公开(公告)号：CN113322283A

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN202110629041.7

申请日：2021-06-07

申请人： 上海长征医院

发明人： 徐辰 ,  张子凡 ,  刘洋 ,  沈晓龙 ,  刘宁 ,  张子程 ,  袁文

IPC分类号： C12N15/867 ,  C12N15/65 ,  C12N15/37 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071

摘要： 本发明提供一种制备后纵韧带骨化患者永生化后纵韧带细胞方法，涉及基因工程技术领域。该制备后纵韧带骨化患者永生化后纵韧带细胞方法，包括以下步骤：S1、永生化后纵韧带细胞的构建；1)SV40Tant i gen基因及Hygromyc i nB抗性基因的确定；2)克隆过表达SV40Tant i ge慢病毒质粒，并携带Hygromyc i nB抗性；3)慢病毒的包装。本发明，永生化后纵韧带细胞系建立可简化研究过程，为研究提供足量而性状稳定的研究细胞，并被广泛用于人类疾病的研究，通过SV40Tant i gen基因及Hygromyc i nB抗性基因一同构建过表达慢病毒质粒成功高效的建立了永生化后纵韧带细胞，用于后纵韧带骨化疾病发病机制的研究。

公开(公告)号：CN113322283B

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202110629041.7

申请日：2021-06-07

申请人： 上海长征医院

发明人： 徐辰 ,  张子凡 ,  刘洋 ,  沈晓龙 ,  刘宁 ,  张子程 ,  袁文

IPC分类号： C12N15/867 ,  C12N15/65 ,  C12N15/37 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071

摘要： 本发明提供一种制备后纵韧带骨化患者永生化后纵韧带细胞方法，涉及基因工程技术领域。该制备后纵韧带骨化患者永生化后纵韧带细胞方法，包括以下步骤：S1、永生化后纵韧带细胞的构建；1)SV40Tant i gen基因及Hygromyc i nB抗性基因的确定；2)克隆过表达SV40Tant i ge慢病毒质粒，并携带Hygromyc i nB抗性；3)慢病毒的包装。本发明，永生化后纵韧带细胞系建立可简化研究过程，为研究提供足量而性状稳定的研究细胞，并被广泛用于人类疾病的研究，通过SV40Tant i gen基因及Hygromyc i nB抗性基因一同构建过表达慢病毒质粒成功高效的建立了永生化后纵韧带细胞，用于后纵韧带骨化疾病(56)对比文件Alexandre Z Daly等.Pituitary Tumorsand Immortalized Cell Lines Generated byCre-Inducible Expression of SV40 TAntigen《.Endocrinology》.2021,第62卷(第7期),bqab073.