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公开(公告)号：CN107759674A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201710884887.9
申请日：2017-09-26
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号： C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/535 , G01N33/544 , G01N33/569
CPC分类号： C07K14/30 , G01N33/535 , G01N33/544 , G01N33/56933 , G01N2333/30
摘要： 本发明公开了一种牛支原体免疫相关性蛋白、含有该蛋白的检测试剂盒及其在牛支原体抗体检测中的用途。所述的牛支原体免疫相关性蛋白，命名为p28蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。敏感性实验证明，本发明的一种牛支原体血清抗体ELISA检测试剂盒(MbH试剂盒)其最低可以检测出为1：2560稀释倍数的阳性血清，特异性实验证明，该试剂盒的特异性为97.8％，与牛传染性胸膜肺炎(CBPP)阳性血清、口蹄疫(FMD)阳性血清、牛结核(MB)阳性血清、牛病毒性腹泻(BVDV)阳性血清、牛传染性鼻气管炎(IBRV)阳性血清不发生发生特异性反应，并且具有良好的稳定性以及较高的准确性。本发明的提出为牛支原体抗体的检测提供了一种新的技术手段。
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公开(公告)号：CN107759674B
公开(公告)日：2021-12-28
申请号：CN201710884887.9
申请日：2017-09-26
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号： C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/535 , G01N33/544 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种牛支原体免疫相关性蛋白、含有该蛋白的检测试剂盒及其在牛支原体抗体检测中的用途。所述的牛支原体免疫相关性蛋白，命名为p28蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。敏感性实验证明，本发明的一种牛支原体血清抗体ELISA检测试剂盒(MbH试剂盒)其最低可以检测出为1：2560稀释倍数的阳性血清，特异性实验证明，该试剂盒的特异性为97.8％，与牛传染性胸膜肺炎(CBPP)阳性血清、口蹄疫(FMD)阳性血清、牛结核(MB)阳性血清、牛病毒性腹泻(BVDV)阳性血清、牛传染性鼻气管炎(IBRV)阳性血清不发生发生特异性反应，并且具有良好的稳定性以及较高的准确性。本发明的提出为牛支原体抗体的检测提供了一种新的技术手段。
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公开(公告)号：CN103436496A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310336959.8
申请日：2013-08-05
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/00 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种抗牛支原体的单克隆抗体、分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及应用。通过本发明的单克隆抗体与不同支原体菌株菌体蛋白进行反应，Western Blotting结果表明，本发明的单克隆抗体3G11只与牛支原体分离株发生特异性免疫反应，而不与丝状支原体丝状亚种SC型（MmmSC）、丝状支原体丝状亚种LC型（MmmLC）、山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp)、无乳支原体(M.agalactiae)、绵羊肺炎支原体(M.ovipneumoniase)反应，说明本发明的抗牛支原体单克隆抗体具有良好的特异性，可用于牛支原体感染的诊断和检测，从而也为该病的防控提供了一种有效的手段。
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公开(公告)号：CN101659954A
公开(公告)日：2010-03-03
申请号：CN200910160070.2
申请日：2009-07-22
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号： C12N15/31 , C12N15/63 , C12N7/01 , C07K14/30 , C12N15/70 , C12Q1/68 , G01N33/53 , A61K48/00 , A61K39/02 , A61P11/00 , A61P31/04 , C12Q1/70 , C12R1/35 , C12R1/19 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了表达猪肺炎支原体P102蛋白的重组腺病毒及其应用。本发明首先将猪肺炎支原体P102蛋白的基因进行突变，将突变后的全基因(SEQ ID NO：1)克隆到穿梭载体pShuttle-CMV上，得到重组穿梭载体；经线性化后电转化入内含腺病毒骨架载体的感受态细胞中，通过细菌内同源重组获得重组腺病毒。重组腺病毒经间接免疫荧光和Western Blot鉴定证明该重组腺病毒成功表达了P102蛋白。将本发明重组腺病毒以肌注和滴鼻两种途径免疫6～8周龄雌性Balb/c小鼠，重组病毒可诱发小鼠产生特异的体液免疫和胞免疫应答，表明本发明重组腺病毒可应用于猪支原体肺炎的诊断、预防或治疗。
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公开(公告)号：CN101565707A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910140494.2
申请日：2009-05-19
