公开(公告)号：CN113621703A

公开(公告)日：2021-11-09

申请号：CN202110763048.8

申请日：2021-07-06

Applicant: 中南大学

Inventor： 梁德生 ,  陈妙妙 ,  邬玲仟

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种基于Cas蛋白的检测方法，包括以下步骤：S1、根据目的基因设计合成PCR扩增引物；并根据PCR扩增引物合成crRNA；S2、采用PCR扩增引物对目的基因进行PCR扩增，得到扩增产物；后用Cas蛋白、crRNA和荧光探针体系检测扩增产物；所述目的基因为骨髓增殖性肿瘤患者的突变体细胞基因。本检测技术最高可检测JAK2 V617F突变占比0.01%的混合gDNA，远高于临床所需的灵敏度；④操作简便，耗时短。

公开(公告)号：CN117363708A

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN202311088829.7

申请日：2023-08-28

Applicant: 中南大学

Inventor： 梁德生 ,  陈妙妙 ,  李卓 ,  邬玲仟

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/682 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及核酸检测领域，特别涉及一种基于Cas免扩增核酸检测方法及其应用。所述scDNA是通过采用不完全互补配对的iDNA与靶ssDNA退火杂交形成的具有ssDNA凸起的双链结构，所述scDNA上的ssDNA凸起能被活化的Cas蛋白非特异切割。本发明巧妙地设计iDNA与靶ssDNA杂交形成具有ssDNA凸起的双链体scDNA，利用scDNA和Cas组成的正反馈核酸回路开发基于Cas的免扩增核酸检测新技术。与大多数CRISPR‑Dx技术相比，本发明具有以下优势：检测快速，仅需15 min即可；检测灵敏度高，比无正反馈的CRISPR/Cas检测高8个数量级。