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公开(公告)号：CN107022520B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201710317965.7
申请日：2017-05-08
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明涉及细胞的体外培养领域，具体是一种裸鼹鼠肺泡II型上皮细胞的分离培养方法，采用胰酶联合弹性蛋白酶消化分离，经过滤、差速贴壁、IgG抗体筛选纯化获得裸鼹鼠肺泡II型上皮细胞。本发明建立了一套分离、培养及鉴定裸鼹鼠肺泡II型上皮细胞的方法，并对用该方法培养的细胞的生物学特性维持情况进行了评估，证实该培养方法能够获得纯度很高的裸鼹鼠肺泡II型上皮细胞，从而为进一步深入研究肺泡II型上皮细胞的增殖、分化、液体转运、合成分泌及其在肺损伤、修复等病理生理情况下的功能变化提供了可能。
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公开(公告)号：CN107142242A
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201710318385.X
申请日：2017-05-08
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
IPC分类号： C12N5/077
CPC分类号： C12N5/0658 , C12N2501/998 , C12N2509/00
摘要： 本发明涉及细胞的体外培养领域，具体是一种裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞的分离培养方法，采用胰酶联合胶原酶及中性蛋白酶消化分离，经过滤、差速贴壁获得裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞。本发明建立了一套分离、培养及鉴定裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞的方法，并对用该方法培养的细胞的生物学特性维持情况进行了评估，证实该培养方法能够获得可供科学研究的裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞，从而为进一步深入研究裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞在低氧的生理情况下的功能变化提供了可能。
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公开(公告)号：CN106857387A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710022680.0
申请日：2017-01-12
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
IPC分类号： A01K67/02
CPC分类号： A01K67/02
摘要： 本发明涉及动物繁殖技术领域，具体涉及一种裸鼹鼠合笼配对的方法。本发明提供了裸鼹鼠合笼配对的方法，从裸鼹鼠的行为表征判断两种鼠合笼后能否和平共处，作为下一步合笼成功的必备基础，同时提供了求偶的一系列基本行为标准，作为合笼成功的判断标准，为裸鼹鼠的封闭群繁育方法提供可靠的技术支撑。
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公开(公告)号：CN105256038A
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201510713237.9
申请日：2015-10-28
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
CPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q2600/158
摘要： 本发明涉及裸鼹鼠细胞因子IL-6基因检测技术，属于生物技术检测领域。提供了一种裸鼹鼠细胞因子IL-6基因PCR检测引物：正向引物：5’-ACGCTAGTCCTCCACGAT-3’，反向引物：5’-GGTTGTTTAACATTGCCTTT-3’。还提供了一种裸鼹鼠细胞因子IL-6基因的检测方法：提取裸鼹鼠巨噬细胞细胞的总mRNA，并反转录为cDNA作为检测样品，运用Real-time PCR方法进行检测，得出IL-6的表达水平，利用PCR检测技术定量和定性的检测IL-6基因表达，简单快捷，适合推广使用。
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公开(公告)号：CN106834208B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201611196712.0
申请日：2016-12-22
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
摘要： 本发明涉及免疫沉淀领域，具体是一种染色质免疫共沉淀中裸鼹鼠组织的超声破碎方法，所述超声破碎方法为首先向裸鼹鼠组织中加入体积比为1:1:1的胶原酶Ⅱ溶液、透明质酸酶溶液、DPBS缓冲液的混合溶液，37℃震荡消化组织，离心去除上清，然后进行下面的常规超声破碎步骤。使用该方法可以更好地获得片段大小合适的DNA‑蛋白质复合物，为后面整个ChIP实验的成功奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN106577470B
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201610910853.8
申请日：2016-10-19
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
摘要： 本发明涉及及动物繁殖技术领域，具体涉及一种提高裸鼹鼠繁殖率的方法。本发明通过对裸鼹鼠行为学观察、阴门状态观察、阴道涂片检测，准确判断裸鼹鼠是否处于发情期，并进一步选择同笼来源的雄性裸鼹鼠放入雌性裸鼹鼠饲养笼中1:1合笼，进行交配行为观察，从而达到鉴定其交配与否的目的。本发明的繁殖方法操作简单，发情、交配判断准确，裸鼹鼠妊娠成功率高。
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公开(公告)号：CN107034185A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710318412.3
申请日：2017-05-08
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
IPC分类号： C12N5/0775
CPC分类号： C12N5/0663 , C12N2501/73
摘要： 本发明涉及干细胞培养领域，具体是一种裸鼹鼠骨髓间充质干细胞的原代分离培养方法，包括以下步骤：1)冲洗裸鼹鼠骨髓；2)骨髓冲出物过细胞筛；3)破除红细胞；4)直接铺板。本发明建立了裸鼹鼠骨髓间充干细胞的分离培养方法，并对用该方法培养的细胞的生物学特性进行了评估，证实该培养方法能够获得纯度很高的有分化能力的裸鼹鼠骨髓间充质干细胞，从而为进一步深入研究裸鼹鼠干细胞特性以及探讨裸鼹鼠不易分离但可以由干细胞转化的体细胞的特征提供了可能性。
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公开(公告)号：CN105200132A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510612405.5
申请日：2015-09-23
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
CPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q2600/158
摘要： 本发明涉及裸鼹鼠VEGFA基因特异性检测引物及检测试剂盒，属于生物技术检测领域。本发明提供了裸鼹鼠VEGFA基因检测试剂盒，主要包含VEGFA基因Real-time PCR检测引物：正向引物：5’-TGCCCTTGGTGGGGTTTG-3’，反向引物：5’-CGAGACGCTGGTGGACATC-3’。还提供了检测裸鼹鼠VEGFA基因的方法：提取裸鼹鼠细胞的总mRNA，并反转录为cDNA作为检测样品，运用Real-time PCR方法进行检测，得出VEGFA的mRNA表达水平，利用Real-time PCR检测技术能特异性地定量和定性监测VEGFA基因mRNA表达水平的动态变化，简单快捷，适合推广使用。
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公开(公告)号：CN102864172B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201210391137.5
申请日：2012-10-15
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
IPC分类号： C12N15/867 , A01K67/027
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及基因共转染技术移植建立白血病小鼠模型及其制备方法。本发明提供了一种白血病小鼠模型的制备方法，包括以下步骤：一、进行K-ras突变体与AML1-ETO融合基因慢病毒载体构建与包装；二、骨髓细胞分离及病毒感染情况监测；三、感染细胞植入小鼠建立白血病动物模型；四、模型鉴定。本发明率先采用了尾静脉注射导入人工定点突变K-ras突变体与AML1-ETO融合基因共转染骨髓细胞的方式建立白血病小鼠模型的方法，本发明提供的白血病小鼠模型，成功率高，病理特征与临床白血病的发病状况相似性高，可以为白血病髓外浸润机制研究，白血病药物筛选，基因和分子靶向治疗提供新的动物模型。
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公开(公告)号：CN107142242B
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN201710318385.X
申请日：2017-05-08
申请人： 中国人民解放军第二军医大学
IPC分类号： C12N5/077
摘要： 本发明涉及细胞的体外培养领域，具体是一种裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞的分离培养方法，采用胰酶联合胶原酶及中性蛋白酶消化分离，经过滤、差速贴壁获得裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞。本发明建立了一套分离、培养及鉴定裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞的方法，并对用该方法培养的细胞的生物学特性维持情况进行了评估，证实该培养方法能够获得可供科学研究的裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞，从而为进一步深入研究裸鼹鼠骨骼肌成肌细胞在低氧的生理情况下的功能变化提供了可能。
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