公开(公告)号：CN107513584A

公开(公告)日：2017-12-26

申请号：CN201710875664.6

申请日：2017-09-25

申请人： 浙江大学

发明人： 陈瑜 ,  谢国良 ,  崔大伟 ,  楼滨 ,  郑书发

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

CPC分类号： C12Q1/701 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2600/16 ,  C12Q2600/166 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/113

摘要： 本提供一种检测肠道病毒的五重荧光定量试剂盒，肠道病毒的四个亚型为EV71、CVAl6、CVA6、CVA10。本发明运用一步法实时荧光定量RT‐PCR技术，采用EV及EV71、CVAl6、CVA6、CVA10病毒高度特异的引物和荧光标记探针，通过一个PCR反应即从粪便标本中同时检测出肠道病毒的存在，并同时进行病毒分型鉴定，比单重荧光定量PCR方法更便捷迅速、节约成本。本发明对检测的病毒进行实时准确定量，根据病毒感染的滴度，为临床早期诊断提供工具，为临床治疗方案的制定提供参考依据。可应用于肠道病毒引起暴发疫情的实验室应急诊断、肠道病毒快速筛查分型、临床诊断及手足口病的流行病学的研究。

公开(公告)号：CN116606849A

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202310494792.1

申请日：2023-05-05

申请人： 浙江大学医学院附属第一医院

发明人： 陈瑜 ,  陈威震 ,  谢国良 ,  楼滨 ,  郑书发 ,  余斐

IPC分类号： C12N15/10 ,  C12M1/12 ,  C12M1/00

摘要： 本发明提供一种用于生物样本一步法核酸快速提取方法与配套装置。通过将生物样本加入到核酸释放试剂中，在加热条件下得到裂解反应液，最后利用配套提取配套装置获得含有病原体核酸的样本释放液以用于核酸扩增。所述的核酸释放试剂中包含有TCEP·HCl，EDTA，树脂，表面活性剂等。本发明还提供一种用于该核酸快速提取方法的配套装置，是由两个腔体组成的注射器装置，包含注射用活塞、推杆、微孔过滤膜、加样出液口、密封盖。本发明的技术方案在于无需复杂样本处理过程和仪器设备，利用一步法实现对样本核酸提取并用于下游的聚合酶链式反应或等温核酸扩增，操作过程简单方便，操作时间短，尤其适合呼吸道和肠道等致病病原体的检测。

公开(公告)号：CN109932513A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910160836.0

申请日：2019-03-04

申请人： 浙江大学 ,  山东泰乐康健生物科技有限责任公司

发明人： 陈瑜 ,  王楠 ,  郑书发 ,  楼滨

IPC分类号： G01N33/68 ,  G01N33/531

摘要： 本发明公开了一种呼吸道病原体检测方法，包括以下步骤：1）对给定的呼吸道病原样本进行蛋白提取；2）以步骤1）提取到的蛋白为蛋白样本形成RPPA；3）对步骤2）获得的RPPA通过PWG进行微生物或病毒检测；其中，RPPA为Reverse Phase Protein Array，即反相蛋白阵列；PWG为Planar Wave Guide，即平面光导。依据本发明呼吸道病原体检测方法在样本中所含蛋白量相对较少时不容易产生漏检。

公开(公告)号：CN103275862A

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201310149240.3

申请日：2013-04-25

申请人： 浙江大学

发明人： 李兰娟 ,  陈瑜 ,  谢国良 ,  崔大伟 ,  霍朝霞 ,  杨先知 ,  郑书发 ,  李雪芬

IPC分类号： C12M1/00 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/64 ,  C12R1/93

摘要： 本发明提供一种检测甲型流感病毒H7N9亚型的荧光定量RT-PCR试剂盒，对甲型流感病毒及H7N9型进行检测。本试剂盒包含定量RT-PCR反应液、酶混合液、引物探针混合液、标准品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、阳性对照品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、阴性对照品。本发明根据甲型流感病毒、H7、N9的保守区序列设计特异性的引物和探针，引入RNaseP引物探针作为内参，采用一步法四重实时荧光定量RT-PCR技术，可快速、准确的从标本中检测甲型流感病毒及H7N9亚型流感病毒。该试剂盒设计合理，具有极高的特异性、灵敏性和重复性，可应用于甲型流感病毒H7N9亚型引起暴发疫情的实验室应急诊断、快速筛查及发热呼吸道症候群中甲型流感病毒及H7N9亚型的流行病学的研究。

公开(公告)号：CN107557493A

公开(公告)日：2018-01-09

申请号：CN201710874995.8

申请日：2017-09-25

申请人： 浙江大学

发明人： 陈瑜 ,  谢国良 ,  崔大伟 ,  楼滨 ,  郑书发

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

摘要： 本发明提供一种肠道病毒分型检测试剂盒，所述肠道病毒分型包括肠道病毒及其多个亚型：EV71、CVAl6、CVA6、CVA10、CVA2、CVA5、CVA4、CVA9、CVA12、Echo6、Echo9、Echo30、CVB2、CVB3、CVB4。本发明运用一步法多重实时荧光RT-PCR，采用EV及其多个亚型病毒高度特异的引物和荧光标记探针，通过一个PCR八连管同时反应，标本中同时检测出是否有肠道病毒存在，并同时进行主要肠道病毒型别的分型鉴定。本方法比单重荧光PCR方法更便捷迅速、节约成本。病毒检测分型准确，可用于肠道病毒引起暴发疫情的实验室应急快速筛查分型、供临床诊断及手足口病的流行病学的研究。

