一种毕赤酵母表达重组AspN蛋白的工艺方法

    公开(公告)号:CN118956932A

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202411079385.5

    申请日:2024-08-07

    摘要: 本发明涉及一种毕赤酵母表达重组AspN蛋白的工艺方法,具有以下步骤:S1:序列设计:将AspN蛋白的DNA序列根据毕赤酵母mRNA特点进行优化,同时调整DNA序列使AspN的氨基酸序列发生定点突变,并在DNA序列上添加纯化标签和酶切位点;S2:菌株表达:将S1得到的序列与质粒连接,转化到毕赤酵母基因组中,将重组毕赤酵母菌株转化到大肠杆菌中进行发酵表达;S3:AspN蛋白获取:将S2发酵得到的发酵液进行纯化得到重组AspN蛋白;S4:酶活性检测:将得到的重组AspN蛋白进行酶活检测,确定其酶切效果。本发明利用毕赤酵母表达重组AspN蛋白,为构建、发酵和纯化内肽酶AspN提供了一种新的工艺方法。