一种利用限制性内切酶防止PCR污染的方法

    公开(公告)号:CN101768629A

    公开(公告)日:2010-07-07

    申请号:CN200810208128.1

    申请日:2008-12-29

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种利用限制性内切酶防止PCR污染的方法。具体地,本发明方法包括步骤(a)将PCR反应体系在IIS型限制性内切酶的酶切温度下保温一段时间,从而消化反应体系中可能存在的污染物;(b)灭活IIS型限制性内切酶;和(c)对PCR反应体系进行退火-延伸-变性的循环,从而获得PCR扩增产物。本发明可简便有效地防止前次PCR产物所造成的污染。

    一种检测核酸点突变的方法

    公开(公告)号:CN101768628A

    公开(公告)日:2010-07-07

    申请号:CN200810208117.3

    申请日:2008-12-29

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种检测核酸点突变的方法。具体地,本发明方法包括与待检测核酸样品与本发明的探针进行杂交,并检测是否形成“待检测核酸-探针”杂交复合物,其中在本发明的探针序列中额外引入一个人工的不匹配位点,从而在探针结合区与待检测的含点突变的序列之间可出现了两个不匹配位点。使用本发明的探针时,可以在反向杂交检测核酸点突变中,使得探针针对野生型和突变型得检测信号产生明显的区别,从而可以更明确地判定检测结果。试验表明,本发明可有效提高检测信噪比从而提高检测灵敏度。