抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103073640B

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201210107121.7

    申请日:2012-04-13

    申请人: 宁波大学

    摘要: 本发明公开了抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体及其制备方法和应用,特点是采用甲鱼系统性败血症球状病毒为抗原免疫产蛋母鸡,从免疫鸡蛋卵黄中提取得到特异鸡卵黄抗体粗提物,纯化后得到抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体纯品,包括甲鱼系统性败血症球状病毒抗原的制备步骤;蛋鸡免疫和收集免疫鸡蛋的步骤;最后分离和纯化得到抗甲鱼系统性败血症球状病毒的卵黄抗体的步骤,并应用于制备预防和治疗因甲鱼系统性败血症球状病毒引起的相关疾病的药物、保健品或饲料添加剂,优点是该卵黄抗体纯度较高,且对甲鱼系统性败血症球状病毒有较强的抑制作用,同时高免卵黄的获取廉价、方便,便于低成本、大批量生产,其制备方法简便易行。

    基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102901816B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201210107100.5

    申请日:2012-04-13

    申请人: 宁波大学

    IPC分类号: G01N33/569

    摘要: 本发明公开了基于卵黄抗体的甲鱼系统性败血症球状病毒间接ELISA检测方法,特点是包括将0.1ng/ul的甲鱼系统性败血症球状病毒抗原按100ul/孔加于聚苯乙烯96孔反应板中进行预包被,并采用牛血清白蛋白封闭液进行封闭的步骤;将每孔加入倍比稀释的甲鱼系统性败血症球状病毒卵黄抗体,并加入辣根过氧化酶标记的羊抗鸡IgG和邻苯二胺底物溶液显色反应的步骤;最后在酶标仪上读取各孔492nm波长处的吸光度值,测定孔吸光度值大于阴性对照孔均值2.1倍以上者判为阳性,优点是具有稳定性、特异性和灵敏度高、免疫干扰小、背景低等效果。

    利用DArT标记技术分析三疣梭子蟹遗传多样性的方法

    公开(公告)号:CN103710444A

    公开(公告)日:2014-04-09

    申请号:CN201310705075.5

    申请日:2013-12-19

    申请人: 宁波大学

    发明人: 陈炯 史雨红

    IPC分类号: C12Q1/68 C40B50/06

    摘要: 本发明公开了利用DArT标记技术分析三疣梭子蟹遗传多样性的方法,特点是包括三疣梭子蟹基因组代表性DNA片段文库构建的步骤;基因组代表性DNA芯片点制及在芯片上设置一系列阳性和阴性对照的步骤;提取不同地理种群三疣梭子蟹的DNA分别与基因组代表性DNA芯片杂交并清洗的步骤;最后杂交后采用芯片扫描仪进行扫描,并用LuxScan3.0软件提取数据,计算获得多态性效率、多态信息含量和遗传分型图谱,优点是可获得稳定并明确的遗传分型图谱,可应用于三疣梭子蟹遗传多态性检测、野生群体和家系识别、遗传图谱和指纹图谱构建等领域,具低成本、高效、稳定、准确的优点。

    一种可口革囊星虫多糖的制备方法及其抗败血症应用

    公开(公告)号:CN103483462A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310433313.1

    申请日:2013-09-23

    申请人: 宁波大学

    摘要: 本发明公开了一种可口革囊星虫多糖的制备方法及可口革囊星虫多糖的应用,可口革囊星虫粉先灭内源酶,再通过枯草杆菌蛋白酶和Alacase蛋白酶组成的组合酶酶解,酶解液三级过滤后,真空浓缩干燥得到可口革囊星虫多糖,该制备方法制作简单,省却了脱蛋白工艺和乙醇醇沉工艺,缩短生产周期,有利于减排节能和保护环境,酶解效果仍较好,得到的可口革囊星虫多糖中多糖含量仍达到50~70%。该可口革囊星虫多糖具有抗败血症的作用。

