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公开(公告)号:CN114164286A
公开(公告)日:2022-03-11
申请号:CN202111505493.0
申请日:2021-12-10
申请人: 上海交通大学
摘要: 本发明公开了一种检测沙门氏菌的多重液滴数字PCR试剂盒及其方法和应用,涉及微生物检测技术领域,试剂盒包含液滴数字PCR反应液和质控品,液滴数字PCR反应液中含有用于检测肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌核酸的引物和探针,探针的两端标记有荧光基团。本发明的试剂盒及检测方法有效的提高了检测的灵敏度,抗干扰性强,减少了检测的假阴性率,且与大肠杆菌、阪崎肠杆菌等均无交叉反应,检测特异性高,减少了检测的假阳性率。
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公开(公告)号:CN117007789A
公开(公告)日:2023-11-07
申请号:CN202310734833.X
申请日:2023-06-20
申请人: 交弘生物科技(上海)有限公司 , 上海交通大学
IPC分类号: G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/58 , C12Q1/686 , G01N33/569 , C12Q1/70 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了一种基于Argonaute的多重免疫层析核酸检测方法及应用,包括步骤:一,对核酸样品进行等温多重扩增;二,在扩增产物加入Argonaute、向导ssDNA和探针进行剪切;三,将剪切产物滴加于免疫层析侧流片,所述试纸设有若干条检测线和质控线,观察检测线和质控线的颜色,确定检测结果。本发明采用Argonaute级联剪切与免疫层析相结合的方法,通过特别的探针修饰和层析侧流片设计,实现了一条免疫层析侧流片的多重核酸检测,并应用于SARS‑CoV‑2、甲型流感、非洲猪瘟和Actin‑β基因检测中,相比于已有技术灵敏度更高、特异性更强,且操作简便,无仪器局限性,有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114107530A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111534388.X
申请日:2021-12-15
申请人: 上海交通大学
IPC分类号: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/42
摘要: 本发明公开了一种针对生菜中沙门氏菌的液滴数字PCR检测方法及试剂盒,涉及食品安全检测技术领域,主要步骤包括对生菜样品中的沙门氏菌进行洗脱,提取洗脱悬浮液中DNA,设计合成沙门氏菌PCR扩增引物和探针,进行液滴PCR扩增反应,将扩增后的数字PCR芯片置于荧光读取仪中进行结果读取和分析,本发明具备了灵敏度高、特异性好和精确性高的优点,可以检测5fg/μL的DNA和102CFU/25mL的菌液。
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公开(公告)号:CN113981118A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111551734.5
申请日:2021-12-17
申请人: 上海交通大学
IPC分类号: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/42
摘要: 本发明涉及食品安全检测领域,公开了RPA‑LFD法快速检测沙门氏菌的引物对、方法、试剂盒及其应用。引物对为InvA‑F、InvA‑R,Stm‑F、Stm‑R,Sen‑F、Sen‑R;检测方法为提取样本总DNA,使用上述引物对进行RPA扩增反应和参数优化,应用靶标侧流层析试纸条进行检测,根据条带判读样品中是否含有沙门氏菌及其鼠伤寒、肠炎等血清型,整个检测过程可以在1小时内完成;试剂盒包括无菌双蒸水、缓冲液、标准阳性DNA、靶标侧流层析试纸条和产物稀释液。本发明包括检测沙门氏菌的引物对、方法和试剂盒,具有特异性强、简便、快速等特点,可用于沙门氏菌及其鼠伤寒和肠炎血清型的快速精准检测。
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