公开(公告)号：CN112592899A

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN202011163297.5

申请日：2020-10-27

申请人： 中国农业科学院烟草研究所 ,  云南省烟草农业科学研究院 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草公司昆明市公司 ,  云南省烟草公司玉溪市公司

发明人： 杨金广 ,  余艳璧 ,  王凤龙 ,  夏振远 ,  黄坤 ,  李莹 ,  申莉莉 ,  刘春明 ,  蔺忠龙 ,  谢永辉 ,  张立猛 ,  杨海林 ,  王志江

IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/558 ,  G01N33/58

摘要： 本发明提出了一种杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株可分泌番茄斑萎病毒的单克隆抗体，该单克隆抗体用于制备免疫金标速测卡，其方法如下，步骤1、对番茄斑萎病毒重组蛋白进行纯化，步骤2、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫兔，获得多克隆抗体，步骤3、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫小鼠，然后通过细胞融合、克隆化筛选制备得到该单克隆抗体，最后制备小鼠腹水，经过纯化得到鼠抗番茄斑萎病毒单克隆抗体，步骤4、通过配对筛选，得到配对的单克隆抗体和多克隆抗体用于所述免疫金标速测卡，借此，本发明具有可将该免疫金标速测卡应用于番茄斑萎病毒进行快速、现场和灵敏的检测的优点。

公开(公告)号：CN113430233A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202011513436.2

申请日：2020-12-18

申请人： 中国农业科学院烟草研究所 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草农业科学研究院

发明人： 杨金广 ,  袁莲莲 ,  宋丽云 ,  焦玉冰 ,  李莹 ,  申莉莉 ,  王凤龙 ,  黄坤 ,  夏振远

IPC分类号： C12P3/00 ,  A01N63/27 ,  A01N59/02 ,  A01P1/00 ,  A01P21/00 ,  C12R1/39

摘要： 本发明公开了一种荧光假单胞杆菌的纳米硒合成活性菌液、其制备方法及其应用，属于微生物及微生物制剂技术领域。本发明的荧光假单胞杆菌的纳米硒合成活性菌液；是由荧光假单胞杆菌进行生物发酵合成纳米硒后，由荧光假单胞杆菌及其合成的纳米硒组成的混合液；所述荧光假单胞杆菌为荧光假单胞杆菌KBD‑1；该菌株于2020年08月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.20567。本发明荧光假单胞杆菌的纳米硒合成活性菌液对作物病毒病具有较好的防治效果，为作物病毒病的防治提供新的微生物资源；此外，还对作物具有促生效果，且效果显著。

公开(公告)号：CN113430233B

公开(公告)日：2023-01-24

申请号：CN202011513436.2

申请日：2020-12-18

申请人： 中国农业科学院烟草研究所 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草农业科学研究院

发明人： 杨金广 ,  袁莲莲 ,  宋丽云 ,  焦玉冰 ,  李莹 ,  申莉莉 ,  王凤龙 ,  黄坤 ,  夏振远

IPC分类号： C12P3/00 ,  A01N63/27 ,  A01N59/02 ,  A01P1/00 ,  A01P21/00 ,  C12R1/39

摘要： 本发明公开了一种荧光假单胞杆菌的纳米硒合成活性菌液、其制备方法及其应用，属于微生物及微生物制剂技术领域。本发明的荧光假单胞杆菌的纳米硒合成活性菌液；是由荧光假单胞杆菌进行生物发酵合成纳米硒后，由荧光假单胞杆菌及其合成的纳米硒组成的混合液；所述荧光假单胞杆菌为荧光假单胞杆菌KBD‑1；该菌株于2020年08月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.20567。本发明荧光假单胞杆菌的纳米硒合成活性菌液对作物病毒病具有较好的防治效果，为作物病毒病的防治提供新的微生物资源；此外，还对作物具有促生效果，且效果显著。

