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公开(公告)号：CN107080757B
公开(公告)日：2020-07-07
申请号：CN201710130633.8
申请日：2017-03-07
摘要： 本发明公开了一种利用干细胞构建的人源化乙型肝炎鼠模型及应用，包括获取人干细胞，将人干细胞植入肝损伤的鼠，致使鼠体内存在移植的人干细胞1×104‑8等步骤，可在进行抗病毒药物耐药性研究、进行慢性乙型肝炎发病机制研究等方向的应用。本发明所公开的人源化慢性乙型肝炎鼠模型除了用于研究乙肝病毒感染机制外，还可用于治疗的研究。针对目前乙肝药物的开发，大多基于肝细胞水平，缺乏有效的动物模型进行药物的全面评估。该模型简单易得，很好的模拟了人体感染乙肝病毒的应答反应，对于慢性乙型肝炎药物的研发具有重大意义。
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公开(公告)号：CN110333357A
公开(公告)日：2019-10-15
申请号：CN201910551172.0
申请日：2019-06-24
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明涉及肝脏全免疫细胞特征图谱研究，旨在提供一种急性肝衰竭小鼠肝脏全免疫细胞特征图谱的绘制方法。包括步骤：小鼠肝脏全免疫细胞的提取；质谱流式抗体的标记；免疫细胞抗体染色；质谱流式分析。本发明能够在保证细胞纯度的基础上，尽可能的去除肝脏实质细胞，分离出高得率的小鼠肝脏全免疫细胞。本发明分离的小鼠肝脏全免疫细胞得率在高于研磨法得率，且细胞活率大于传统研磨法。本发明根据肝脏、肺脏中免疫细胞特点，创新性地使用试剂盒以稳定金属同位素与抗体连接，同时基于通道干扰最小原则设计质谱流式通道，实现全面小鼠对肝脏全免疫细胞的分类和功能进行描述，最多可同时检测43个标志物，能够观察到小鼠肝脏全免疫细胞的动态改变。
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公开(公告)号：CN110257331A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910564045.4
申请日：2019-06-24
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C12N5/078
摘要： 本发明涉及动物细胞提取方法，旨在提供一种高效获取小鼠肝脏全免疫细胞的方法。提供一种高效获取小鼠肝脏全免疫细胞的方法，包括：对小鼠肝脏静脉灌流、冲洗后，剪碎进行解离和消化；过滤后多次离心处理，对所得沉淀进行裂解以完全去除红细胞；终止裂红后再次离心处理；弃上清，得到纯净肝脏全免疫细胞。本发明能够在保证细胞纯度的基础上尽可能多地去除肝脏实质细胞，分离出高得率的小鼠肝脏全免疫细胞。与现有技术中研磨法分离的结果相比，本发明分离的小鼠肝脏全免疫细胞得率在大于5×106/只，高于研磨法得率的1～2.5×106/只，且细胞活率大于95％，大于传统研磨法细胞活率约85％。
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公开(公告)号：CN108753725A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810503675.6
申请日：2018-05-23
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了一种人血白蛋白高表达的人肝细胞系及其建立方法和应用，属于基因工程领域。本发明将以提高肝细胞系的合成功能为最终目标，挑选白蛋白表达相关的基因(ALB，基因ID:213)，通过慢病毒转染的方式，使CRISPR/dCas9系统蛋白复合物Synergistic Activation Mediator(SAM)基因组插入到细胞系基因组内，使细胞系稳定表达过表达复合物，从而实现针对白蛋白的过表达调控。本发明建立的人血白蛋白高表达的人肝细胞系可以在生物型人工肝系统中作为细胞源。
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公开(公告)号：CN108250293A
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201810143428.X
申请日：2018-02-11
申请人： 浙江大学
IPC分类号： C07K16/10 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种抗埃博拉病毒VP40蛋白单克隆抗体G7A6及其应用。该单克隆抗体亚型为IgG1、κ型，能与ZEBOV‑VP40蛋白N端抗原肽特异性结合，发挥抗病毒效应；产生该单克隆抗体的杂交瘤细胞是由免疫的BALB/C小鼠脾淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞SP2/0经融合、筛选、克隆和传代流程筛选后获得的杂交瘤细胞，能稳定分泌G7A6，抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID No.1，轻链氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。G7A6具备拮抗扎伊尔型埃博拉病毒样颗粒的抗病毒效应，可以其它单抗联合应用。
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公开(公告)号：CN107703219A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201710628078.1
申请日：2017-07-28
