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公开(公告)号:CN102559739B
公开(公告)日:2014-06-25
申请号:CN201210018774.8
申请日:2012-01-20
申请人: 宁波大学
摘要: 本发明公开了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法,特点是包括将人工合成的人源LECT2基因插入胞外表达载体pPICZαA中构建重组表达质粒的步骤;酶切线性化后电击导入毕赤酵母X33中,获得重组工程菌株的步骤;经过摇瓶发酵和甲醇诱导,实现重组人源LECT2蛋白的分泌表达的步骤;再利用柱层析进行纯化制备得到纯度为95%以上的重组人源LECT2蛋白的步骤,优点是首次提出了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中得分泌表达和纯化制备方法,采用毕赤酵母大量表达高活性的重组人源LECT2蛋白,具有稳定、产量高、活性强等优势,可用于制药和诊断检测。
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公开(公告)号:CN101768641A
公开(公告)日:2010-07-07
申请号:CN201010039806.3
申请日:2010-01-19
申请人: 宁波大学
摘要: 本发明公开了鳗利斯顿氏菌的LAMP-LFD检测方法,包括鳗利斯顿氏菌empA基因克隆和测序步骤,设计三对LAMP的引物FIP、BIP、LF、LB、F3、B3和一条探针Van-HP步骤,其中Van-FIP为5’端生物素标记引物,探针Van-HP为5’端异硫氰酸荧光素FITC标记探针,配制含三对引物和样品模板的LAMP反应体系步骤,对LAMP反应体系扩增步骤,用探针杂交然后用LFD检测步骤,本发明具有比现有技术的PCR检测鳗利斯顿氏菌的方法具有更高的灵敏度、特异性和便捷性,并且可以在实际生产中现场应用,有利于检测和控制水产动物养殖中鳗利斯顿氏菌的感染和暴发。
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公开(公告)号:CN102671187B
公开(公告)日:2014-03-12
申请号:CN201210073773.3
申请日:2012-03-20
申请人: 宁波大学 , 浙江大学医学院附属第一医院
摘要: 本发明公开了LECT2蛋白在制备病毒药物中的应用,其中病毒为正粘病毒科病毒或逆转录病毒科病毒,该LECT2蛋白可以通过激活巨噬细胞,诱导干扰素γ和粒细胞集落刺激因子等抗病毒细胞因子的表达,从而提高巨噬细胞活性,增强动物免疫能力,抑制流感病毒和逆转录病毒的复制,抑制F-MLV感染小鼠的脾增大,提高流感病毒感染小鼠的存活率效果显著,且无副作用。
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公开(公告)号:CN101768641B
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201010039806.3
申请日:2010-01-19
申请人: 宁波大学
摘要: 本发明公开了鳗利斯顿氏菌的LAMP-LFD检测方法,包括鳗利斯顿氏菌empA基因克隆和测序步骤,设计三对LAMP的引物FIP、BIP、LF、LB、F3、B3和一条探针Van-HP步骤,其中Van-FIP为5’端生物素标记引物,探针Van-HP为5’端异硫氰酸荧光素FITC标记探针,配制含三对引物和样品模板的LAMP反应体系步骤,对LAMP反应体系扩增步骤,用探针杂交然后用LFD检测步骤,本发明具有比现有技术的PCR检测鳗利斯顿氏菌的方法具有更高的灵敏度、特异性和便捷性,并且可以在实际生产中现场应用,有利于检测和控制水产动物养殖中鳗利斯顿氏菌的感染和暴发。
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公开(公告)号:CN102671187A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210073773.3
申请日:2012-03-20
申请人: 宁波大学 , 浙江大学医学院附属第一医院
摘要: 本发明公开了LECT2蛋白在制备病毒药物中的应用,其中病毒为正粘病毒科病毒或逆转录病毒科病毒,该LECT2蛋白可以通过激活巨噬细胞,诱导干扰素γ和粒细胞集落刺激因子等抗病毒细胞因子的表达,从而提高巨噬细胞活性,增强动物免疫能力,抑制流感病毒和逆转录病毒的复制,抑制F-MLV感染小鼠的脾增大,提高流感病毒感染小鼠的存活率效果显著,且无副作用。
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公开(公告)号:CN103483462B
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201310433313.1
申请日:2013-09-23
申请人: 宁波大学
IPC分类号: C08B37/00 , A61K31/715 , A61P31/04
摘要: 本发明公开了一种可口革囊星虫多糖的制备方法及可口革囊星虫多糖的应用,可口革囊星虫粉先灭内源酶,再通过枯草杆菌蛋白酶和Alacase蛋白酶组成的组合酶酶解,酶解液三级过滤后,真空浓缩干燥得到可口革囊星虫多糖,该制备方法制作简单,省却了脱蛋白工艺和乙醇醇沉工艺,缩短生产周期,有利于减排节能和保护环境,酶解效果仍较好,得到的可口革囊星虫多糖中多糖含量仍达到50~70%。该可口革囊星虫多糖具有抗败血症的作用。
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公开(公告)号:CN104031935A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410221810.X
申请日:2014-05-23
申请人: 宁波大学
摘要: 本发明公开了大黄鱼肝表达抗菌肽LEAP-2C在毕赤酵母中的胞内表达方法,特点是包括大黄鱼LEAP-2C基因(登录号:KJ024789)的重组表达载体构建的步骤;多拷贝表达盒LEAP-2C/pAO815构建的步骤;酶切线性化后电击导入毕赤酵母GS115中,经蛋白测定和重组子筛选,获得重组工程菌株;最后经过摇瓶发酵扩大培养和甲醇诱导,实现重组大黄鱼LEAP-2C的胞内表达的步骤,优点是表达水平高、生产成本低及产量高,大黄鱼LEAP-2C酵母表达产品可应用于水产养殖饲料添加剂和抗菌新药中。
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公开(公告)号:CN102552882A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201110434051.1
申请日:2011-12-22
申请人: 宁波大学 , 浙江大学医学院附属第一医院 , 杭州永能生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了LECT2蛋白及LECT2蛋白变体在制药中应用,具体是在制备提高巨噬细胞的吞噬能力和/或预防和治疗细菌性败血症药物中的应用,其中LECT2蛋白变体为LECT2蛋白序列的修饰产物,包括改变、置换、取代、插入或缺失编码序列中的一个氨基酸或复数个氨基酸获得,LECT2蛋白变体至少有60%氨基酸序列与LECT2蛋白氨的基酸序列相同;该LECT2蛋白及LECT2蛋白变体可以诱导巨噬细胞活性变化,导致巨噬细胞吞噬能力增强,可以预防和治疗由细菌入侵引起的败血症,小鼠细菌性败血症模型的治疗率可达40%以上。
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