    一种用于水环境中残留拟除虫菊酯类农药的萃取方法

    公开(公告)号:CN102507802B

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201110293042.5

    申请日:2011-09-30

    申请人: 宁波大学

    IPC分类号: G01N30/06

    摘要: 本发明涉及到一种用于水环境中残留拟除虫菊酯类农药的萃取方法,其特征在于:将低密度聚乙烯萃取膜袋放入正己烷、丙酮混合溶液中对膜袋进行预处理;向待检测样品中加入氯化钠至浓度饱和,取饱和溶液样品置于顶空进样瓶中;将预处理后的膜袋固定于加入了饱和溶液样品的顶空进样瓶内,然后向膜袋内加入抽提溶剂,密封顶空进样瓶并将顶空进样瓶置于振荡器中,得到抽提液;将抽提液转移到进样小瓶中,采用GC-ECD或GC-MS测定抽提液中拟除虫菊酯类农药的浓度。与现有技术相比较,本发明所研发的膜辅助萃取系统,可应用于水环境样品中氯氰菊酯、溴氰菊酯、氟氯氰菊酯、联苯菊酯、苯醚菊酯、氰戊菊酯等拟除虫菊酯类农药多残留的分离、纯化,与普通的液-液萃取、固相萃取法相比较其分离速度更快、富集拟除虫菊酯类农药更为高效。

    东海香参多糖在制药中应用

    公开(公告)号:CN102743410A

    公开(公告)日:2012-10-24

    申请号:CN201210214509.7

    申请日:2012-06-27

    申请人: 宁波大学

    IPC分类号: A61K31/715 A61P31/04

    摘要: 本发明公开了东海香参多糖在制药中应用,具体是东海香参多糖在制备治疗败血症药物中的应用,可以提高患败血症小鼠的成活率,降低患败血症小鼠致病菌数的作用,降低败血症小鼠促炎性细胞因子。

    传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法

    公开(公告)号:CN101906488B

    公开(公告)日:2012-10-24

    申请号:CN201010251439.3

    申请日:2010-08-09

    申请人: 宁波大学

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了传染性脾肾坏死病毒的超分支滚环扩增检测方法,特点是包括以下步骤:(1)设计1条锁式探针和1对针对锁式探针连接序列的通用引物;(2)配制锁式探针连接反应体系,进行连接反应;(3)配制HRCA反应体系,进行HRCA扩增反应,最后对HRCA反应产物进行检测,优点是具有比现有技术的PCR检测传染性脾肾坏死病毒的方法具有更高的灵敏度、特异性和便捷性,并且可以在实际生产中现场应用,有利于检测和控制水产动物养殖中传染性脾肾坏死病毒的传染和交叉。

    三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法

    公开(公告)号:CN102628030A

    公开(公告)日:2012-08-08

    申请号:CN201210019133.4

    申请日:2012-01-20

    申请人: 宁波大学

    IPC分类号: C12N7/00 C12R1/93

    摘要: 本发明公开了三疣梭子蟹呼肠孤病毒的鸡胚培养方法,特点是采用SPF鸡胚作为三疣梭子蟹呼肠孤病毒的体外培养体系,选择3-4日龄健康鸡胚,将预先制备的三疣梭子蟹呼肠孤病毒接种液接种至鸡胚尿囊膜上,继续培养直至鸡胚出现死亡,收集培养时间为3-10天的死亡鸡胚分离出尿囊膜与尿囊液,将尿囊膜与尿囊液混合后匀浆、离心、过滤即得到含三疣梭子蟹呼肠孤病毒的上清液,优点是提供一种更高效、更适用的三疣梭子蟹呼肠孤病毒体外培养方法,以对病毒进行快速、有效的体外传代培养,克服了在三疣梭子蟹呼肠孤病毒培养过程无合适培养体系,将填补蟹类病毒鸡胚培养体系的空白,并为以后的研究与应用奠定基础。