公开(公告)号：CN110981944A

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN201911096168.6

申请日：2019-11-11

申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

发明人： 步志高 ,  刘任强 ,  温志远 ,  陈伟业 ,  山丹 ,  王翀 ,  柳金雄 ,  赵东明 ,  何希君

IPC分类号： C07K14/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  C12Q1/02

摘要： 本发明通过筛选ASFV四种重要结构蛋白p30、p54、p72以及CD2v细胞免疫抗原优势表位，并建立相应酶联免疫斑点试验方法。所筛选得到的多肽具有很高的氨基酸序列保守性，可有效诱导ASFV特异性细胞免疫反应，可作为ASFV表位载体疫苗的候选免疫原。本发明筛选得到的ASFV结构蛋白T细胞表位多肽，并建立了相应的ELISPOT检测方法，为ASFV候选疫苗的效力评价提供了有力工具，也为ASFV多肽载体疫苗的研发奠定了基础。

公开(公告)号：CN110093324B

公开(公告)日：2020-02-18

申请号：CN201910348878.7

申请日：2019-04-26

申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

发明人： 步志高 ,  陈伟业 ,  赵东明 ,  何希君 ,  刘任强 ,  柳金雄

IPC分类号： C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

摘要： 本发明涉及可作为疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒及疫苗以及构建方法。本发明采用非洲猪瘟中国流行株Pig/CN/HLJ/2018，经基因工程技术，将非洲猪瘟病毒的毒力基因缺失，获得MGF360‑505R缺失和CD2V与MGF360‑505R联合缺失的基因缺失病毒。经实验表明所述两种毒株均能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100％免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。

公开(公告)号：CN110093324A

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201910348878.7

申请日：2019-04-26

申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

发明人： 步志高 ,  陈伟业 ,  赵东明 ,  何希君 ,  刘任强 ,  柳金雄

IPC分类号： C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

摘要： 本发明涉及可作为疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒及疫苗以及构建方法。本发明采用非洲猪瘟中国流行株Pig/CN/HLJ/2018，经基因工程技术，将非洲猪瘟病毒的毒力基因缺失，获得MGF360-505R缺失和CD2V与MGF360-505R联合缺失的基因缺失病毒。经实验表明所述两种毒株均能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100％免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。

公开(公告)号：CN109593761A

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201811572734.1

申请日：2018-12-21

申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

发明人： 步志高 ,  胡森 ,  许达

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了一种与布鲁氏菌毒力相关的small RNA及其在制备弱毒布鲁氏菌中的应用。本发明应用Northern blot证明在布鲁氏菌强毒株M28中存在sRNA Clu7，利用同源重组的方法，构建了该sRNA缺失株M28ΔClu7，以鼠巨噬细胞RAW264.7和Balb/c小鼠为模型评估了该sRNA对M28毒力的影响。结果显示该sRNA缺失后能显著下调强毒株M28在鼠巨噬细胞RAW264.7和小鼠脾脏内复制生存的能力。在接种第5周时，M28ΔClu7从小鼠体内完全清除，与M28相比毒力显著下降。小鼠攻毒保护实验显示：免疫M28ΔClu7对小鼠抵抗强毒M28感染的保护效果达到了疫苗株M5-90的保护力。以上结果预示着sRNA Clu7对布鲁氏菌的毒力有巨大的决定作用。本发明的提出对揭示布鲁氏菌毒力机制起到了巨大的推动作用。为布鲁氏菌新候选疫苗株的研发提供了新的技术手段。