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公开(公告)号:CN117843773B
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202410059115.1
申请日:2024-01-15
发明人: 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
摘要: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成,其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此,该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值,可以在大流行早期进行被动免疫保护,以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时,本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位,为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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公开(公告)号:CN118443931A
公开(公告)日:2024-08-06
申请号:CN202410535423.7
申请日:2024-04-29
IPC分类号: G01N33/559 , G01N33/569
摘要: 本发明公开了一种用于检测非洲马瘟的胶体金免疫层析抗体检测试纸条及其应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸,还包括位于下方的PVC底板,其中PVC底板的作用是提供组装平台,硝酸纤维素膜上具有马IgG抗体喷涂的质控线,以及非洲马瘟病毒重组VP7蛋白喷涂的检测线,胶体金垫上涂覆有非洲马瘟病毒重组VP7蛋白标记的胶体金颗粒,样品垫提供了待测样品加入的位置。实验结果显示,该试纸条的诊断敏感性和诊断特异性均为100%,最低检测限度为1:1024。与商品化试剂盒检测结果符合率为100%。本发明的胶体金免疫层析抗体检测试纸条在37℃加速实验中可稳定保存15天。本发明的提出为非洲马瘟的检测提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN116338193A
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202210879227.2
申请日:2022-07-25
IPC分类号: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
摘要: 本发明公开了一种基于抗体捕获的非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体包被的酶标板,其中所述的特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9分泌产生,所述的杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9的保藏编号为CGMCC No.45157。本发明基于抗体捕获提出了一种非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒,本发明的酶标板上首先包被一种可以识别抗原的单克隆抗体,利用单克隆抗体特异性地捕获抗原,再加入血清及酶标二抗。通过单克隆抗体捕获抗原,减少非目标抗原(如大肠杆菌)与ELISA酶标板的吸附作用,从而提高方法的特异性。该方法相比普通间接ELISA的2次级联放大作用变为三次级联放大,即保留了间接ELISA方法的敏感性,又提高了特异性。
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公开(公告)号:CN115128268A
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN202210404918.7
申请日:2022-04-18
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/543
摘要: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白OmpA包被的酶标板,所述的截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明利用Pull down技术成功筛选到了马流产沙门氏菌病4种病原的共同优势抗原,并将其克隆到表达载体通过截短分段表达实现了对该OmpA蛋白的可溶性表达,同时建立了马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒以及相应的iELISA抗体诊断方法,实验证明,使用该试剂盒建立的方法具有特异性强、敏感性高的优点,将成为马流产沙门菌病抗体检测的一种有效工具,也为未来疫苗研发的抗体监测奠定了方法学基础。
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公开(公告)号:CN111088379A
公开(公告)日:2020-05-01
申请号:CN202010046938.2
申请日:2020-01-16
摘要: 本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌的特异性引物组及其用途。所述的引物组由上游引物以及下游引物组成,其中所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。特异性实验结果表明该引物组只与马流产沙门氏菌反应,而与其他马、驴常见传染病病原均无交叉反应,具有良好的特异性。灵敏度实验表明,该引物组检测马流产沙门氏菌的最低限度为4.7×103CFU/ml,具有良好的敏感性。本发明的提出为马流产沙门氏菌的检测或诊断提供了一种有效技术手段,通过本发明的方法,使马流产沙门氏菌的检出率极大提高,诊断更精确,对于马流产沙门氏菌病的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN112011479B