公开(公告)号：CN114058737A

公开(公告)日：2022-02-18

申请号：CN202111231803.4

申请日：2021-10-22

申请人： 中国农业科学院烟草研究所 ,  云南省烟草公司红河州公司 ,  云南省烟草农业科学研究院

发明人： 杨金广 ,  张万红 ,  蔺忠龙 ,  焦玉冰 ,  李莹 ,  申莉莉 ,  王凤龙 ,  刘春明 ,  夏振远

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/6804 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11

摘要： 本发明提供了一种用于检测植物番茄斑萎病毒的crDNA、crRNA、试剂盒和方法，所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述试剂盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas13a蛋白和荧光探针。所述方法包括：提取待测的植物样品总RNA，后通过逆转录获得cDNA；以所述cDNA为模板扩增获得DNA扩增产物；将所述的扩增产物、crRNA、Cas13a蛋白和荧光探针和无酶水构成的检测反应体系进行检测。本发明具有成本低、可多次重复检测、方法简单、检测速度快、灵敏(最低检测极限达到10拷贝/uL)、特异形的特点。

公开(公告)号：CN104877916A

公开(公告)日：2015-09-02

申请号：CN201510291837.0

申请日：2015-06-01

申请人： 云南省烟草农业科学研究院 ,  云南省烟草公司玉溪市公司

发明人： 段玉琪 ,  夏振远 ,  杨宇虹 ,  徐照丽 ,  张立猛 ,  张翠萍

IPC分类号： C12N1/14 ,  C05G3/00 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了一种副球菌及其制剂和制备方法与应用，所述的副球菌为副球菌属（Paracoccus limosus）A36，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2014年11月21日，保藏编号：CGMCC No.10032；所述副球菌属于细菌界，变形菌门，α-变形菌纲，红杆菌目，红杆菌科，副球菌属。所述副球菌为活性成分的菌剂，是以所述放射型副球菌经平板培养、种子培养、发酵后制成的菌剂；所述芽孢杆菌为活性成分的菌剂的制备方法，包括平板培养、种子培养、发酵、菌剂制备步骤；所述菌剂在制备解磷、解钾、提高土壤速效氮基肥中的应用。

公开(公告)号：CN104877916B

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201510291837.0

申请日：2015-06-01

申请人： 云南省烟草农业科学研究院 ,  云南省烟草公司玉溪市公司

发明人： 段玉琪 ,  夏振远 ,  杨宇虹 ,  徐照丽 ,  张立猛 ,  张翠萍

IPC分类号： C12N1/14 ,  C05G3/00 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开了一种副球菌及其制剂和制备方法与应用，所述的副球菌为副球菌属（Paracoccus limosus）A36，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2014年11月21日，保藏编号：CGMCC No. 10032；所述副球菌属于细菌界，变形菌门，α‑变形菌纲，红杆菌目，红杆菌科，副球菌属。所述副球菌为活性成分的菌剂，是以所述放射型副球菌经平板培养、种子培养、发酵后制成的菌剂；所述芽孢杆菌为活性成分的菌剂的制备方法，包括平板培养、种子培养、发酵、菌剂制备步骤；所述菌剂在制备解磷、解钾、提高土壤速效氮基肥中的应用。

公开(公告)号：CN115161412B

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202210932113.X

申请日：2022-08-04

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 盖晓彤 ,  冯智宇 ,  姜宁 ,  卢灿华 ,  夏振远 ,  韩天华 ,  户艳霞 ,  代快 ,  杨海林 ,  王继明

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  C12R1/77

摘要： 本发明涉及一种共享镰刀菌的检测方法及其应用，所述的检测方法包括特异性引物组：Fc‑geno‑1F/Fc‑geno‑1R。本发明有益效果为，1、现有技术中没有针对PCR检测烟草镰刀菌根腐病病原菌共享镰刀菌的特异性引物，本发明实现了零的突破；2、本发明研究筛选出的引物具有极高的准确度和特异性；3、综合使用本发明的方法，其最大灵敏度可达1.0ng/μL；4、本发明的应用在于检测疑似被共享镰刀菌侵染的烟株最小时间为12小时；5、本发明能在接种共享镰刀菌后早期检测到病原菌，达到烟草镰刀菌根腐病早期检测的目的，对于烟草镰刀菌根腐病的早期检测，预防和控制具有非常重要的意义和重大的经济意义。