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了编码猪肺炎支原体P102蛋白的DNA及其制备方法和用途。本发明利用体外诱变技术将猪肺炎支原体表面蛋白P102基因的阅读框架C端500个核苷酸的其中1个UGA诱变为UGG，得到SEQ ID NO：1所示的序列；将诱变后的SEQ IDNO：1序列与表达载体连接后转化宿主细胞进行体外表达，重组表达的p102蛋白C端可以作为抗原用于血清学诊断，将所表达的蛋白质作为包被抗原用间接ELISA方法检测猪地方性支原体肺炎，结果表明该抗原具有非常好的特异性和敏感性，用该抗原建立的间接ELISA方法操作非常简单，容易推广应用，适合进行大规模血清学调查，特异性、敏感性均符合要求。
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公开(公告)号：CN118903475A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411400858.7
申请日：2024-10-09
摘要： 本发明公开了重组蛋白rMmm604在抗丝状支原体丝状亚种感染中的应用，本发明属于医药技术领域。本发明提出了一种新的抗丝状支原体丝状亚种感染的药物，该药物为重组蛋白rMmm604，研究显示，该重组蛋白rMmm604不会对EBL细胞产生细胞毒性，并且重组蛋白rMmm604孵育EBL细胞后，感染EBL的两种Mmm菌株（Ben1和Mu1）数量与对照组（标签蛋白rMBP孵育组）相比均明显减少。因此，本发明为牛传染性胸膜肺炎的治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN118161631B
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410561573.5
申请日：2024-05-08
摘要： 本发明公开了Ifi47的过表达质粒在抗丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp.mycoides，Mmm）感染中的应用。本发明分别构建了Ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型。TaqMan qPCR检测结果表明过表达Ifi47基因，Mmm黏附于EBL上的数量与对照组相比减少；而敲低细胞Ifi47基因后，Mmm黏附于EBL上的数量与对照组相比增加。通过IFA检测Ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型的绿色荧光值，结果表明过表达Ifi47基因，感染EBL的Mmm数量与对照组相比减少；而敲低细胞Ifi47基因后，感染EBL的Mmm数量与对照组相比增加。以上结果说明促进Ifi47表达后能够抑制Mmm的黏附和感染。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN118161631A
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202410561573.5
申请日：2024-05-08
摘要： 本发明公开了Ifi47的过表达质粒在抗丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp.mycoides，Mmm）感染中的应用。本发明分别构建了Ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型。TaqMan qPCR检测结果表明过表达Ifi47基因，Mmm黏附于EBL上的数量与对照组相比减少；而敲低细胞Ifi47基因后，Mmm黏附于EBL上的数量与对照组相比增加。通过IFA检测Ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型的绿色荧光值，结果表明过表达Ifi47基因，感染EBL的Mmm数量与对照组相比减少；而敲低细胞Ifi47基因后，感染EBL的Mmm数量与对照组相比增加。以上结果说明促进Ifi47表达后能够抑制Mmm的黏附和感染。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN101659954B
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN200910160070.2
申请日：2009-07-22
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号： C12N15/31 , C12N15/63 , C12N7/01 , C07K14/30 , C12N15/70 , C12Q1/68 , G01N33/53 , A61K48/00 , A61K39/02 , A61P11/00 , A61P31/04 , C12Q1/70 , C12R1/93 , C12R1/19 , C12R1/35
摘要： 本发明公开了表达猪肺炎支原体P102蛋白的重组腺病毒及其应用。本发明首先将猪肺炎支原体P102蛋白的基因进行突变，将突变后的全基因(SEQ ID NO：1)克隆到穿梭载体pShuttle-CMV上，得到重组穿梭载体；经线性化后电转化入内含腺病毒骨架载体的感受态细胞中，通过细菌内同源重组获得重组腺病毒。重组腺病毒经间接免疫荧光和Western Blot鉴定证明该重组腺病毒成功表达了P102蛋白。将本发明重组腺病毒以肌注和滴鼻两种途径免疫6～8周龄雌性Balb/c小鼠，重组病毒可诱发小鼠产生特异的体液免疫和胞免疫应答，表明本发明重组腺病毒可应用于猪支原体肺炎的诊断、预防或治疗。
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公开(公告)号：CN109970844A
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201910194597.0
申请日：2019-03-14
IPC分类号： C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种丝状支原体丝状亚种P35脂蛋白及其在诊断牛传染性胸膜肺炎中的应用。本发明通过筛选获得了一个免疫原性良好的Mmm脂蛋白，命名为P35，实验证明，rP35蛋白能够与CBPP阳性血清发生反应且与牛源性其他3种常见支原体感染样品血清不发生交叉反应，具有良好的特异性。此外，本发明还提出了一种用于诊断牛传染性胸膜肺炎的试剂盒，并建立了基于该试剂盒的ELISA检测方法，并对反应进行条件优化，确定了其cut off值。经过ELISA实验证明，本发明建立的ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性以及重复性，能够用于牛传染性胸膜肺炎高效、快速的诊断。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的诊断提供了新的技术手段。
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