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公开(公告)号：CN112708601A
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN201911019173.7
申请日：2019-10-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了H1N1猪流感病毒NS1蛋白磷酸化位点丢失病毒的制备方法，利用Phos‑tag SDS电泳和点突变技术实现了H1N1猪流感病毒NS1蛋白磷酸化形式的分离并鉴定出NS1潜在磷酸化位点为第73位酪氨酸和第83位丝氨酸。将NS1基因73位密码子由TAC转变TTT，对应氨基酸由酪氨酸(Y)突变为苯丙氨酸(F)，83位密码子由TCT转变为GCT，对应氨基酸由丝氨酸(S)突变为丙氨酸(A)，通过反向遗传操作系统拯救出NS1蛋白的磷酸化位点突变的重组病毒。本发明具备的优点是：生物信息学方法结合Phos‑tag SDS电泳预测并验证了病毒蛋白的潜在磷酸化位点，此外NS1磷酸化位点丢失对于病毒的复制能力减弱，并且拮抗干扰素能力下降，可用作流感病毒候选疫苗株。
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公开(公告)号：CN101323882B
公开(公告)日：2011-03-23
申请号：CN200710041984.8
申请日：2007-06-14
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种引物集，它包括流感病毒通用型NP基因的引物对和SIV亚型的引物对。所述的引物集可制得一种RT-PCR检测试剂盒，所述的试剂盒可用于猪流感病毒(SIV)H1/H3、N1/N2血清亚型的鉴别，而且可检测到样品中是否存在除H1&H3和N1&N2以外的其它亚型的流感病毒。
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公开(公告)号：CN112708601B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN201911019173.7
申请日：2019-10-24
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了H1N1猪流感病毒NS1蛋白磷酸化位点丢失病毒的制备方法，利用Phos‑tag SDS电泳和点突变技术实现了H1N1猪流感病毒NS1蛋白磷酸化形式的分离并鉴定出NS1潜在磷酸化位点为第73位酪氨酸和第83位丝氨酸。将NS1基因73位密码子由TAC转变TTT，对应氨基酸由酪氨酸(Y)突变为苯丙氨酸(F)，83位密码子由TCT转变为GCT，对应氨基酸由丝氨酸(S)突变为丙氨酸(A)，通过反向遗传操作系统拯救出NS1蛋白的磷酸化位点突变的重组病毒。本发明具备的优点是：生物信息学方法结合Phos‑tag SDS电泳预测并验证了病毒蛋白的潜在磷酸化位点，此外NS1磷酸化位点丢失对于病毒的复制能力减弱，并且拮抗干扰素能力下降，可用作流感病毒候选疫苗株。
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公开(公告)号：CN109306008A
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201811194714.5
申请日：2018-10-15
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 一种猪源性抗猪瘟病毒的单链抗体及其制备方法，该单链抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区和轻链可变区由连接肽连接；所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；所述连接肽的氨基酸序列为GGGGSGGGGSGGGGS。本发明的单链抗体能够与猪瘟病毒特异性结合，直接由重组疫苗进行体内表达，可快速、高效诱导中和抗体的产生，不依赖于机体免疫系统，用于阻断猪瘟病毒的感染。
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公开(公告)号：CN107619822A
公开(公告)日：2018-01-23
申请号：CN201710948069.0
申请日：2017-10-12
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 一种猪流行性腹泻病毒弱毒株、其培养方法及应用，该猪流行性腹泻病毒JS/PEDV/2/2014G100，保藏编号CCTCC NO.V201728，全长27939bp，其ORF3基因中比PEDV强毒株缺失49个核苷酸，遗传进化分析表明，该毒株归属于G1亚群，在Vero细胞上的增殖不依赖于胰酶，属于细胞适应株，其具有较好的交叉保护性、抗原性和免疫原性，感染猪体临床表征正常，体重增长稳定，不出现排毒现象，体内能产生高水平PEDV抗体，血清IgG抗体的OD450值可达1.2，免疫后60d抗体的OD450水平仍维持在1.0，为后续疫苗研制提供了科研材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105238805A