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明涉及胎盘来源间充质干细胞代谢物的萃取及检测技术，旨在提供一种基于CILLC-MS的评价GFP基因转染对hPMSCs代谢组学影响的方法。本发明通过萃取、检测GFP基因转染前后的hPMSCs的胞内代谢物，并对其进行定量，深入分析转染前后的差异性代谢物及差异性代谢途径，从代谢组学角度评估绿色荧光蛋白用于标记和示踪间充质干细胞的生物安全性。本发明首创比较hPMSCs与GFP+hPMSCs代谢组学差异的分析流程，将两种样品制备方法结合用于干细胞代谢物萃取，使细胞内代谢物充分释放。结合CIL LC-MS用于干细胞胞内代谢物检测，实现了胞内代谢物的精准定量分析，并大大增加代谢产物的鉴定种类。本发明极大地提高了结果的灵敏性，可靠性和重复性，避免了操作上引起的不平行性及偶然性。
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公开(公告)号：CN103789451B
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201410012004.1
申请日：2014-01-12
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供一种检测柯萨奇病毒A6、A10型的荧光定量试剂盒，由定量RT-PCR反应液、酶混合液、引物探针混合液、CVA6和CVA10标准品、CVA6和CVA10强阳性对照品、CVA6和CVA10弱阳性对照品、阴性对照品组成。本发明运用一步法实时荧光定量RT-PCR技术，采用CVA6和CVA10高度特异的引物和荧光标记探针，从粪便标本中同时检测出是否有CVA6和CVA10的存在，比单重荧光定量PCR方法更便捷迅速、节约成本。检测实时、准确定量，为临床提供早期诊断，为临床治疗方案的制定提供参考依据；可应用于柯萨奇病毒A6、A10型引起暴发疫情的实验室应急诊断、快速筛查、临床诊断及手足口病的流行病学的研究。
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公开(公告)号：CN103540545B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201310449033.X
申请日：2013-09-28
申请人： 浙江大学
CPC分类号： Y02A50/473 , Y02A50/475
摘要： 本发明公开了一株戊糖片球菌及其应用。所述戊糖片球菌拉丁名为PediococcuspentosaceusLI05，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.7049。本发明公开了该菌的形态学特征为：菌体杆状，不产孢子，无运动性，革兰氏染色呈阳性。本发明公开了该菌的全细胞脂肪酸主要成份为：14:0约1.45%，16:1w7c/16:1w6c约3.26%，16:0约31.25%，18:1w9c约6.31%，18:1w7c约38.59%，18:0约1.37%，un18.846/19:1w6c约14.59%。本发明还公开了该菌的16S核糖体DNA(16SrDNA)全序列。本发明公开的戊糖片球菌及其制剂可用于调节人或动物肠道微生态平衡,促进消化吸收，减缓实验动物肝衰竭的发生发展。
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公开(公告)号：CN104195145A
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201410333927.7
申请日：2014-07-15
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明公开了肝硬化的生物标志物及其应用。从98个肝硬化患者、83个健康对照的粪便样品开展整个肠道菌群微生物的关联分析研究描述粪便微生物群落及功能成分特征。15个基因构成生物标志物作为一个高精确的区分病人的指数。在另外独立群体中对发现进行检验，证实了其准确性，确认了检测菌群和肝硬化之间的关联鲁棒性。生物标志物选自如下一组15种基因中的至少10种。15种基因在肝硬化患者的肠道菌群中得到了富集。治疗肝硬化的药物，促进或者增加所述的基因的数量或者表达。一种生产或筛选药物的方法，所述药物促进或者增加所述的生物标志物的数量或者表达。一种检测肝硬化、监测治疗进程，或者生产、筛选药物的试剂盒，用于检测所述的生物标志物。
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公开(公告)号：CN103275862A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310149240.3
申请日：2013-04-25
申请人： 浙江大学
摘要： 本发明提供一种检测甲型流感病毒H7N9亚型的荧光定量RT-PCR试剂盒，对甲型流感病毒及H7N9型进行检测。本试剂盒包含定量RT-PCR反应液、酶混合液、引物探针混合液、标准品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、阳性对照品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、阴性对照品。本发明根据甲型流感病毒、H7、N9的保守区序列设计特异性的引物和探针，引入RNaseP引物探针作为内参，采用一步法四重实时荧光定量RT-PCR技术，可快速、准确的从标本中检测甲型流感病毒及H7N9亚型流感病毒。该试剂盒设计合理，具有极高的特异性、灵敏性和重复性，可应用于甲型流感病毒H7N9亚型引起暴发疫情的实验室应急诊断、快速筛查及发热呼吸道症候群中甲型流感病毒及H7N9亚型的流行病学的研究。
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