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公开(公告)号:CN107365831A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710585873.7
申请日:2017-07-18
申请人: 三峡大学
CPC分类号: C12Q1/34 , C12Q1/04 , C12Q1/18 , G01N2333/922
摘要: 为从紫外诱变条件下得到的大量突变株中快速筛选桔青霉核酸酶P1高产株,采用TB-RNA平板筛选方法,并考察多种因素对TB-RNA平板上桔青霉核酸酶P1粉红酶解圈形成的影响,优化筛选配方,得到优化反应条件为:超滤水体系,甲苯胺蓝浓度2×10-4mol/L,及RNA加入浓度0.1%,以优化配方在28℃恒温培养箱中反应12h,从培养皿中会发现核酸酶的酶活大小与粉红色酶解圈直径大小呈正相关关系,优化TB-RNA平板法可用于桔青霉核酸酶P1高产菌株的高效筛选。通过紫外诱变共得到116株优化菌株,以酶解圈与菌落的直径比大于1.71为指标,从中筛选出若干菌株进行后期种母摇瓶发酵和发酵摇瓶的验证,证明有6株菌株优于原始菌株,发酵酶活最高提高了23%。