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公开(公告)号：CN103898046A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410073635.4
申请日：2014-02-28
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12N5/073
摘要： 本发明提供一种专用于牛体外受精胚胎的培养液，所述培养液中含NaCl109.0-110mM、KCl2.9-3.1mM、NaHCO326.0-26.5mM、MgCl2·6H2O0.5-1.0mM、KH2PO31.0-1.3mM、丙酮酸钠0.4mM、葡萄糖1.5mM、半乳糖酸钙5mM、10v/v%胎牛血清、L-谷氨酰胺1mM、2v/v%必需氨基酸、1v/v%非必须氨基酸和谷胱甘肽1-10mM。将牛体外受精胚胎置于上述培养液中进行体外培养，结果显示明显优于未添加GSH的对照组，提高了囊胚发育率及胚胎质量，降低体外生产胚胎的成本，为牛IVF技术应用于实践提供实验基础，可大大加速遗传育种进程。
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公开(公告)号：CN103898046B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201410073635.4
申请日：2014-02-28
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12N5/073
摘要： 本发明提供一种专用于牛体外受精胚胎的培养液，所述培养液中含NaCl109.0-110mM、KCl2.9-3.1mM、NaHCO326.0-26.5mM、MgCl2·6H2O0.5-1.0mM、KH2PO31.0-1.3mM、丙酮酸钠0.4mM、葡萄糖1.5mM、半乳糖酸钙5mM、10v/v%胎牛血清、L-谷氨酰胺1mM、2v/v%必需氨基酸、1v/v%非必须氨基酸和谷胱甘肽1-10mM。将牛体外受精胚胎置于上述培养液中进行体外培养，结果显示明显优于未添加GSH的对照组，提高了囊胚发育率及胚胎质量，降低体外生产胚胎的成本，为牛IVF技术应用于实践提供实验基础，可大大加速遗传育种进程。
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公开(公告)号：CN104198720A
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201410355901.2
申请日：2014-07-24
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/533
CPC分类号： G01N33/68 , G01N33/533
摘要： 本发明提供一种用于哺乳动物囊胚细胞凋亡检测的试剂盒，所述试剂盒包括含0.5％BSA的PBS液、含2％多聚甲醛的PBS液、含0.5％Triton X-100和0.05％Tween20的PBS液、含10％山羊血清和0.05％Tween20的PBS液、兔抗caspase-3一抗、带有Alexa Fluor594红色荧光素标记的山羊抗兔IgG二抗，以及含20μM H33342的PBS液。本发明主要基于免疫荧光技术，以细胞凋亡过程中的重要的半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)为靶点，采用针对caspase-3一抗和携带荧光素的二抗进行抗原抗体反应，对胚胎中的凋亡细胞进行荧光标记和计数；再用DNA染料着色所有细胞的细胞核，从而计算出囊胚细胞的凋亡率。本发明结合荧光显微镜，能对凋亡细胞进行准确定性和定量检测，灵敏度高、特异性强，操作简单，重复性好，效率高。
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公开(公告)号：CN104166001A
公开(公告)日：2014-11-26
申请号：CN201410356135.1
申请日：2014-07-24
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/573
CPC分类号： G01N33/6839 , G01N33/573
摘要： 本发明提供一种用于检测哺乳动物囊胚ICM/TE比值和细胞凋亡的试剂盒，所述试剂盒包括含0.5％BSA的PBS液、含2％多聚甲醛的PBS液、含0.5％Triton X-100和0.05％Tween20的PBS液、含10％山羊血清和0.05％Tween20的PBS液、鼠抗CDX2一抗、兔抗caspase-3一抗、带有异硫氰酸绿色荧光素标记的山羊抗小鼠IgG二抗、带有Alexa Fluor 594红色荧光素标记的山羊抗兔IgG二抗，以及含20μM H33342的PBS液。本发明基于免疫荧光技术，分别以滋养层细胞表面抗原CDX2及细胞凋亡过程中的重要的caspase-3为靶点，采用分别针对CDX2和caspase-3的一抗和分别携带荧光标记的二抗进行抗原抗体反应；再用DNA染料着色细胞内DNA，达到在同一个胚胎中同时进行囊胚ICM/TE比值和细胞凋亡检测的目的。本方法重复性好，效率高。
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