公开(公告)号：CN117603347A

公开(公告)日：2024-02-27

申请号：CN202311593591.3

申请日：2023-11-27

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 姜宁 ,  夏振远 ,  盖晓彤 ,  卢灿华 ,  郭建 ,  马俊红 ,  袁诚 ,  黄昌军 ,  莫笑晗

IPC分类号： C07K16/10 ,  C12N5/20 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/577 ,  G01N33/531

摘要： 本发明涉及植物病毒检测技术领域，具体涉及用于检测烟草脉带花叶病毒的抗体、试纸及其应用。提供用于检测烟草脉带花叶病毒的单克隆抗体，其由捕获抗体和检测抗体组成；所述捕获抗体由保藏编号为CCTCC NO:C2023335的杂交瘤细胞分泌；所述检测抗体由保藏编号为CCTCC NO:C2023337的杂交瘤细胞分泌。基于所述单克隆抗体，还提供用于检测烟草脉带花叶病毒的胶体金试纸。本发明的单克隆抗体和胶体金试纸能够快速、准确、灵敏地检测待测样品中是否存在烟草脉带花叶病毒，在烟草脉带花叶病毒病的防治中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN116949215A

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202310881744.8

申请日：2023-07-18

申请人： 云南省烟草农业科学研究院 ,  云南农业大学

发明人： 姜宁 ,  刘雅婷 ,  张俊蕾 ,  盖晓彤 ,  赵正婷 ,  卢灿华 ,  刘弟 ,  夏振远 ,  马俊红 ,  吴玉萍

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/94

摘要： 本发明“烟草曲茎病毒LAMP检测引物组、试剂盒及其应用和方法”属于分子生物学技术领域。所述烟草曲茎病毒LAMP检测引物组包括：核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的外引物对TbC‑2‑F3和TbC‑2‑B3；核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的内引物对TbC‑2‑FIP和TbC‑2‑BIP；核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的环引物对TbC‑2‑LF和TbC‑2‑LB。本发明的烟草曲茎病毒LAMP检测引物组、试剂盒和方法检测烟草曲茎病毒的灵敏度是常规PCR检测的10,000倍。

公开(公告)号：CN116609458A

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202310579401.6

申请日：2023-05-23

申请人： 云南省烟草农业科学研究院 ,  云南农业大学

发明人： 马俊红 ,  贺聪 ,  朱婷 ,  刘冬梅 ,  夏振远 ,  吴国星 ,  刘宏程 ,  秦小萍 ,  卢灿华 ,  盖晓彤 ,  姜宁 ,  莫笑晗

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72

摘要： 本发明属于农药检测领域，具体涉及一种含多菌灵的烟草粉状标准物质的制备方法，包括：S1：将一定浓度的多菌灵可湿性粉剂于烟草旺长期均匀喷洒于烟草种植区域，并在烟草成熟期按照科学采样方法采样；将采集得到的鲜烟叶样品按照烟草烘烤调制技术进行烘烤处理；S2：将S1中已烘烤的烟叶样品放置于室温下冷却降温回潮，并再次进行复烤，复烤完成后室温下降温干燥后进行粉碎、过筛并混合均匀，得到烟草粉状多菌灵标准物质候选物；S3：对S2得到的烟草粉状多菌灵标准物质候选物进行均匀性初检；S4：对S3均匀性和稳定性初检符合要求的烟草粉状多菌灵标准物质候选物进行封装，冷冻，得到所述含多菌灵的烟草粉状标准物质。