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公开(公告)号：CN104131084A
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201410311877.2
申请日：2014-07-02
申请人： 中国农业大学
CPC分类号： C12Q1/6858 , C12Q2531/113 , C12Q2521/301 , C12Q2565/125
摘要： 本发明提供用于检测牛CWC15基因隐性致死突变的特异性引物，包括：上游引物5’-GGGACTGAGGATGAAGTTGC-3’和下游引物5’-GGTTGGGAATACGGAAAGGT-3’。本发明还提供利用所述引物或含有所述引物的试剂盒检测牛CWC15基因隐性致死突变的方法。本发明首次建立了基于PCR-RFLP技术的CWC15基因隐性致死突变的分子检测方法。与已报道的基于SNP单倍型的检测方法(VanRaden等，2011)相比，具有操作简单、成本低、结果可靠等优点。另外，本发明在进行引物设计时，巧妙利用了致死突变位点下游715bp处的另外一个相同的酶切位点，所设计的PCR引物能扩增包含这两个酶切位点的片段，且酶切后的条带能够通过琼脂糖凝胶电泳直接区分，避免了因酶切不完全或酶切反应失败而导致的假阳性，从而确保检测的准确性。
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公开(公告)号：CN104131084B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201410311877.2
申请日：2014-07-02
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明提供用于检测牛CWC15基因隐性致死突变的特异性引物，包括：上游引物5’-GGGACTGAGGATGAAGTTGC-3’和下游引物5’-GGTTGGGAATACGGAAAGGT-3’。本发明还提供利用所述引物或含有所述引物的试剂盒检测牛CWC15基因隐性致死突变的方法。本发明首次建立了基于PCR-RFLP技术的CWC15基因隐性致死突变的分子检测方法。与已报道的基于SNP单倍型的检测方法(VanRaden等，2011)相比，具有操作简单、成本低、结果可靠等优点。另外，本发明在进行引物设计时，巧妙利用了致死突变位点下游715bp处的另外一个相同的酶切位点，所设计的PCR引物能扩增包含这两个酶切位点的片段，且酶切后的条带能够通过琼脂糖凝胶电泳直接区分，避免了因酶切不完全或酶切反应失败而导致的假阳性，从而确保检测的准确性。
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公开(公告)号：CN104962556A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510338374.9
申请日：2015-06-17
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明涉及分子生物学，具体提供了一种用于检测牛GART突变基因型的引物对，所述引物对如SEQ ID No.1-2所示。本发明进一步提供了一种检测牛GART突变基因型的方法，包括PCR扩增、扩增产物酶切和电泳检测酶切产物，判断待测样本基因型。本发明所设计的引物除了能够扩增牛GART基因的目的突变位点外，所扩增片段内还包含另外2个相同的酶切位点，能够避免因酶切不完全或酶切反应失败而导致的假阳性，从而确保检测的准确性。
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