公开(公告)号：CN116516065A

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202310421518.1

申请日：2023-04-19

申请人： 浙江大学医学院附属第一医院

发明人： 陈瑜 ,  谢国良 ,  陈威震 ,  余斐 ,  郑书发 ,  陈晓 ,  楼滨

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明提供一种呼吸道腺病毒核酸检测及基因分型试剂盒，包含HAdV分型检测混合液，HAdV分型检测四联管，HAdV阳性对照品，阴性对照品。针对腺病毒主要型别高度保守且型间存在较大差异的hexon基因设计高特异性的引物探针，能够在一个PCR四连管内同时检测出呼吸道腺病毒及其多个主要型别(HAdV‑1、HAdV‑2、HAdV‑3、HAdV‑4、HAdV‑5、HAdV‑6、HAdV‑7、HAdV‑14、HAdV‑55)。本发明操作方便，极大缩短了腺病毒分型的检测时间，并具有较高的特异性和灵敏性。可应用于呼吸道腺病毒引起暴发疫情的实验室应急诊断、呼吸道腺病毒快速分型筛查、临床诊断及流行病学的研究。

公开(公告)号：CN107513584B

公开(公告)日：2018-12-04

申请号：CN201710875664.6

申请日：2017-09-25

申请人： 浙江大学

发明人： 陈瑜 ,  谢国良 ,  崔大伟 ,  楼滨 ,  郑书发

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/93

摘要： 本提供一种检测肠道病毒的五重荧光定量试剂盒，肠道病毒的四个亚型为EV71、CVAl6、CVA6、CVA10。本发明运用一步法实时荧光定量RT‐PCR技术，采用EV及EV71、CVAl6、CVA6、CVA10病毒高度特异的引物和荧光标记探针，通过一个PCR反应即从粪便标本中同时检测出肠道病毒的存在，并同时进行病毒分型鉴定，比单重荧光定量PCR方法更便捷迅速、节约成本。本发明对检测的病毒进行实时准确定量，根据病毒感染的滴度，为临床早期诊断提供工具，为临床治疗方案的制定提供参考依据。可应用于肠道病毒引起暴发疫情的实验室应急诊断、肠道病毒快速筛查分型、临床诊断及手足口病的流行病学的研究。

公开(公告)号：CN103275862B

公开(公告)日：2014-10-01

申请号：CN201310149240.3

申请日：2013-04-25

申请人： 浙江大学

发明人： 李兰娟 ,  陈瑜 ,  谢国良 ,  崔大伟 ,  霍朝霞 ,  杨先知 ,  郑书发 ,  李雪芬

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12M1/00 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/64 ,  C12R1/93

摘要： 本发明提供一种检测甲型流感病毒H7N9亚型的荧光定量RT-PCR试剂盒，对甲型流感病毒及H7N9型进行检测。本试剂盒包含定量RT-PCR反应液、酶混合液、引物探针混合液、标准品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、阳性对照品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、阴性对照品。本发明根据甲型流感病毒、H7、N9的保守区序列设计特异性的引物和探针，引入RNaseP引物探针作为内参，采用一步法四重实时荧光定量RT-PCR技术，可快速、准确的从标本中检测甲型流感病毒及H7N9亚型流感病毒。该试剂盒设计合理，具有极高的特异性、灵敏性和重复性，可应用于甲型流感病毒H7N9亚型引起暴发疫情的实验室应急诊断、快速筛查及发热呼吸道症候群中甲型流感病毒及H7N9亚型的流行病学的研究。

公开(公告)号：CN102399884B

公开(公告)日：2013-09-25

申请号：CN201110376158.5

申请日：2011-11-23

申请人： 浙江大学

发明人： 陈瑜 ,  陈晓 ,  郑书发 ,  孔海深

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/06 ,  G01N21/64

摘要： 本发明提供一种致泻大肠杆菌四重荧光定量PCR检测试剂盒，由荧光定量PCR反应液、O157标准品、H7标准品、O104标准品、H4标准品、对照品组成，其中荧光定量PCR反应液包含PCR反应缓冲液（含氯化镁和三磷酸脱氧核糖核苷酸混合物、耐热Taq DNA聚合酶等）、特异性上下游引物和探针。本发明通过一个PCR反应，可以从标本中检测出致泻大肠杆菌O157：H7、和O104：H4型细菌的存在，比传统的普通PCR和单重荧光定量PCR方法更简便、快速和准确，而且对检测的细菌进行实时准确定量，为临床上疑似该菌感染的患者早期明确诊断，以便及时制定治疗方案，减少死亡率。

公开(公告)号：CN109932513B

公开(公告)日：2020-09-29

申请号：CN201910160836.0

申请日：2019-03-04

申请人： 浙江大学 ,  山东泰乐康健生物科技有限责任公司

发明人： 陈瑜 ,  王楠 ,  郑书发 ,  楼滨

IPC分类号： G01N33/68 ,  G01N33/531

摘要： 本发明公开了一种RPPA和PWG在制备呼吸道病原体检测制品中的应用，包括以下步骤：1）对给定的呼吸道病原样本进行蛋白提取；2）以步骤1）提取到的蛋白为蛋白样本形成RPPA；3）对步骤2）获得的RPPA通过PWG进行微生物或病毒检测；其中，RPPA为Reverse Phase Protein Array，即反相蛋白阵列；PWG为Planar Wave Guide，即平面光导。依据本发明RPPA和PWG在制备呼吸道病原体检测制品中的应用在样本中所含蛋白量相对较少时不容易产生漏检。