公开(公告)号：CN102586465B

公开(公告)日：2013-08-21

申请号：CN201210078871.6

申请日：2012-03-23

申请人： 中华人民共和国义乌出入境检验检疫局 ,  浙江省检验检疫科学技术研究院

发明人： 张晓峰 ,  李可 ,  帅江冰 ,  吴珊 ,  朱振江

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

CPC分类号： Y02A50/451

摘要： 本发明涉及应用PNA-FISH法鉴定弧菌属的方法，尤其涉及用于鉴定重要致病性弧菌（Vibrio）的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测弧菌用PNA探针，PNA探针的序列为TACCCCCCTCTACAG。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性，使本发明的检测方法具有快速，准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证，更加提高了鉴定的准确率。

公开(公告)号：CN102586466B

公开(公告)日：2014-02-26

申请号：CN201210079061.2

申请日：2012-03-23

申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院

发明人： 李可 ,  张晓峰 ,  吴珊 ,  帅江冰 ,  何永强

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11

CPC分类号： Y02A50/451

摘要： 本发明涉及PNA-FISH法鉴定沙门氏菌属的方法，尤其涉及用于鉴定主要食源致病性沙门氏菌（Salmonella）的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测沙门氏菌用PNA探针Sal-invA-1，所述的PNA探针的序列为TCTGGATGGTATGCC。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性，使本发明的检测方法具有快速，准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证，更加提高了鉴定的准确率。

公开(公告)号：CN102605106B

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：CN201210087285.8

申请日：2012-03-29

申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院

发明人： 何永强 ,  吴珊 ,  帅江冰 ,  王素华 ,  张晓峰 ,  黎昊雁 ,  鲁兴萌 ,  李孝军 ,  余招锋 ,  许赢升 ,  戴云通

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

摘要： 本发明属于生物检测技术领域，涉及家蚕微孢子虫、家蚕核型多角体病毒和家蚕浓核病毒的三重荧光PCR检测方法及试剂盒和引物、探针。本发明分别设计了各自的引物和探针，并在3个探针上标记了不同的荧光信号，在优化了PCR反应体系的条件下，实现三重荧光定量PCR同步检测蚕微孢子虫、家蚕核型多角体病毒和家蚕浓核病毒。不仅可实现DNA同步提取，也可以进行荧光PCR同步检测，大大简化了检测方法，并通过荧光补偿的程序，有效地消除了因荧光信号的交集而引起的假阳性。该方法能快速、特异和灵敏的一次性鉴别检测蚕微孢子虫、家蚕核型多角体病毒和家蚕浓核病毒，可提高早期检出率，有效防止疾病的传播，减少经济损失。

公开(公告)号：CN102586466A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210079061.2

申请日：2012-03-23

申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院

发明人： 李可 ,  张晓峰 ,  吴珊 ,  帅江冰 ,  何永强

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11

CPC分类号： Y02A50/451

摘要： 本发明涉及PNA-FISH法鉴定沙门氏菌属的方法，尤其涉及用于鉴定主要食源致病性沙门氏菌（Salmonella）的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测沙门氏菌用PNA探针Sal-invA-1，所述的PNA探针的序列为TCTGGATGGTATGCC。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性，使本发明的检测方法具有快速，准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证，更加提高了鉴定的准确率。

公开(公告)号：CN102586465A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210078871.6

申请日：2012-03-23

申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院

发明人： 张晓峰 ,  李可 ,  帅江冰 ,  吴珊 ,  朱振江

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

CPC分类号： Y02A50/451

摘要： 本发明涉及应用PNA-FISH法鉴定弧菌属的方法，尤其涉及用于鉴定重要致病性弧菌（Vibrio）的方法和PNA探针。肽核酸原位荧光杂交技术检测弧菌用PNA探针，PNA探针的序列为TACCCCCCTCTACAG。本发明的PNA具有与DNA和RNA特异性结合的高稳定性、杂交快速性、及其良好的细胞穿透性，使本发明的检测方法具有快速，准确、灵敏的特性。同时结合原位荧光杂交技术使检测具有分子生物学和形态学的双重保证，更加提高了鉴定的准确率。

公开(公告)号：CN102605106A

公开(公告)日：2012-07-25

申请号：CN201210087285.8

申请日：2012-03-29

申请人： 浙江省检验检疫科学技术研究院

发明人： 何永强 ,  吴珊 ,  帅江冰 ,  王素华 ,  张晓峰 ,  黎昊雁 ,  鲁兴萌 ,  李孝军 ,  余招锋 ,  许赢升 ,  戴云通

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

摘要： 本发明属于生物检测技术领域，涉及家蚕微孢子虫、家蚕核型多角体病毒和家蚕浓核病毒的三重荧光PCR检测方法及试剂盒和引物、探针。本发明分别设计了各自的引物和探针，并在3个探针上标记了不同的荧光信号，在优化了PCR反应体系的条件下，实现三重荧光定量PCR同步检测蚕微孢子虫、家蚕核型多角体病毒和家蚕浓核病毒。不仅可实现DNA同步提取，也可以进行荧光PCR同步检测，大大简化了检测方法，并通过荧光补偿的程序，有效地消除了因荧光信号的交集而引起的假阳性。该方法能快速、特异和灵敏的一次性鉴别检测蚕微孢子虫、家蚕核型多角体病毒和家蚕浓核病毒，可提高早期检出率，有效防止疾病的传播，减少经济损失。