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201410331148.3
申请日：2014-07-11
Applicant: 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种重组大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白的表达及制备方法，通过设计引物，以质粒pET30a-LTRG为模板，进行PCR扩增，得到A亚基C端和B亚基的N端均带有His标签的重组大肠杆菌热敏性肠毒素突变体LTRG基因，选择冷休克载体pcoldII，构建出pcoldII-LTRG表达载体，并对其在低温条件下进行可溶性表达，之后采用Ni柱亲和层析纯化的方法对大量表达的蛋白质进行纯化。本发明利用冷休克基因CSPA获得高效的表达能力，进行诱导表达后，可溶性表达的产物不需进行变性和复性，省掉了蛋白质变性及复性的繁琐过程，避免了变性及复性过程中蛋白质的损失。
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公开(公告)号：CN119901917A
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202311406090.X
申请日：2023-10-26
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , C07K14/085 , C12N15/41 , C12N15/70
Abstract: 本发明提供了一种基于3AB的ELISA检测方法，其可以用于区分猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus，PSV)感染和免疫，有利于PSV防控。本发明还提供了相关的试剂盒。
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公开(公告)号：CN115074461B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202110263120.0
申请日：2021-03-11
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 一种犬流感病毒、犬冠状病毒和犬呼肠孤病毒的三重PCR检测方法，包括：1)查找犬流感病毒CIV、犬冠状病毒CCOV和犬呼肠孤病毒CRV的保守区序列；2)根据GenBank上公布的CIV病毒的M基因、CCOV病毒的L1基因和CRV病毒的M基因序列信息，分别设计上下游引物对；3)进行三重PCR反应，反应体系中，引物为2.5‑5μmol/L，模板量为1‑5ng/μL，其中，3组引物的添加量符合扩增CIV病毒的引物：扩增CCOV病毒的引物：扩增CRV病毒的引物＝1：0.5‑1：1。利用本发明，可对单一样品同时进行三种不同病原的检测，具有灵敏性高、特异性强、省时省力等优点，以方便快速、准确地进行相关流行病学监测。
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公开(公告)号：CN116407623A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202310508869.6
申请日：2023-05-08
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明提供了一种猪星状病毒ORF2蛋白在制备猪腹泻病的试剂盒中的应用，其中，猪星状病毒ORF2蛋白由重组质粒pGEX‑ORF2转化Rosetta表达菌株，离心，分别在37℃和15℃诱导得到；重组质粒pGEX‑ORF2包括ORF2基因和pGEX‑4T‑1载体，ORF2基因以PAstV/SH/2022/CM1病毒液总RNA反转录，以cDNA为模板，利用引物进行PCR扩增得到，ORF2基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，引物的上游序列如SEQ ID NO.2所示，下游序列如SEQ ID NO.3所示。
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公开(公告)号：CN116392292A
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN202310620677.4
申请日：2023-05-29
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明提供一种母猪用口服免疫接种辅助装置。所述母猪用口服免疫接种辅助装置包括车体，所述车体上设有驾驶室，所述驾驶室的一侧设有固定安装在所述车体上的箱体，所述箱体的顶部固定安装有支撑架，所述支撑架上固定安装有安装架，所述安装架上转动安装有第一定滑轮和第二定滑轮，所述箱体的顶部固定安装有卷线轮，所述卷线轮上绕设有牵引带的一端，所述牵引带绕设在所述第一定滑轮和所述第二定滑轮上，所述牵引带的另一端连接有动滑轮，所述动滑轮的底部连接有猪鼻套。本发明提供的母猪用口服免疫接种辅助装置具有使用方便、操作简单、能够在一个人时即可对母猪进行口服免疫接种的优点。
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