一株羊肠道病毒的分离鉴定方法及应用

    公开(公告)号:CN115975952A

    公开(公告)日:2023-04-18

    申请号:CN202211479502.8

    申请日:2022-11-24

    摘要: 本发明公开了一株羊肠道病毒的分离鉴定方法及应用,利用宏基因组测序技术,从我国某养殖场死亡湖羊组织中获取CEV全基因组序列,与GenBank数据库CEV基因组序列进行比对分析,并利用RNA转染BHK‑21细胞的方法分离病毒,使用RT‑PCR方法、基因测序和透射电镜技术进行毒株分离鉴定,病毒液灭活后制备成疫苗,免疫兔子制备CEV阳性血清;宏基因组学方法测得CEV的全基因组核苷酸序列长度为7446nt,其中5′UTR长为821nt,3′UTR长为109nt,ORF长为6516nt,与已公布的CEV序列的核苷酸同源性为75.1%‑86.5%,为G种肠道病毒,毒株命名为JSNT/1/2022株。本发明中利用RNA转染BHK‑21细胞的方法成功分离出CEV,且具有良好的免疫原性,这是首次将利用RNA转染细胞的方法分离出CEV,为CEV的基础研究和应用研究奠定了基础。