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公开(公告)号：CN116621952A
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202211128549.X
申请日：2022-09-16
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K1/14 , C07K1/22 , A61K39/02 , A61P31/04 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种B型副鸡禽杆菌抗原PilA蛋白及其制备方法和应用。本发明中B型副鸡禽杆菌抗原PilA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了B型副鸡禽杆菌抗原PilA蛋白在制备用于动物免疫接种B型副鸡禽杆菌亚单位疫苗中的应用，本发明制备的B型副鸡禽杆菌亚单位疫苗可有效抵抗副鸡禽杆菌血清B型菌株的感染。
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公开(公告)号：CN112458005A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011237539.0
申请日：2020-11-09
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 本发明涉及一种血清9型猪链球菌无血清高密度发酵培养工艺，在利用一级种子收获二级种子后，以2％(V/V)接种量将二级种子接种于发酵罐内，发酵到OD600nm＝1.0±0.1时，停止通气，进行不通气培养，发酵过程中补加1～3％葡萄糖溶液和1～3％脱脂奶粉溶液，培养菌液OD600nm＞2.5时进行收获，得到血清9型猪链球菌高密度抗原。本发明提供一种血清9型猪链球菌的高密度发酵培养基及培养工艺，培养基配方简单，成本低廉。发酵参数容易控制，培养菌数高，免疫原性好，易于实现链球菌9型抗原的大规模高密度培养。通过本发明可节省生产成本，保证链球菌疫苗保护效果。
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公开(公告)号：CN112402602A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011237186.4
申请日：2020-11-09
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
IPC分类号： A61K39/39 , A61P37/04 , A61K39/116 , A61K39/09 , A61P31/04
摘要： 本发明涉及一种四价猪链球菌病灭活疫苗佐剂、灭活疫苗及制备方法，取壳聚糖1～3g和双链聚肌胞0.1～0.3mg，与质量分数为0.8～1％的乙酸盐溶液混合，充分溶解后用0.45um滤器过滤，将产物除菌后2～8℃保存制得佐剂。还涉及一种四价猪链球菌病灭活疫苗的制备方法，将浓缩灭活猪链球菌四价抗原用质量分数0.8～1％生理盐水稀释至一定比例后与佐剂按照1:1的比例混合并搅拌均匀，保证抗原活菌不低于1.5×109CFU/ml，制备得到四价猪链球菌灭活疫苗。本发明制备的佐剂用作猪链球菌病四价灭活疫苗的制备，制备的疫苗具有疫苗多价保护普广、稳定性高、安全性好、使用方便、疫苗保护效果好的特点。
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公开(公告)号：CN110804563A
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201911106065.3
申请日：2019-11-13
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 本发明公开了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，属于动物疫苗生产技术领域。本发明的培养基由以下组分构成：MEM培养基、酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清蛋白冻干粉、转铁蛋白、丙酮酸钠、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。本发明的培养基成分简单、低廉、易获取，其通过添加MEM、酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清蛋白冻干粉、丙酮酸钠、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾和苯酚红等组分，可大大降低在猪肺炎支原体培养时的猪血清添加量，从而可以降低猪肺炎支原体的培养成本，并且还能保持猪肺炎支原体良好的生长状态以及较快的生长速度。
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公开(公告)号：CN102994445B
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201210541987.9
申请日：2012-12-14
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 发明涉及生物技术领域，更具体的讲是一种运用间接免疫荧光检测技术进行病毒敏感细胞克隆株筛选的方法，包括以下步骤：细胞系纯净性的鉴定；细胞系中单克隆细胞株的获得；单克隆细胞株对病毒敏感性的鉴定，本发明的有益效果是：本方法检测时间短，只需3天即可对单细胞克隆对病毒敏感性进行鉴定；操作相对简单，方法易行，可用于非致细胞病变型病毒敏感细胞株的大量筛选；结果稳定，可重复性强，与测定毒价方法效果一致。
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公开(公告)号：CN103045530B
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201210542003.9
申请日：2012-12-14
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 本发明提供一种悬浮培养细胞的方法，其包括如下步骤：（1）利用细胞融合技术将贴壁无限传代细胞系与有限传代悬浮细胞融合，建立既能无限传代又能悬浮培养的融合细胞系；（2）筛选悬浮生长的融合细胞；（3）将融合细胞系传代培养10个以上代次，确定该细胞系的稳定性。本发明的有益效果是：本发明利用细胞融合技术将贴壁培养的细胞驯化为可悬浮培养的细胞，充分利用了悬浮培养的优点，为利用悬浮细胞获得目的产物奠定基础，本方法所驯化悬浮细胞可利用含有血清的普通细胞培养液进行培养，与无血清培养液相比，大大降低了培养成本。本方法采用全悬浮培养，简化生产过程，缩短生产时间，提高生产效率，并易于进行扩大培养。
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公开(公告)号：CN102988982B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201210542216.1
申请日：2012-12-14
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 本发明涉及一种氢氧化铝纳米胶佐剂的制备方法，属于动物生物制品免疫佐剂制备工艺技术领域。该制备方法是以铝盐溶液和纯碱溶液为原料，混合过程中添加一定量的稳定剂，通过高剪切乳化机剪切，初步得到纳米级氢氧化铝溶液，经沉淀、洗涤和再沉淀等操作，最后制得纳米级氢氧化铝胶，将制备的纳米氢氧化铝配制成溶液与灭菌活的菌液经复合即可获取灭活疫苗。本发明方法制备的纳米级氢氧化铝佐剂粒径分布均匀、纯度高，吸附力强，无副作用，在免疫佐剂制备方面有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN102988972B
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201210545873.1
申请日：2012-12-14
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 本发明涉及一种运用激流式生物反应器生产猪细小病毒灭活疫苗的方法，该方法是将猪细小病毒接种IBRS-2细胞，培养得到生产种毒；另外将IBRS-2细胞接种到激流式生物反应器中，然后将制备的猪细小病毒种毒接种到激流式生物反应器中培养的IBRS-2细胞，进行病毒的繁殖和培养；最后收获繁殖的病毒液，灭活，配苗即得猪细小病毒灭活疫苗。该方法使用激流式生物反应器和纸片载体避免了微载体生物反应器培养细胞产生的剪切力，进一步提高了细胞密度和活力，使细胞增殖病毒的能力增强。反应器能实时监控并自动调节细胞生长的最适条件，使每批收获的病毒液批间差异小，提高了疫苗质量稳定性、提高了生产效率、降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN103045530A
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201210542003.9
申请日：2012-12-14
申请人： 山东滨州沃华生物工程有限公司
摘要： 本发明提供一种悬浮培养细胞的方法，其包括如下步骤：（1）利用细胞融合技术将贴壁无限传代细胞系与有限传代悬浮细胞融合，建立既能无限传代又能悬浮培养的融合细胞系；（2）筛选悬浮生长的融合细胞；（3）将融合细胞系传代培养10个以上代次，确定该细胞系的稳定性。本发明的有益效果是：本发明利用细胞融合技术将贴壁培养的细胞驯化为可悬浮培养的细胞，充分利用了悬浮培养的优点，为利用悬浮细胞获得目的产物奠定基础，本方法所驯化悬浮细胞可利用含有血清的普通细胞培养液进行培养，与无血清培养液相比，大大降低了培养成本。本方法采用全悬浮培养，简化生产过程，缩短生产时间，提高生产效率，并易于进行扩大培养。
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