公开(公告)号：CN109402134A

公开(公告)日：2019-03-01

申请号：CN201811442625.8

申请日：2018-11-29

申请人： 湖南百尔泰克生物科技有限公司

发明人： 王库强 ,  王峰

IPC分类号： C12N15/18 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/61 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种高效表达生长激素的工程菌的制备方法，包括以下步骤：1)通过PCR法对人生长激素hGH基因进行扩增，得到扩增后的hGH基因；2)将步骤1)中的扩增后的hGH基因连接到pMal-p2x载体上，得到重组质粒pMal-hGH；4)将步骤3)中的重组质粒导入到大肠杆菌BL21(DE3)中，通过IPTG诱导蛋白表达，并确定表达正确后，获得高效表达生长激素的工程菌。本发明分别采用pMal-p2x作为载体，获得了重组质粒pMal-p2x-GH，pMal-p2x-GH的重组质粒的氨基端带有一个MBP蛋白标签，因而将重组质粒导入到大肠杆菌的受体中，可以将hGH和MBP标签进行融合表达，从而将hGH带到外周质空间，更有利于hGH蛋白的纯化，而且由于外周质的氧化环境，hGH蛋白能够正确形成二硫键，使蛋白具有较好的活性。