因此利用Au纳米粒子降解H2O2并产生氧气,降低其对酶活性造成的影响,同时产生的氧气可促进GOx对葡萄糖的氧化。30min时,淀粉转化为葡萄糖酸的转化率为97.8%,催化体系展现出巨大的潜力。

    抑制淀粉样β蛋白聚集的抑制剂碳点的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114377033A

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202210180468.8

    申请日:2022-02-25

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: A61K33/44 A61P25/28 C01B32/05

    摘要: 本发明涉及抑制淀粉样β蛋白聚集的抑制剂碳点的制备方法及其应用。将小分子淀粉样β蛋白聚集抑制剂和含杂原子的掺杂剂分别溶于去离子水中,在水浴锅中加热完全溶解,然后将不超过反应釜体积2/3的溶液转移到聚四氟乙烯反应釜中,放入电热鼓风干燥箱中,通过水热法完成反应;将反应液装入截留分子量的透析袋中透析,除去多余的反应物和杂质,所得溶液通过旋蒸法和冷冻干燥法进行浓缩,获得抑制剂碳点粉末。抑制剂碳点能够在低浓度下有效抑制Aβ40的聚集,显著减少Aβ40聚集过程中β‑sheet结构的生成。抑制剂碳点能够抑制CL2006体内表达的Aβ42聚集诱导产生的毒性,延长CL2006寿命,是淀粉样β蛋白聚集的理想抑制剂。

    抑制β淀粉样蛋白聚集的碱化溶菌酶及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108642028B

    公开(公告)日:2021-11-19

    申请号:CN201810304964.3

    申请日:2018-04-08

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及一种抑制β淀粉样蛋白聚集的碱化溶菌酶及制备方法和应用,溶菌酶分子表面的羧基上平均修饰数目介于0.5‑7个乙二胺分子。向0.1mol/L的2‑(N‑吗啡啉)乙磺酸缓冲液中加入乙二胺液体,用浓盐酸调节pH4.5~7.5,加入溶菌酶固体溶解,并加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐,搅拌反应;除去游离乙二胺和EDC,得到分子结构稳定的碱化溶菌酶。通过在溶菌酶表面进行化学改性,合成碱化溶菌酶,有效增加溶菌酶表面的正电荷,反应温和简便。碱化溶菌酶能够有效抑制Aβ42的聚集,改变Aβ42聚集体的形貌,阻止并减缓向纤维状形貌的转化。作为治疗阿尔茨海默氏症的药物的应用有广阔的前景。

    琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用

    公开(公告)号:CN106000364B

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201610348043.8

    申请日:2016-05-24

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及一种琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用。琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质;其色谱介质是平均粒径50‑170μm的琼脂糖凝胶颗粒,表面通过环氧基间隔臂引入聚乙烯亚胺接枝链,然后通过聚乙烯亚胺接枝链上的氨基与琥珀酸酐相结合,得到羧基离子交换容量为150‑970mmol/L的琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质。本发明的琥珀酸酐修饰量的聚乙烯亚胺接枝介质或对蛋白质具有较高的吸附速率或对蛋白质具有很强的吸附特性,表现出了较高的静态吸附容量,且对盐浓度有较好的耐受性。介质清洗、除菌方便,易于再生,生物相容性好,制备方法简单、价格低廉,在蛋白质的分离纯化中将有广阔的应用前景。

    抑制β淀粉样蛋白聚集的碱化溶菌酶及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108642028A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810304964.3

    申请日:2018-04-08

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及一种抑制β淀粉样蛋白聚集的碱化溶菌酶及制备方法和应用,溶菌酶分子表面的羧基上平均修饰数目介于0.5-7个乙二胺分子。向0.1mol/L的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中加入乙二胺液体,用浓盐酸调节pH4.5~7.5,加入溶菌酶固体溶解,并加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,搅拌反应;除去游离乙二胺和EDC,得到分子结构稳定的碱化溶菌酶。通过在溶菌酶表面进行化学改性,合成碱化溶菌酶,有效增加溶菌酶表面的正电荷,反应温和简便。碱化溶菌酶能够有效抑制Aβ42的聚集,改变Aβ42聚集体的形貌,阻止并减缓向纤维状形貌的转化。作为治疗阿尔茨海默氏症的药物的应用有广阔的前景。

    琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用

    公开(公告)号:CN106000364A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610348043.8

    申请日:2016-05-24

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及一种琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用。琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质;其色谱介质是平均粒径50‑170μm的琼脂糖凝胶颗粒,表面通过环氧基间隔臂引入聚乙烯亚胺接枝链,然后通过聚乙烯亚胺接枝链上的氨基与琥珀酸酐相结合,得到羧基离子交换容量为150‑970mmol/L的琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质。本发明的琥珀酸酐修饰量的聚乙烯亚胺接枝介质或对蛋白质具有较高的吸附速率或对蛋白质具有很强的吸附特性,表现出了较高的静态吸附容量,且对盐浓度有较好的耐受性。介质清洗、除菌方便,易于再生,生物相容性好,制备方法简单、价格低廉,在蛋白质的分离纯化中将有广阔的应用前景。

    用于抑制β淀粉样蛋白聚集的自组装纳米粒子及制备方法

    公开(公告)号:CN105770905A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610157830.4

    申请日:2016-03-18

    申请人: 天津大学

    CPC分类号: A61K31/12

    摘要: 本发明涉及一种能够抑制β淀粉样蛋白聚集的自组装纳米粒子的制备、表征和应用。首先从已被证实的能有效抑制Aβ聚集的多酚类小分子姜黄素出发,根据姜黄素的强疏水性特征和其功能团,通过酯化反应,在其上修饰亲水性很强的天然大分子透明质酸,从而得到两亲性物质CHA。由于CHA同时具备强疏水部分和强亲水性部分,在水环境中能自发组装形成纳米结构,同时由于HA的特性,能够形成水凝胶结构。这一自组装纳米结构不仅改善了姜黄素难溶于水的缺陷,还能通过纳米凝胶的隔离作用将与姜黄素结合的Aβ单体稳定,使其不易聚集,从而提高抑制效果。因此,CHA的制备和应用是研发阿尔茨海默氏症抑制剂的有效方法,具有广阔的前景。