公开(公告)号：CN104059884A

公开(公告)日：2014-09-24

申请号：CN201310109782.8

申请日：2013-03-19

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/02

摘要： 本发明涉及医学遗传学产前诊断EBV转染嵌合体质控细胞及其制备方法，其主要特征是取因临床诊治需要而作染色体病诊断后并已确诊为常见染色体数目异常的剩余的活细胞，分离淋巴细胞，在含环胞霉素A和EBV的RPMI-1640培养液中经37℃、5％CO2培养，B淋巴细胞形成具有无限繁殖能力的永生淋巴母细胞系，作传代扩增至所需量后冻存细胞系，临用时按质控所需比例混合，使原先每例细胞系只有1种染色体数目异常制成包含特定比例和多种组合的多项测试通用的更难鉴别诊断的染色体数目异常嵌合体质控细胞，原始细胞易得且将废弃的多余细胞人为制成可按需倍增的实用而有效的质控细胞。

公开(公告)号：CN103251827A

公开(公告)日：2013-08-21

申请号：CN201310174868.9

申请日：2013-04-29

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕 ,  舒静 ,  李晓

IPC分类号： A61K36/899 ,  A61P3/10 ,  A61K35/02

摘要： 本发明公开了一种治疗糖尿病的中药组合物，其中，包括按照重量单位设置的如下组分：党参10-15g，黄芪15-20g，扁豆12-18g，天门冬10-15g，葛根10-15g，地骨皮15-20g，附子10-15g，玉米须15-20g，川穹15-20g，元胡12-18g，竹茹10-15g，龙骨8-12g，泽泻10-15g，黄精8-12g。本发明工艺简单，成本低廉，药物来源广泛，滋阴补肾，清热除烦，生津止渴，益气降糖，补肾健脾，活血化瘀，尤其针对2型糖尿病治疗效果显著。

公开(公告)号：CN101942413A

公开(公告)日：2011-01-12

申请号：CN200910152257.8

申请日：2009-07-07

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/85

摘要： 本发明涉及用于医学领域的出生缺陷细胞库及其构建方法，其主要特征是以BamH I、SV40 DNA、T4 DNA连接酶和基因载体pcDNA3.1构建SV40T/pcDNA3.1重组子，经感受态大肠杆菌扩增、纯化后，以脂质体转染法将重组子导入经0.01％胶原酶II消化的离体悬液状出生缺陷细胞或在含20％胎牛血清、5～10nmol/L胰岛素的培养液中处于将进入或刚进入对数生长期、梭形细胞占90％以上、汇合率达55％～65％的贴壁生长状出生缺陷细胞，并与之DNA整合，以G418筛选的含阳性重组子的细胞和EB病毒转染的细胞作传代、扩增培养，构建出生缺陷细胞系并冻存于液氮中，以出生缺陷(Birth Defect)及其病种的第一个英文字母命名并标明相关资料信息，用以集中保存出生缺陷的活细胞资源，解决其科研材料贫乏和无专一出生缺陷细胞库的问题。

公开(公告)号：CN1256317A

公开(公告)日：2000-06-14

申请号：CN99117617.0

申请日：1999-08-03

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕 ,  杨振华

IPC分类号： C12Q1/02

摘要： 一种应用于医疗卫生单位及教学科研单位实验室的细胞核仁活体染色法,其特征是细胞用煌焦油蓝活体染色后,不显示细胞核及其膜的结构,核与浆染色结果相似。核仁内的物质(RNA)被染成蓝色颗粒,其颗粒呈点粒状致密排列或溶合成圆形团块状结构,越近团块中心的地方,蓝色颗粒重叠得越密集。而在核仁以外的细胞内,蓝色颗粒稀疏散在分布,或由蓝丝相连成细索状。由此衬托出明显易辨的核仁结构。主要用于识别细胞的成熟程度,鉴别恶性肿瘤细胞及急性白血病的类型。

公开(公告)号：CN113005135A

公开(公告)日：2021-06-22

申请号：CN202110393667.2

申请日：2021-04-09

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： C12N15/74 ,  C12N15/66 ,  C12N15/57 ,  C12N15/56 ,  C12N11/10 ,  C12N11/04 ,  A23C9/123

摘要： 一种预防冠状病毒感染的益生酸奶及制备方法，将ACE2、S1‑RBD和/或IL‑10基因连接胞壁锚定基因或分泌型基因，然后克隆至以半乳糖苷酶为筛选标志的质粒、胞外锚定质粒或分泌型质粒，构建重组质粒，转化半乳糖苷酶缺陷型嗜酸乳杆菌，获得能在胞内、胞壁或胞外定位表达ACE2、RBD和/或IL‑10融合蛋白的以半乳糖苷酶筛选的重组益生菌，以海藻酸钠包被成抵抗胃液的微胶囊，配制成发酵酸奶，口服后重组菌定植于肠道持续表达外源基因，其中表达的ACE2蛋白能封闭病毒RBD并有利于氨基酸吸收和心血管，IL‑10起抗炎作用；产生的抗‑ACE2能封闭ACE2受体，抗‑RBD能封闭病毒RBD，阻断病毒通过RBD与ACE2受体结合感染；重组菌有维持肠道微生态、提高免疫力、产生多种维生素等益生作用。

