公开(公告)号：CN112592899A

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN202011163297.5

申请日：2020-10-27

Applicant: 中国农业科学院烟草研究所 ,  云南省烟草农业科学研究院 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草公司昆明市公司 ,  云南省烟草公司玉溪市公司

Inventor： 杨金广 ,  余艳璧 ,  王凤龙 ,  夏振远 ,  黄坤 ,  李莹 ,  申莉莉 ,  刘春明 ,  蔺忠龙 ,  谢永辉 ,  张立猛 ,  杨海林 ,  王志江

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/558 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明提出了一种杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株可分泌番茄斑萎病毒的单克隆抗体，该单克隆抗体用于制备免疫金标速测卡，其方法如下，步骤1、对番茄斑萎病毒重组蛋白进行纯化，步骤2、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫兔，获得多克隆抗体，步骤3、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫小鼠，然后通过细胞融合、克隆化筛选制备得到该单克隆抗体，最后制备小鼠腹水，经过纯化得到鼠抗番茄斑萎病毒单克隆抗体，步骤4、通过配对筛选，得到配对的单克隆抗体和多克隆抗体用于所述免疫金标速测卡，借此，本发明具有可将该免疫金标速测卡应用于番茄斑萎病毒进行快速、现场和灵敏的检测的优点。

公开(公告)号：CN114058737A

公开(公告)日：2022-02-18

申请号：CN202111231803.4

申请日：2021-10-22

Applicant: 中国农业科学院烟草研究所 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草农业科学研究院

Inventor： 杨金广 ,  张万红 ,  蔺忠龙 ,  焦玉冰 ,  李莹 ,  申莉莉 ,  王凤龙 ,  刘春明 ,  夏振远

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6804 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种用于检测植物番茄斑萎病毒的crDNA、crRNA、试剂盒和方法，所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述试剂盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas13a蛋白和荧光探针。所述方法包括：提取待测的植物样品总RNA，后通过逆转录获得cDNA；以所述cDNA为模板扩增获得DNA扩增产物；将所述的扩增产物、crRNA、Cas13a蛋白和荧光探针和无酶水构成的检测反应体系进行检测。本发明具有成本低、可多次重复检测、方法简单、检测速度快、灵敏(最低检测极限达到10拷贝/uL)、特异形的特点。

公开(公告)号：CN114395021A

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN202210014637.0

申请日：2022-01-07

Applicant: 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) ,  四川省烟草公司凉山州公司 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草公司保山市公司

Inventor： 杨金广 ,  宋丽云 ,  李莹 ,  刘东阳 ,  王勇 ,  刘春明 ,  郭应成 ,  焦裕冰 ,  申莉莉 ,  王凤龙 ,  江连强

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供了一种类乳胶蛋白43及其在抑制植物病毒侵染中的应用，所述类乳胶蛋白43的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本申请筛选得到了抗植物病毒的类乳胶蛋白NbMLP43，通过CRISPR技术敲除了NbMLP43，获得了本氏烟mlp43突变体，从RNA、蛋白和PVY‑GFP荧光强度三个方面共同说明了，突变NbMLP43上调了本氏烟对PVY的敏感性、促进病毒的侵染。同时利用构建的过表达载体转化本氏烟，获得了稳定过表达NbMLP43的纯合转基因植株，也证明了过表达NbMLP43抑制了PVY的侵染。这均说明NbMLP43作为一种新的潜在抗病基因，可以抵抗病毒的侵染。

公开(公告)号：CN112501242A

公开(公告)日：2021-03-16

申请号：CN202011461299.2

申请日：2020-12-08

Applicant: 云南省烟草农业科学研究院

Inventor： 卢灿华 ,  晋艳 ,  盖晓彤 ,  米梦鸽 ,  马俊红 ,  姜宁 ,  高朝阳 ,  莫献化 ,  刘春明 ,  雷丽萍 ,  夏振远

