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公开(公告)号：CN102973952B
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201210495383.5
申请日：2012-11-28
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病病毒多聚蛋白基因VP243的DNA疫苗及其构建方法和应用。本发明将传染性法氏囊病病毒强毒株(HLJ0504)的多聚蛋白基因(VP243)进行鸡偏嗜密码子优化，并克隆入真核表达载体pCAGGS，构建了重组表达质粒pCAGoptiVP243。将制备的pCAGoptiVP243以100μg的剂量经腿肌两点注射首免14日龄SPF鸡，28日龄以相同剂量和途径二免，二免后14天攻击IBDV强毒HLJ0504株。结果表明，该DNA疫苗可以诱导较高水平的抗体并能提供对强毒的免疫保护。
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公开(公告)号：CN102973952A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210495383.5
申请日：2012-11-28
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病病毒多聚蛋白基因VP243的DNA疫苗及其构建方法和应用。本发明将传染性法氏囊病病毒强毒株(HLJ0504)的多聚蛋白基因(VP243)进行鸡偏嗜密码子优化，并克隆入真核表达载体pCAGGS，构建了重组表达质粒pCAGoptiVP243。将制备的pCAGoptiVP243以100μg的剂量经腿肌两点注射首免14日龄SPF鸡，28日龄以相同剂量和途径二免，二免后14天攻击IBDV强毒HLJ0504株。结果表明，该DNA疫苗可以诱导较高水平的抗体并能提供对强毒的免疫保护。
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公开(公告)号：CN102321547A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110245478.7
申请日：2011-08-25
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种表达禽网状内皮组织增生病病毒Gp90蛋白的重组酵母工程菌株、其构建方法及应用。本发明的重组酵母工程菌株，其菌种保藏编号为：CGMCC 5046。对工程菌进行大规模诱导，Gp90蛋白表达量达到373mg/L的水平。经SDS-PAGE及Western blot检测证明表达的重组蛋白具有禽网状内皮组织增生病病毒天然蛋白的生物学活性和抗原性。将重组蛋白制成重组抗原疫苗，免疫SPF鸡，实验结果表明：该重组抗原疫苗能有效诱导机体产生特异性的体液免疫应答，使免疫鸡获得抗REV攻击的保护，并可有效阻止病毒在体内的增殖。
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公开(公告)号：CN102311928A
公开(公告)日：2012-01-11
申请号：CN201110245396.2
申请日：2011-08-25
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种共表达鸡贫血病毒VP1、VP2蛋白的重组酵母工程菌、其构建方法及应用。本发明的重组酵母工程菌株，其菌种保藏编号为：CGMCC No.5045。对工程菌进行大规模诱导，VP1表达量达到12g/L的水平。经SDS-PAGE及Western-blot检测证明表达的重组蛋白具有鸡贫血病毒天然蛋白的生物学活性和抗原性。将重组蛋白制成重组抗原疫苗，免疫SPF鸡，实验结果表明：该鸡传染性贫血重组抗原疫苗能有效诱导机体产生特异性的体液免疫应答，使免疫鸡获得抗CAV攻击的保护，并可有效阻止病毒在体内的增殖。
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公开(公告)号：CN101935637A
公开(公告)日：2011-01-05
申请号：CN201010215328.7
申请日：2010-06-29
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用。本发明克隆了流行超强毒株HLJ-0504的主要保护性抗原基因VP2，将其核苷酸进行突变修饰，然后将其替换IBDV弱毒株Gt基因组的相应区段，构建IBDV重组基因组的感染性克隆，利用IBDV反向遗传操作系统，拯救并鉴定了重组弱毒疫苗株，其微生物保藏号是：CGMCC No.3749；本发明重组弱毒疫苗株具有良好的复制性、遗传稳定性和安全性。在免疫效果上，本发明弱毒疫苗株和中等毒力疫苗相当，优于弱毒疫苗株。在生物安全性上，优于中等毒力疫苗。本发明重组弱毒疫苗株具备作为疫苗株的高效、低毒的特点，是良好的疫苗候选毒株，可用于鸡传染性法氏囊病的防控。
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公开(公告)号：CN102533673B
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201210014019.2
申请日：2012-01-17
