公开(公告)号：CN101205250A

公开(公告)日：2008-06-25

申请号：CN200610147503.7

申请日：2006-12-20

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  许必雄 ,  包骧飞 ,  李军辉 ,  沈积慧 ,  李春洲

IPC分类号： C07K1/18 ,  C07K14/775

CPC分类号： C07K14/775

摘要： 本发明公开了一种获得载脂蛋白A－I的方法，它包括步骤：a.将经Cohn低温乙醇法获得的组份四和1－8M的尿素混合形成组份四预处理溶液；b.步骤a得到的组份四预处理溶液流过阴离子交换层析柱后，用含1－8M尿素的缓冲液洗涤层析柱，得到初步纯化的载脂蛋白A－I；c.含步骤b得到的初步纯化的载脂蛋白A－I的溶液流过阴离子交换层析柱，洗脱杂质后用含0－1M尿素的缓冲液洗涤层析柱，得到纯化的载脂蛋白A－I。所述的方法蛋白得率高、成本低，适合工业化生产；同时，该方法还充分利用了血浆资源。

公开(公告)号：CN101544683B

公开(公告)日：2012-11-14

申请号：CN200810035303.1

申请日：2008-03-28

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  沈积慧 ,  胡维兵 ,  施炜

IPC分类号： C07K1/00 ,  C07K14/75

摘要： 本发明公开了一种使纤维蛋白原在S/D法、干热病毒灭活两步病毒灭活处理后仍能保持蛋白活性的方法和物质。

公开(公告)号：CN102127165A

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN201010022840.X

申请日：2010-01-15

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  许必雄 ,  李春洲 ,  李军辉 ,  沈积慧 ,  郭颀然

IPC分类号： C07K14/775 ,  C07K1/36 ,  A61P9/10

CPC分类号： C07K14/775

摘要： 本发明公开了一种从血浆组分四中纯化得到高纯ApoA-I的方法，包括下列步骤：血浆组分四沉淀溶解，离心除去硅藻土及杂质，收集上清液；上清液加入氯化钠使ApoA-I蛋白凝聚析出，离心获得ApoA-I沉淀；复溶ApoA-I沉淀并过滤；滤液先后经阴离子柱层析及疏水柱层析，分离获得高纯的ApoA-I溶液。本发明的方法工艺制备的ApoA-I具有很高的纯度，纯度可达95％以上，ApoA-I得率可达70％，且操作安全方便，容易实现工艺放大，非常适合工业化生产。

公开(公告)号：CN101544683A

公开(公告)日：2009-09-30

申请号：CN200810035303.1

申请日：2008-03-28

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  沈积慧 ,  胡维兵 ,  施炜

IPC分类号： C07K1/00 ,  C07K14/75

摘要： 本发明公开了一种使纤维蛋白原在S/D法、干热病毒灭活两步病毒灭活处理后仍能保持蛋白活性的方法和物质。

公开(公告)号：CN100586958C

公开(公告)日：2010-02-03

申请号：CN200610147503.7

申请日：2006-12-20

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  许必雄 ,  包骧飞 ,  李军辉 ,  沈积慧 ,  李春洲

IPC分类号： C07K1/18 ,  C07K14/775

CPC分类号： C07K14/775

摘要： 本发明公开了一种获得载脂蛋白A-I的方法，它包括步骤：a.将经Cohn低温乙醇法获得的组份四和1-8M的尿素混合形成组份四预处理溶液；b.步骤a得到的组份四预处理溶液流过阴离子交换层析柱后，用含1-8M尿素的缓冲液洗涤层析柱，得到初步纯化的载脂蛋白A-I；c.含步骤b得到的初步纯化的载脂蛋白A-I的溶液流过阴离子交换层析柱，洗脱杂质后用含0-1M尿素的缓冲液洗涤层析柱，得到纯化的载脂蛋白A-I。所述的方法蛋白得率高、成本低，适合工业化生产；同时，该方法还充分利用了血浆资源。

公开(公告)号：CN102731642A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201110093549.6

申请日：2011-04-14

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  李春洲 ,  陆晖 ,  李军辉 ,  包骧飞

IPC分类号： C07K14/47 ,  C07K1/18 ,  C07K1/14

摘要： 本发明公开了一种从血浆组分四沉淀中制备高纯度载脂蛋白Apoa-I的生产工艺，是通过一步离心加一步离子柱层析法从血浆组分四沉淀中制备高纯度Apoa-I。本发明的生产工艺具有设备简单、操作方便、步骤少、生产周期短、蛋白回收率高、适于工业化大规模生产等优点。

公开(公告)号：CN102731642B

公开(公告)日：2014-01-29

申请号：CN201110093549.6

申请日：2011-04-14

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  李春洲 ,  陆晖 ,  李军辉 ,  包骧飞

IPC分类号： C07K14/47 ,  C07K1/18 ,  C07K1/14

摘要： 本发明公开了一种从血浆组分四沉淀中制备高纯度载脂蛋白Apoa-I的生产工艺，是通过一步离心加一步离子柱层析法从血浆组分四沉淀中制备高纯度Apoa-I。本发明的生产工艺具有设备简单、操作方便、步骤少、生产周期短、蛋白回收率高、适于工业化大规模生产等优点。

公开(公告)号：CN102127165B

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201010022840.X

申请日：2010-01-15

申请人： 上海莱士血液制品股份有限公司

发明人： 黄凯 ,  何秋 ,  许必雄 ,  李春洲 ,  李军辉 ,  沈积慧 ,  郭颀然

IPC分类号： C07K14/775 ,  C07K1/36 ,  A61P9/10

CPC分类号： C07K14/775

摘要： 本发明公开了一种从血浆组分四中纯化得到高纯ApoA-I的方法，包括下列步骤：血浆组分四沉淀溶解，离心除去硅藻土及杂质，收集上清液；上清液加入氯化钠使ApoA-I蛋白凝聚析出，离心获得ApoA-I沉淀；复溶ApoA-I沉淀并过滤；滤液先后经阴离子柱层析及疏水柱层析，分离获得高纯的ApoA-I溶液。本发明的方法工艺制备的ApoA-I具有很高的纯度，纯度可达95％以上，ApoA-I得率可达70％，且操作安全方便，容易实现工艺放大，非常适合工业化生产。