IPC: C12Q1/18

Abstract: 本发明公开了一种苗期烟草青枯病生防菌的筛选方法，包括烟苗培育、生测初筛和复筛及温室盆栽等步骤。本发明采用漂浮育苗方式培育烟草青枯病感病烟苗，将烟苗分为试验组和对照组，分别对试验组和对照组接种候选生防菌和LB液体培养基，1～2d后挑战接种烟草青枯菌，将育苗盘置于28～30℃恒温温室培育，调查筛选具有控病能力的生防菌；再次用烟苗生测法验证防效，复筛时每个处理组和对照组的烟苗为6～16株，筛选具有明显控病能力的生防菌；最后在温室大棚内进行盆栽试验，评价生防菌对烟草青枯病的防治效果。运用该方法已获得多株非拮抗作用的烟草青枯病生防菌。

公开(公告)号：CN118185783A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202311603908.7

申请日：2023-11-28

Applicant: 云南省烟草农业科学研究院

Inventor： 卢灿华 ,  夏振远 ,  晋艳 ,  马俊红 ,  盖晓彤 ,  姜宁 ,  胡加云 ,  王继明 ,  王朝富 ,  李军营 ,  刘春明 ,  徐天养 ,  殷红慧 ,  何元胜

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/20 ,  A01P1/00 ,  A01P21/00 ,  A01G7/06 ,  A01G13/00 ,  A01C21/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本申请公开了一种产脲节杆菌菌株05‑507、生防菌剂及其应用，该产脲节杆菌(Paenarthrobacter ureafaciens)菌株05‑507的保藏编号：CCTCC NO:M 20211381；该菌株用于促进烟苗生长和/或防治青枯病。菌株05‑507对罗尔斯通氏菌生长无抑制能力，说明菌株05‑507发挥控病作用不以产生抗生素为主。促生长实验表明菌株05‑507具有促烟株生长的效果，主要通过促进烟株生长，增强烟株长势以达到对青枯病的防治效果，因此在田间施用菌株05‑507防治烟草青枯病时，不会产生罗尔斯通氏菌对菌株05‑507或菌株代谢产物的耐受性，说明施用含该菌株05‑507的生物菌剂具有较好的安全性。

公开(公告)号：CN113913390A

公开(公告)日：2022-01-11

申请号：CN202111399298.4

申请日：2021-11-19

Applicant: 云南省烟草农业科学研究院

Inventor： 姜宁 ,  夏振远 ,  盖晓彤 ,  黄昌军 ,  卢灿华 ,  马俊红 ,  莫笑晗 ,  吴蔚 ,  刘春明 ,  侯秋强 ,  郭建

IPC: C12N5/20 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C07K16/10 ,  C07K14/08 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/558 ,  G01N33/543 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种番茄环纹斑点病毒检测试剂。将经过优化的编码TZSV病毒N蛋白的基因表达纯化得到TZSV病毒N蛋白，获得2株特异性的杂交瘤细胞株，从中分别可以得到特异性的抗TZSV病毒单克隆抗体。用该单克隆抗体制备了检测番茄环纹斑点病毒的试纸。实验证实，本发明的检测试纸条对TZSV具有特异性，可实现对叶片等样品中TZSV病毒的+快速检测，且灵敏度高，操作方便。

公开(公告)号：CN113913390B

公开(公告)日：2023-02-28

申请号：CN202111399298.4

申请日：2021-11-19

Applicant: 云南省烟草农业科学研究院

Inventor： 姜宁 ,  夏振远 ,  盖晓彤 ,  黄昌军 ,  卢灿华 ,  马俊红 ,  莫笑晗 ,  吴蔚 ,  刘春明 ,  侯秋强 ,  郭建

IPC: C12N5/20 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C07K16/10 ,  C07K14/08 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/558 ,  G01N33/543 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种番茄环纹斑点病毒检测试剂。将经过优化的编码TZSV病毒N蛋白的基因表达纯化得到TZSV病毒N蛋白，获得2株特异性的杂交瘤细胞株，从中分别可以得到特异性的抗TZSV病毒单克隆抗体。用该单克隆抗体制备了检测番茄环纹斑点病毒的试纸。实验证实，本发明的检测试纸条对TZSV具有特异性，可实现对叶片等样品中TZSV病毒的+快速检测，且灵敏度高，操作方便。