公开(公告)号：CN112870343A

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202110151509.6

申请日：2021-01-27

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867

摘要： 一种基于人造新冠病毒孵化细胞的灭活疫苗制备方法，根据新冠病毒通过ACE2受体感染宿主细胞并易在表达ACE2的宿主细胞中繁殖的机制，从产前诊断后废弃的细胞中分离肺干细胞，转染ACE2和SV40LT基因，开发易使新冠病毒进入细胞内繁殖的永生化新冠病毒孵化细胞，使病毒与孵化细胞共培养时能随孵化细胞的扩增而大量繁殖，孵化所得病毒液经滤器过滤、超滤浓缩、层析纯化、除菌过滤、甲醛灭活、纯度检测、中和抗体及残留蛋白和DNA检测合格后，制成灭活疫苗。本发明不使用异种动物或细胞扩增病毒而是以同种人类永生干细胞制备的孵化细胞扩增新冠病毒，使所制新冠疫苗不会残留具有免疫原或致瘤等风险的异种动物蛋白或基因片段，疫苗接种理论上较安全。

公开(公告)号：CN109868287B

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN201910109486.5

申请日：2019-02-05

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕 ,  黄荷凤 ,  马端

IPC分类号： C12N15/867 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10

摘要： 一种用于生物医学领域的全基因组高通量克隆载体的构建，其特征在于，构建含hTERT和SV40LT的逆转录病毒载体，转染PT67包装细胞，以G418和PM联合筛选获得质粒包装PT67细胞，提取其培养液，转染sp2/0细胞，再以G418和PM联合筛选获得高度永生化的质粒包装sp2/0细胞，能在植入外源性全基因组后经HAT、G418和PM联合筛选而获得可冻存和扩增全基因组的高度永生化的杂交株，用于罕见病全基因组的产业制备及其永生基因库的构建。

公开(公告)号：CN112646823A

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN202011375481.6

申请日：2020-11-22

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： C12N15/50 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

摘要： 一种基因编辑新冠疫苗载体的制备方法，其特征在于，以新冠病毒易感受体ACE2基因编辑、SV40LT和/或hTERT基因转染的方法将原本弃用的产前诊断后剩余羊水细胞、新生儿脐血、脐带、胎盘等组织细胞改造为兼具干细胞天然治疗功能、无限传代的永生化功能、新冠病毒ACE2受体缺失特性的可再生利用的新冠疫苗载体，专用于制备个体化治疗COVID‑19的疫苗，可按姓名、ABO血型或HLA分型长期预存于‑196℃干细胞库，当新冠病毒传染病流行或某个体需要使用时，可选择自身或同型的基因编辑永生干细胞系传代扩增后进行干细胞治疗或疫苗制备，以消除、减少传统干细胞治疗和疫苗使用中的免疫排斥反应。

公开(公告)号：CN112618708A

公开(公告)日：2021-04-09

申请号：CN202011375244.X

申请日：2020-11-22

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  C12N15/867 ,  C12N15/90 ,  C12N15/66 ,  C12N15/57 ,  C12N15/113 ,  C12N15/50 ,  C12N5/10

摘要： 一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗，其特征在于，以hACE2基因敲除的RNA干扰干细胞取代传统新型冠状病毒疫苗的腺病毒载体。所述RNA干扰干细胞，为一种在敲除新冠病毒易感基因ACE2、转染永生化基因SV40LT和/或hTERT的基础上重组新冠病毒M、N、E和/或S基因的靶向干扰基因shRNA的干细胞。这种RNA干扰干细胞具有抵抗新冠病毒感染、无限传代、抑制新冠病毒在干细胞内复制的功能，可按姓名、ABO血型或HLA分型长期预存于‑196℃干细胞库备用，不但可取同型干细胞个体化治疗COVID‑19，还可取代具有免疫源性的腺病毒载体，将新冠病毒抗体产生基因S1‑RBD插入RNA干扰干细胞DNA中，制备能产生新冠病毒中和抗体的RNA干扰干细胞载体疫苗。

公开(公告)号：CN111330003A

公开(公告)日：2020-06-26

申请号：CN202010209488.4

申请日：2020-03-23

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕

IPC分类号： A61K39/215 ,  A61K9/12 ,  A61K9/51 ,  A61K47/26 ,  A61K47/34 ,  A61P31/14 ,  A61P37/04 ,  A61P31/04

摘要： 本发明涉及一种新冠肺炎反义RNA多价疫苗的制备方法，包括（1）设计新冠病毒shRNA，构建pSilencer-shRNA和pDC312-shRNA，后者与pBHGloxAEl经同源重组获得能产生dsRNA、siRNA和反义RNA的shRNA/Ad5；（2）将经化学修饰的单核苷酸合成新冠病毒siRNA，进而制备负载siRNA的脂质纳米粒siRNA/LHNPs；（3）将shRNA/Ad5、siRNA/LHNPs和喷雾剂配成呼吸道给药的反义RNA多价疫苗，其中shRNA/Ad5在持续产出siRNA后降解靶基因，siRNA/LHNPs直接即时降解靶基因，两者配比使用能起到增效作用，以防单价疫苗的免疫失败。