公开(公告)号：CN102094035B

公开(公告)日：2012-12-26

申请号：CN201010565730.8

申请日：2010-11-30

申请人： 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所

发明人： 童贻刚 ,  安小平 ,  米志强 ,  潘博 ,  王晓娜 ,  张宝中

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N7/01 ,  C07K16/18

摘要： 本发明公开了一种构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体。本发明提供的载体，按照如下方法制备：1)将轻链区域SacB的编码基因插入到pDF的多克隆位点间，得到中间载体PSBX；2)将步骤1)得到的中间载体PSBX的BssHII酶切位点突变为BglII酶切位点，得到中间载体PSGX；3)将重链区域SacB的编码基因插入到步骤2)得到的中间载体PSGX的Nhe I和Nco I酶切位点间，得到载体pDF-D-SacB。本发明的实验证明，所获得的含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB适用于构建大容量噬菌体抗体库。

公开(公告)号：CN102094035A

公开(公告)日：2011-06-15

申请号：CN201010565730.8

申请日：2010-11-30

申请人： 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所

发明人： 童贻刚 ,  安小平 ,  米志强 ,  潘博 ,  王晓娜 ,  张宝中

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N7/01 ,  C07K16/18

摘要： 本发明公开了一种构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体。本发明提供的载体，按照如下方法制备：1)将轻链区域SacB的编码基因插入到pDF的多克隆位点间，得到中间载体PSBX；2)将步骤1)得到的中间载体PSBX的BssHII酶切位点突变为BglII酶切位点，得到中间载体PSGX；3)将重链区域SacB的编码基因插入到步骤2)得到的中间载体PSGX的Nhe I和Nco I酶切位点间，得到载体pDF-D-SacB。本发明的实验证明，所获得的含自杀基因的噬菌粒载体pDF-D-SacB适用于构建大容量噬菌体抗体库。