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公开(公告)号：CN101245389A
公开(公告)日：2008-08-20
申请号：CN200810035152.X
申请日：2008-03-25
申请人： 东华大学 , 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种微量DNA的多重PCR检测方法，通过改变引物浓度和引物添加方式来避免多重PCR技术中引物过多造成的竞争抑制问题，可用于起始样本非常有限的DNA，尤其是一些很珍贵的临床样本，如受精卵，激光捕获显微切割获得的细胞等。本发明整个检测方案操作过程简单，特异性高，并且灵敏度与PCR效率都很高，易于自动化，在实际应用中有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN102534042A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210066050.0
申请日：2012-03-14
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及基于荧光通用引物的多重竞争性PCR检测基因表达谱分析方法，包括下列步骤：(1)提供多重竞争性PCR引物，由至少一对通用荧光引物、至少一对位于待测基因上下游的嵌合特异引物和至少一对参照引物组成；(2)定量合成内对照DNA片段；(3)多重竞争性PCR反应过程；和(4)数据分析。本发明还提供基于以上分析方法的试剂盒，适用于5～25个基因的研究特定药物反应或信号转导通路等特定基因表达谱分析，是一种准确的、中通量的、经济的基因表达分析方案。
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公开(公告)号：CN102586456B
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201210066536.4
申请日：2012-03-14
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
摘要： 本发明涉及基于通用荧光引物的多重竞争性PCR检测拷贝数变异的方法，包括下列步骤：(1)提供多重竞争性PCR引物，由至少一对通用荧光引物、至少一对位于待测基因上下游的嵌合特异引物和至少三对参照引物组成；(2)定量合成内对照DNA片段；(3)多重竞争性PCR反应过程；和(4)数据分析。本发明还提供基于以上分析方法的试剂盒，适用于5～28个基因/反应的拷贝数变异的检测，是一种快速、中通量、经济的拷贝数变异检测方案。
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公开(公告)号：CN102943109B
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210378856.3
申请日：2012-10-08
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及基于通用荧光引物的多重竞争性PCR检测拷贝数变异的方法，包括下列步骤：（1）提供多重竞争性PCR引物，由至少一对通用荧光引物、至少一对位于待测区段和至少一对位于参照区段的嵌合特异引物组成；（2）构建一个全长内对照序列，通过限制性内切酶消化获得所有内对照片段；（3）多重竞争性PCR反应过程；和（4）数据分析。本发明还提供基于以上分析方法的试剂盒，适用于5~28个基因/反应的拷贝数变异的检测，是一种快速、中通量、经济的拷贝数变异检测方案。
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公开(公告)号：CN101329250B
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN200710042257.3
申请日：2007-06-20
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
摘要： 本发明提供一种荧光标记探针的PCR-LDR基因多态性检测测序方法。本发明利用荧光标记探针进行PCR关联LDR和测序技术来进行基因多态性位点检测。本发明方法包括以下步骤：引物和探针设计、PCR检测、LDR检测、测序仪结果检测。本发明的方法由于测序结果的直接性，解决了结果的假阳性和假阴性；测序平台的样本高通量性，可同时进行上百例样本的检测；位点的高通量，利用测序仪的5色荧光检测系统，同时能利用4种荧光，使测序仪系统也可同时进行一百多个位点的检测，加速检测的速度，降低了实验成本。
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公开(公告)号：CN102936624B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201210378857.8
申请日：2012-10-08
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种快速高密度多重竞争性PCR法检测拷贝数变异的方法，包括下列步骤：（1）提供多重竞争性PCR引物，由至少一对通用荧光引物、至少一对位于待测区段和至少一对位于参照区段的嵌合特异引物组成；（2）用限制性内切酶消化样本获得独立的结构相似的样本模板小片段，使得该检测片段能被高密度PCR所检测，且对于高GC序列不敏感；（3）利用PCR法直接制备内对照模板；（4）多重竞争性PCR反应；和（5）数据分析。本发明的方法能在一天内快速简便地建立起中通量的适于5~28个基因/反应的拷贝数变异的检测方案，结果准确，适用性广。本发明还提供相应的试剂盒。
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公开(公告)号：CN102943109A
公开(公告)日：2013-02-27
申请号：CN201210378856.3
申请日：2012-10-08
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及基于通用荧光引物的多重竞争性PCR检测拷贝数变异的方法，包括下列步骤：（1）提供多重竞争性PCR引物，由至少一对通用荧光引物、至少一对位于待测区段和至少一对位于参照区段的嵌合特异引物组成；（2）构建一个全长内对照序列，通过限制性内切酶消化获得所有内对照片段；（3）多重竞争性PCR反应过程；和（4）数据分析。本发明还提供基于以上分析方法的试剂盒，适用于5~28个基因/反应的拷贝数变异的检测，是一种快速、中通量、经济的拷贝数变异检测方案。
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公开(公告)号：CN101329250A
公开(公告)日：2008-12-24
申请号：CN200710042257.3
申请日：2007-06-20
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
摘要： 本发明提供一种荧光标记探针的PCR－LDR基因多态性检测测序方法。本发明利用荧光标记探针进行PCR关联LDR和测序技术来进行基因多态性位点检测。本发明方法包括以下步骤：引物和探针设计、PCR检测、LDR检测、测序仪结果检测。本发明的方法由于测序结果的直接性，解决了结果的假阳性和假阴性；测序平台的样本高通量性，可同时进行上百例样本的检测；位点的高通量，利用测序仪的5色荧光检测系统，同时能利用4种荧光，使测序仪系统也可同时进行一百多个位点的检测，加速检测的速度，降低了实验成本。
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公开(公告)号：CN102978280A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210432103.6
申请日：2012-11-01
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及基于通用荧光引物的多重竞争性PCR检测拷贝数变异的方法，包括下列步骤：（1）提供多重竞争性PCR引物，由至少一对待测区段引物和至少一对参照区段引物组成；（2）提供竞争性内对照模板，内对照模板序列与实际序列在序列中仅有一个碱基替换；（3）多重竞争性PCR反应；（4）LDR反应；和（5）数据分析。本发明还提供基于以上检测方法的试剂盒，适用于5~25个基因/反应的拷贝数变异的检测，是一种快速、中通量、经济的拷贝数变异检测方案。
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公开(公告)号：CN102936624A
公开(公告)日：2013-02-20
申请号：CN201210378857.8
申请日：2012-10-08
申请人： 上海翼和应用生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种快速高密度多重竞争性PCR法检测拷贝数变异的方法，包括下列步骤：（1）提供多重竞争性PCR引物，由至少一对通用荧光引物、至少一对位于待测区段和至少一对位于参照区段的嵌合特异引物组成；（2）用限制性内切酶消化样本获得独立的结构相似的样本模板小片段，使得该检测片段能被高密度PCR所检测，且对于高GC序列不敏感；（3）利用PCR法直接制备内对照模板；（4）多重竞争性PCR反应；和（5）数据分析。本发明的方法能在一天内快速简便地建立起中通量的适于5～28个基因/反应的拷贝数变异的检测方案，结果准确，适用性广。本发明还提供相应的试剂盒。
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