公开(公告)号：CN107372372B

公开(公告)日：2020-09-08

申请号：CN201710808202.2

申请日：2017-09-08

Applicant: 云南省烟草公司红河州公司 ,  西南林业大学 ,  昆明润彩农业科技开发有限公司

Inventor： 梁兵 ,  吴伟 ,  余砚碧 ,  刘春明 ,  黄坤 ,  李宏光 ,  普恩平 ,  陆庆华 ,  邵小东 ,  冀新威 ,  付亚丽 ,  王超 ,  陈华祥 ,  吴道琴 ,  王金

IPC: A01K67/033 ,  A01G22/45

Abstract: 本发明公开一种再生烟株繁殖烟蚜及烟蚜茧蜂的方法，所述方法操作如下：当初次繁蚜、繁蜂结束或大田烟叶采收结束后，将无病虫害烟株距地面20～25㎝以上的茎杆砍去，并进行松土、培土和施肥，任烟株再次生长，长出的新芽中保留一个健壮侧芽继续培育，清除其余侧芽；当再生烟株长出7‑9片叶时，在中下部烟叶上接蚜，接蚜后加盖防虫网，繁蚜后接蜂。本发明无需育苗、移栽，不用建设或占用大棚等基础设施，可以直接将烤烟繁蜂所用的种蚜或种蜂烟株培育成再生烟株再次扩繁种蚜和种蜂。同时本发明也可直接在田间进行再生烟株繁蜂，繁蜂后掀开罩网，任成蜂自由扩散，增加田间蚜茧蜂数量，增强对田间蚜虫的控制作用。

公开(公告)号：CN107296015A

公开(公告)日：2017-10-27

申请号：CN201710731670.4

申请日：2017-08-23

Applicant: 云南省烟草公司红河州公司 ,  西南林业大学 ,  昆明润彩农业科技开发有限公司

Inventor： 李宏光 ,  梁兵 ,  吴伟 ,  余砚碧 ,  刘春明 ,  黄坤 ,  邵小东 ,  冀新威 ,  付亚丽 ,  王超 ,  陈华祥 ,  吴道琴 ,  王金 ,  钟晓田 ,  肖俊华

IPC: A01K67/033 ,  A01M3/00

Abstract: 本发明公开了一种烟蚜茧蜂产品工厂化生产方法，包括以下步骤：步骤(1)种蚜、种蜂自然保育与复壮后进行纯化；步骤(2)采用大孔径育苗穴盘培育大苗扩繁种蚜、种蜂；步骤(3)以小孔漂盘培育高密度烟苗，增加单位面积的育苗数量，以大孔专用繁蜂漂盘培育壮烟繁蜂，当平均蚜量达到一定量时接入高比例的种蜂；步骤(4)烟蚜茧蜂收集与包装。本发明解决了高密度繁蜂的疫病问题，基础设施不足问题及以往的僵蚜形成整齐度和收集、储存、长途运输问题。同时将以往对各繁蜂放蜂环节极不灵活的时间限制打破，形成了系统的烟蚜茧蜂工厂化生产技术，得到工厂化所要求的可大批量生产、质量稳定、较长时间储存、便于长途运输的僵蚜产品。

公开(公告)号：CN106719536A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611069764.1

申请日：2016-11-29

Applicant: 云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所

Inventor： 刘春明 ,  董家红 ,  李宏光 ,  陈永对 ,  肖俊华 ,  吴阔 ,  梁兵 ,  阙劲松 ,  黄坤 ,  李兴勇 ,  张朋 ,  范文彪 ,  杨晓琳

IPC: A01M5/02

Abstract: 本发明公开了一种高效、准确调查田间蓟马种群密度的捕虫方法，随机选田间区域内5个调查点，每个调查点选取3~5种蓟马寄主植物，每种蓟马寄主植物选20~30株喷洒蓟马麻醉药剂，喷洒时间为晴天的11~13点，药剂喷洒完毕后0.5~1.5小时再进行捕虫，然后分别统计该田间区域内每种植物上蓟马数量的总和，作为该田间区域内的蓟马种群密度。本发明的方法能够准确调查田间蓟马的真实情况，并且具有操作简单的优点。