公开(公告)日:2022-04-22
申请号:CN202010780801.X
申请日:2020-08-06
摘要: 本发明公开了驴源马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株及其在制备马链球菌马亚种灭活疫苗中的应用,属于生物疫苗领域。本发明的驴源马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株具有免疫原性好、培养特性好等优点,将本发明的马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株接种于链球菌增菌液,培养后,用甲醛(终浓度0.2%v/v)灭活后,制备成灭活疫苗。实验证明,使用本发明制备得到的马链球菌马亚种灭活疫苗免疫小鼠后,能够使小鼠免于强毒马链球菌马亚种的攻击,在驴体试验上大大降低发病率,此疫苗具有安全、低剂量免疫等优点,是首个驴用马链球菌马亚种灭活疫苗,可以作为一种预防由马链球菌马亚种引起的腺疫。
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公开(公告)号:CN114231496A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111444112.2
申请日:2021-11-30
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
摘要: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌竞争ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由保藏编号为CGMCCNo.21990的杂交瘤细胞株分泌产生的抗马流产沙门氏菌FljB蛋白的单克隆抗体。此外,本发明还建立了马流产沙门氏菌竞争ELISA抗体检测方法,与TAT方法相比,本发明建立的竞争ELISA方法的敏感性更高:对标准阳性血清能检测到的最大稀释度为32倍稀释,TAT检测最大稀释度为原倍。竞争ELISA方法的特异性更好:与常见的马传贫、马流感、马鼻肺炎、马动脉炎等病毒病以及马腺疫、鼠伤寒沙门氏菌感染、都柏林沙门氏菌感染等细菌病的血清抗体均不反应,仅与马流产沙门氏菌特异性抗体反应。因此,本发明的提出为马流产沙门氏菌抗体的检测提供了一种新的技术手段。
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公开(公告)号:CN109652594A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201910021149.0
申请日:2019-01-09
摘要: 本发明公开了一种用于检测水貂阿留申病毒(AMDV)的荧光定量PCR试剂盒及其用途。所述的试剂盒中含有荧光定量PCR反应试剂以及引物,其中,所述的荧光定量PCR反应试剂中含有EvaGreen染料,所述的引物由上游引物和下游引物组成,上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。实验证明使用本发明的试剂盒检测AMDV,特异性高,重复性好,DNA检测限量为1拷贝/μL或者3pg/μL,并且可以识别来自国内外全部的AMDV感染品。在对45份临床血液样品的检测应用中发现,本发明EG PCR方法的AMDV检出率为91.11%,高于现有的TaqMan方法以及常规PCR方法的AMDV检出率。因此,本发明的提出为水貂阿留申病毒(AMDV)的检测提供了一种快速、灵敏的病原学检测方法。
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公开(公告)号:CN114231496B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202111444112.2
申请日:2021-11-30
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
摘要: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌竞争ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有由保藏编号为CGMCCNo.21990的杂交瘤细胞株分泌产生的抗马流产沙门氏菌FljB蛋白的单克隆抗体。此外,本发明还建立了马流产沙门氏菌竞争ELISA抗体检测方法,与TAT方法相比,本发明建立的竞争ELISA方法的敏感性更高:对标准阳性血清能检测到的最大稀释度为32倍稀释,TAT检测最大稀释度为原倍。竞争ELISA方法的特异性更好:与常见的马传贫、马流感、马鼻肺炎、马动脉炎等病毒病以及马腺疫、鼠伤寒沙门氏菌感染、都柏林沙门氏菌感染等细菌病的血清抗体均不反应,仅与马流产沙门氏菌特异性抗体反应。因此,本发明的提出为马流产沙门氏菌抗体的检测提供了一种新的技术手段。
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公开(公告)号:CN113444694A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110691982.3
申请日:2021-06-22
摘要: 本发明公开了一种马链球菌马亚种噬菌体SP2019‑LX株及其在制备腺疫治疗性药物中的应用,属于生物医药技术领域。所述的马链球菌马亚种噬菌体命名为SP2019‑LX,其菌种保藏编号为:CGMCC No.19292。该噬菌体SP2019‑LX株具有安全稳定、容易培养等优点,将噬菌体SP2019‑LX株接种于对数生长期的马链球菌马亚种指示菌菌液中,培养至菌液澄清后,利用双层琼脂平板法,计算噬菌体浓度,制备成治疗性药物用于马以及驴腺疫的治疗,实验证明,该药物能够明显改善疾病症状,缩短治疗腺疫的周期,减少抗生素的使用,降低治疗的费用。同时,本发明还具有安全、易于制备等优点,是首例马链球菌马亚种噬菌体的治疗性药物,本发明的提出为马属动物腺疫的防控和治疗提供了一种非常有效的技术手段。
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