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公开(公告)号：CN101906486B
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201010243398.3
申请日：2010-08-03
申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所 , 国家海洋局第三海洋研究所 , 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 , 中山大学 , 中国海洋大学
摘要： 本发明涉及一种检测多种鱼类病原的基因芯片及其检测方法。基因芯片的构建是将质控系统的探针和17种鱼类病原的探针点在同一固相载体尼龙膜上制成。17种鱼类病原的探针包括：用于检测14种病毒的探针，用于检测淀粉卵涡边虫和三代虫的探针以及用于检测鱼立克次氏体的探针。本发明的基因芯片的检测是应用地高辛杂交显色方法，根据杂交点是否出现蓝色或蓝紫色来进行信号判断。本发明基因芯片上质控体系的构建保证了检测的特异性和灵敏性，并且可在同一尼龙膜上对多种鱼类病原微生物进行同时检测，具有高通量的特点，可以替代之前的鱼类病原微生物相关检测方法，是现有鱼类病原微生物鉴定技术的突破。
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公开(公告)号：CN101863979B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201010191436.5
申请日：2010-06-03
申请人： 中国海洋大学
CPC分类号： C07K16/18
摘要： 本发明公开了一种抗栉孔扇贝颗粒血细胞的单克隆抗体，所述的单克隆抗体是由名称为：小鼠杂交瘤细胞株6H7，保藏号为：CCTCC NO：C201042，保藏单位为：中国典型培养物保藏中心，保藏日期为：2010年04月21日的杂交瘤细胞分泌的。长势良好的该杂交瘤细胞具有大小均一，外观饱满，浑圆透亮，分裂旺盛的特点，其在培养基中常规培养2-3天，培养基中即含有了大量纯度高、效价好、特异性强的单克隆抗体。经间接免疫荧光法和流式免疫荧光法检测，结果显示该单克隆抗体能与栉孔扇贝颗粒血细胞特异性结合。本发明可用于研究颗粒血细胞在扇贝胚胎发育中的发生、分化和分布，以及颗粒血细胞与其它类型血细胞免疫功能上的转换和差异。
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公开(公告)号：CN101629954B
公开(公告)日：2012-09-26
申请号：CN200910017831.9
申请日：2009-08-07
申请人： 中国海洋大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/552 , G01N33/532 , G01N21/64
摘要： 本发明公开了一种对虾白斑症病毒免疫检测芯片，其结构包括芯片载体、铺覆于芯片载体上的琼脂糖凝胶层、琼脂糖凝胶层上固定有多个4×4的抗体微阵列，各个微阵列之间用芯片专用围栏或Super PAP Pen划线隔开。本发明采用夹心法检测抗原，在芯片片基上固定病原的多克隆抗体(多抗)，取待检个体的靶器官组织制备待检样品液，直接将待测样品液与固定有多抗的芯片孵育，以捕获抗原使其结合在芯片上，再加上荧光标记的特异性单抗探针，通过CCD芯片扫描仪读取结果。其优点在于能同时检测多个样品中的白斑症病毒，用于养殖生产中虾类/蟹类白斑症病毒病的快速、准确检测，及进出口虾类/蟹类中WSSV的检疫。
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公开(公告)号：CN102269764A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201110121995.3
申请日：2011-05-12
申请人： 中国海洋大学
IPC分类号： G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种用于检测扇贝颗粒细胞的酶联免疫试剂盒及其应用，所述的扇贝包括栉孔扇贝、虾夷扇贝、海湾扇贝这三个物种；所述的酶联免疫试剂盒包括酶标板、封闭液、洗涤液、酶标记抗体、pNPP底物显色液、磷酸盐缓冲液、血细胞抗凝剂和抗扇贝颗粒细胞的单克隆抗体；所述的酶联免疫试剂盒的应用包括在栉孔扇贝经病毒感染后和海湾扇贝经饥饿胁迫后颗粒细胞数变化上的应用。本发明的酶联免疫试剂盒具特异性强，精确度高，重复性和稳定性好等优点，其检测结果可用扇贝健康状况的评估和颗粒细胞免疫功能的分析。
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公开(公告)号：CN102099375A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201080002362.4
申请日：2010-08-02
申请人： 中国海洋大学
CPC分类号： C07K16/081 , C07K2317/76 , C12N2710/18022
摘要： 本发明提供了一种抗对虾白斑症病毒（WSSV）囊膜蛋白VP28独特型单克隆抗体及其制备方法。所述单克隆抗体是由保藏号为：CCTCC－C200938的杂交瘤细胞AMVP分泌的。
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公开(公告)号：CN101899425A
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN201010191335.8
申请日：2010-06-03
申请人： 中国海洋大学
IPC分类号： C12N9/02
摘要： 本发明公开了一种扇贝酚氧化酶的分离纯化方法，其特征在于它包括以下步骤：(1)从扇贝的闭壳肌获得血淋巴，经离心、重悬、破碎后离心取上清，获得血细胞破碎液上清；(2)以血细胞破碎液上清为样品进行连续梯度非变性电泳；(3)以特异性底物发色法定位非变性电泳的酚氧化酶蛋白带；(4)对目的带进行切胶，通过电洗脱法回收酚氧化酶蛋白带，经透析冻干后得到提纯的扇贝酚氧化酶蛋白。本发明的优点在于：①提纯时间短；②操作简便，设备要求简单，成本低，且大大减少了对样品的处理步骤；③提纯的样品纯度高，通过非变性与变性电泳检测只呈现一条带，并且很好的保持了酶的生物活性，提高了提纯效率。
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公开(公告)号：CN101671392A
公开(公告)日：2010-03-17
申请号：CN200910017390.2
申请日：2009-08-03
申请人： 中国海洋大学
IPC分类号： C07K16/18 , C12N15/06 , C12P21/08 , G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种抗中国对虾血蓝蛋白的单克隆抗体，其是由名称为小鼠杂交瘤细胞CS-H，保藏号为CCTCC-C200937的杂交瘤细胞分泌的。该抗体的制备方法如下：通过抽取中国对虾血淋巴经离心分离血清，经超速离心获得中国对虾血蓝蛋白粗提物，利用对虾白斑症病毒(WSSV)亲和层析纯化中国对虾血蓝蛋白，经电泳分析和多肽质谱分析确认后，以亲和纯化的血蓝蛋白作为抗原免疫Balb/c小白鼠，采用细胞融合制备杂交瘤细胞，经过免疫学检测方法筛选出该单抗。本发明将作为检测对虾在各种生理状态下血蓝蛋白含量变化提供重要工具，同时为研究血蓝蛋白在中国对虾非特异免疫中的作用提供有力支持。
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