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病超强毒的细胞适应株及其在制备预防鸡传染性法氏囊病药物中的应用。本发明的细胞适应株为鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株的细胞适应株，命名为IBDV-G株，其菌种保藏编号为：CGMCC 5553。将本发明的IBDV-G株灭活后制备成疫苗用于动物的免疫，结果证明：本发明的疫苗安全，且对超强度IBDV-G的致死性攻击，具有100％的保护率，本发明的超强毒灭活苗抗体阳性率、抗体滴度及对超强毒的保护率，在参与比较的疫苗中，均居于首位。因此，本发明的推广应用将有效地预防了我国局部地区vvIBD的暴发和流行，有利地促进了免疫地区乃至我国养禽业的持续、稳定、健康地发展。
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公开(公告)号：CN103103289A
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201310014424.9
申请日：2013-01-15
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种用于禽肺病毒C亚群特异性检测的荧光定量RT-PCR检测试剂盒，其特征在于包括特异性扩增禽肺病毒C亚群G基因的特异性引物对和探针，其中所述的引物对中两条引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、2所示，所述的探针序列如SEQ ID NO.3所示。使用本发明的试剂盒能够实现对禽肺病毒C亚群病毒的检测，本发明的试剂盒在1×103～1×109个拷贝·μL-1范围内具有良好的线性关系，灵敏度达到102个拷贝·μL-1，是普通RT-PCR方法的100倍，且与其他禽病病毒无交叉反应。结果表明，本发明的试剂盒具有良好的敏感性和特异性，可用于禽肺病毒C亚群的定量检测。
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公开(公告)号：CN101988131A
公开(公告)日：2011-03-23
申请号：CN201010528610.0
申请日：2010-11-01
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了检测A亚群禽白血病病毒(ALV-A)的环介导等温扩增反应引物，所述引物由一对外引物、一对内引物和一对环引物所组成，其中，所述外引物由SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2组成；所述内引物由SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4组成；所述环引物由SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6组成。在所设计LAMP引物的基础上，本发明成功建立了A亚群禽白血病病毒的分型LAMP检测方法，该方法能够成功将A亚群病毒与J亚群、B亚群、C亚群、E亚群病毒相区分，而且不与其它常见的禽类传染病发生非特异性反应。本发明所建立ALV-A LAMP检测方法准确性高、灵敏度高、特异性强。
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公开(公告)号：CN103103290B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310014454.X
申请日：2013-01-15
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种用于禽肺病毒A亚群特异性检测的荧光定量RT-PCR试剂盒，其特征在于包括特异性扩增禽肺病毒A亚群G基因的特异性引物对和探针，其中所述的引物对中两条引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、2所示，所述的探针序列如SEQ ID NO.3所示。使用本发明的试剂盒能够实现对禽肺病毒A亚群病毒的检测，本发明的试剂盒在1×103～1×109个拷贝·μL-1范围内具有良好的线性关系，灵敏度达到102个拷贝·μL-1，是普通RT-PCR方法的100倍，且与其他禽病病毒无交叉反应。结果表明，本发明的试剂盒具有良好的敏感性和特异性，可用于禽肺病毒A亚群的定量检测。
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公开(公告)号：CN102988969B
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201210495385.4
申请日：2012-11-28
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种表达禽网状内皮组织增生病病毒gp90基因的DNA疫苗及其构建方法和应用。本发明将REV gp90基因根据鸡偏嗜密码子进行密码子优化，基因两端设计两个酶切位点，克隆入pUC19载体中，得到pUC19-optigp90重组质粒，将其进行双酶切，将获得的optigp90基因亚克隆至pCAGGS表达载体中，构建了pCAGoptigp90重组表达质粒，将该重组质粒免疫SPF鸡，实验结果表明：该DNA疫苗可以诱导SPF鸡产生REV抗体，抗体阳转率为83%，免疫保护率为75%。本发明DNA疫苗既有亚单位疫苗和灭活疫苗的安全性，又具有弱毒疫苗或重组疫苗同时诱导体液免疫和细胞免疫应答的特点。
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