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公开(公告)号：CN103205508A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310105578.9
申请日：2013-03-28
申请人： 东莞出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，涉及海洋水产养殖业的检测方法，具体涉及一种病毒性出血败血症病毒的RT-LAMP检测引物组、检测试剂盒及检测方法。检测引物组包括外引物、内引物和环引物；检测试剂盒主要包括引物液、反应液、DNA聚合酶、逆转录酶和对照；其检测方法是通过提取待检病毒RNA，利用逆转录酶的逆转录活性，采用六条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，对样品RNA模板进行扩增，可检测到纯病毒RNA的pg级，其鉴定采用加入SYBR Green I ESE-Quant-tube Scanner仪器检测或者利用浊度仪，确定待检样品是否含有病毒性出血败血症病毒RNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。
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公开(公告)号：CN105296669A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510732551.1
申请日：2015-11-02
申请人： 东莞出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心 , 四川农业大学
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/107 , C12Q2531/119
摘要： 本发明公开了一种传染性造血器官坏死病毒（IHNV） RT-LAMP检测引物组、检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括一对外引物、一对内引物和一对环引物；检测试剂盒包括引物液、反应液、DNA聚合酶、逆转录酶和对照；试剂盒还可以有显色剂。其检测方法是通过提取待检病毒RNA，利用逆转录酶的逆转录活性，采用六条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在63～65℃对样品RNA模板进行扩增，可检测到纯病毒RNA的pg级，其鉴定采用加入SYBR Green I ESE-Quant-tube Scanner仪器检测或者利用浊度仪观察反应管内沉淀的浊度变化判断扩增与否，确定待检样品是否含有传染性造血器官坏死病毒RNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。
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公开(公告)号：CN103205508B
公开(公告)日：2014-11-26
申请号：CN201310105578.9
申请日：2013-03-28
申请人： 东莞出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，涉及海洋水产养殖业的检测方法，具体涉及一种病毒性出血败血症病毒的RT-LAMP检测引物组、检测试剂盒及检测方法。检测引物组包括外引物、内引物和环引物；检测试剂盒主要包括引物液、反应液、DNA聚合酶、逆转录酶和对照；其检测方法是通过提取待检病毒RNA，利用逆转录酶的逆转录活性，采用六条特异性引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，对样品RNA模板进行扩增，可检测到纯病毒RNA的pg级，其鉴定采用加入SYBR Green I ESE-Quant-tube Scanner仪器检测或者利用浊度仪，确定待检样品是否含有病毒性出血败血症病毒RNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点，适于推广应用。
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公开(公告)号：CN102605103B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210068112.1
申请日：2012-03-15
摘要： 本发明公开了属于病毒检测技术领域的一种检测诺沃克病毒核苷酸的引物、探针及方法。其引物和探针的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID No.1，SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明检测诺沃克病毒核苷酸的方法以样品RNA为模板，利用上述引物和探针进行实时荧光RT-PCR扩增，每个循环结束采集数据，反应结束后，若出现诺沃克病毒特异性荧光扩增曲线则判定样品RNA中含有诺沃克病毒核苷酸。
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公开(公告)号：CN102605103A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210068112.1
申请日：2012-03-15
摘要： 本发明公开了属于病毒检测技术领域的一种检测诺沃克病毒核苷酸的引物、探针及方法。其引物和探针的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID No.1，SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明检测诺沃克病毒核苷酸的方法以样品RNA为模板，利用上述引物和探针进行实时荧光RT-PCR扩增，每个循环结束采集数据，反应结束后，若出现诺沃克病毒特异性荧光扩增曲线则判定样品RNA中含有诺沃克病毒核苷酸。
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公开(公告)号：CN102260750A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110203471.9
申请日：2011-07-20
申请人： 东莞出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心
摘要： 本发明公开了属于病毒检测技术领域的一种用于口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测的引物和方法。本发明分析所有已报道的口蹄疫病毒通用型基因组序列，分别设计引物和荧光探针，通过实时荧光RT-PCR检测，得到口蹄疫通用型的特异性荧光曲线，可以确定血清型，检测结果可靠、准确灵敏、操作简单、省时省力、降低检测成本、提高检测效率。
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公开(公告)号：CN102260750B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110203471.9
申请日：2011-07-20
申请人： 东莞出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心
摘要： 本发明公开了属于病毒检测技术领域的一种用于口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测的引物和方法。本发明分析所有已报道的口蹄疫病毒通用型基因组序列，分别设计引物和荧光探针，通过实时荧光RT-PCR检测，得到口蹄疫通用型的特异性荧光曲线，可以确定血清型，检测结果可靠、准确灵敏、操作简单、省时省力、降低检测成本、提高检测效率。
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