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公开(公告)号：CN103898158B
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201410075547.8
申请日：2014-03-04
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属市中医医院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/66 , C12Q1/6886 , C12Q1/02 , C12N5/10
摘要： 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3‑Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3‑Basic‑MALAT1‑promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL‑SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。
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公开(公告)号：CN103898137A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410075529.X
申请日：2014-03-04
申请人： 上海中医药大学附属市中医医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明涉及一种含有MALAT1基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用。具体地，根据生物信息学数据库预测has-mir-619-5p与MALAT1基因3’UTR区结合的位点，将其中包含该结合位点的序列扩增出来，插入双荧光素酶报告基因质粒pmirGLOvector，成功构建了MALAT1基因3’UTR区双荧光素酶报告基因质粒。该质粒可作为简单易行的工具，用于检测调控MALAT1表达的microRNA的表达量、筛选调控MALAT1表达的microRNA，以及评估microRNA对MALAT1表达的调控作用，为通过检测microRNA表达情况了解肿瘤的发生发展提供了重要手段。
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公开(公告)号：CN103898137B
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201410075529.X
申请日：2014-03-04
申请人： 上海中医药大学附属市中医医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明涉及一种含有MALAT1基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用。具体地，根据生物信息学数据库预测has‑mir‑619‑5p与MALAT1基因3’UTR区结合的位点，将其中包含该结合位点的序列扩增出来，插入双荧光素酶报告基因质粒pmirGLO vector，成功构建了MALAT1基因3’UTR区双荧光素酶报告基因质粒。该质粒可作为简单易行的工具，用于检测调控MALAT1表达的microRNA的表达量、筛选调控MALAT1表达的microRNA，以及评估microRNA对MALAT1表达的调控作用，为通过检测microRNA表达情况了解肿瘤的发生发展提供了重要手段。
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公开(公告)号：CN103898158A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410075547.8
申请日：2014-03-04
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属市中医医院
摘要： 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3-Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3-Basic-MALAT1-promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL-SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。
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公开(公告)号：CN114917337A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210612631.3
申请日：2022-05-31
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院
IPC分类号： A61K39/395 , A61P35/00
摘要： 本发明涉及一种治疗大肠癌的靶向药物组合物，所述药物组合物由左金丸水提物与西妥昔单抗组成，所述左金丸水提物与西妥昔单抗的比例为：22.5:1。本发明还提供了药物组合物在制备治疗大肠癌的靶向药物中的应用。本发明的靶向药物组合物，在体内荷瘤裸鼠模型水平协同多靶点抗EGFR的药效学、药理学和早期安全性的研究，证明能够改善大肠癌动物模型的一般情况及抑制大肠癌生长和转移。本发明的靶向药物组合物，能阻断与EGFR密切相关的信号蛋白的激活，抑制下游转录因子的表达。采用左金丸联合CET干预后的大肠癌细胞中p‑EGFR、p‑Akt、p‑mTOR等蛋白活性降低，与单用CET相比，左金丸联合CET能够抑制大肠癌细胞中EGFR信号通路相关的EGFR、Akt、mTOR等蛋白磷酸化的表达。
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公开(公告)号：CN103173481A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310065889.7
申请日：2013-03-01
申请人： 上海中医药大学附属普陀医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明涉及一种质粒载体，所述的质粒载体是在pmirGLODual-Luciferase-promoter质粒载体的第6832-7349bp区段内插入了人ABCB1基因的3′UTR序列。本发明还涉及含有上述载体的宿主细胞、上述载体的构建方法及其在筛选多药耐药相关microRNA中的用途。本发明为准确预测调控人ABCB1基因表达的microRNA提供了一种快速、高效、简单易行的方法，进而为提高microRNA检测的灵敏度和特异性，以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
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公开(公告)号：CN109576297B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201811610951.5
申请日：2018-12-27
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明提供了一种含WSB1基因启动子和报告基因的重组质粒及其构建方法和应用。具体地，克隆WSB1基因启动子特异性序列，重组到含萤火虫荧光素酶报告基因载体序列中，构建含WSB1基因启动子和报告基因的重组质粒，再将构建的重组质粒与海肾荧光素酶报告基因质粒pRL‑TK共转染肿瘤细胞，使其稳定表达，最后通过检测双荧光素酶的活性来反映WSB1基因启动子启动转录的活性，从而应用于靶向筛选抗肿瘤药物。本发明构建的重组质粒采用的是WSB1基因启动子，并选取了特定的启动子序列，所构建的药物筛选模型具有高特异性、高灵敏度和高准确度，实现了以WSB1为靶点的抗肿瘤药物的高通量筛选。
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公开(公告)号：CN114917253A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210616836.9
申请日：2022-06-01
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明涉及一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物，所述的药物是由下列方法制备得到：(一)薏苡附子败酱散的制备：取薏苡仁、附子、败酱草，所述薏苡仁：附子：败酱草比例是30：6：15，将薏苡仁、附子、败酱草提取液浓缩；(二)服用薏苡附子败酱散健康志愿者的粪菌的制备和质量控制：收集供体新鲜粪便，即1g粪便用5mL无菌磷酸盐缓冲液进行过滤的方法，经过离心、洗涤、再离心过程得到富集的细菌沉淀，以细菌冻存液(甘油：生理盐水比例为0.2:1)再悬浮分装后保存，其中粪菌样本浓度>107CFU/mL。本发明通过粪菌移植技术，将服用薏苡附子败酱散的健康志愿者的粪菌用于治疗肠道肿瘤，可以为研究中医药作用靶点提供技术支持和应用依据。
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公开(公告)号：CN109576297A
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201811610951.5
申请日：2018-12-27
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明提供了一种含WSB1基因启动子和报告基因的重组质粒及其构建方法和应用。具体地，克隆WSB1基因启动子特异性序列，重组到含萤火虫荧光素酶报告基因载体序列中，构建含WSB1基因启动子和报告基因的重组质粒，再将构建的重组质粒与海肾荧光素酶报告基因质粒pRL-TK共转染肿瘤细胞，使其稳定表达，最后通过检测双荧光素酶的活性来反映WSB1基因启动子启动转录的活性，从而应用于靶向筛选抗肿瘤药物。本发明构建的重组质粒采用的是WSB1基因启动子，并选取了特定的启动子序列，所构建的药物筛选模型具有高特异性、高灵敏度和高准确度，实现了以WSB1为靶点的抗肿瘤药物的高通量筛选。
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公开(公告)号：CN103173480B
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201310065888.2
申请日：2013-03-01
申请人： 上海中医药大学附属曙光医院
摘要： 本发明涉及一种质粒载体，所述的质粒载体包含人ABCB1基因的3′UTR序列和双荧光素酶基因。本发明还涉及一种筛选多药耐药相关microRNA的方法，它是将待测试microRNA和如上所述的质粒载体共转染多药耐药宿主细胞，以转染microRNA的多药耐药宿主细胞为对照，观测双荧光素酶活性的变化，确定待测试microRNA是否为多药耐药相关microRNA。本发明还涉及一种microRNA在制备逆转多药耐药的药物中的用途。使用本发明的方法筛选多药耐药相关microRNA具有快速、高效、简单易行的优点，为提高microRNA检测的灵敏度和特异性，以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
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