公开(公告)号：CN105284789B

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201510905856.8

申请日：2015-12-09

申请人： 中国水产科学研究院长江水产研究所

发明人： 颉璇 ,  厉萍 ,  危起伟 ,  席萌丹 ,  郭威 ,  乔新美 ,  杜浩 ,  刘志刚

IPC分类号： A01N1/02

摘要： 本发明提供了一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存液及精巢细胞冷冻保存方法及应用，所述的冷冻保存液包括牛血清白蛋白、海藻糖，乙二醇、卵磷脂和胎牛血清。同时，本发明还提供了一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存方法，利用该方法在不使用液氮降温情况下的速率较低降温方式，可最大限度降低冰晶对细胞的损伤，保证复苏后的高存活率和增殖率，使温和的冷冻保存成为可能，为达氏鲟精原细胞移植提供长期稳定的细胞供应。

公开(公告)号：CN105316282B

公开(公告)日：2018-10-30

申请号：CN201510905841.1

申请日：2015-12-09

申请人： 中国水产科学研究院长江水产研究所

发明人： 颉璇 ,  厉萍 ,  危起伟 ,  叶欢 ,  杨晓鸽 ,  马杰 ,  曾令兵 ,  李创举

IPC分类号： C12N5/076

摘要： 本发明公开了一种达氏鲟精原细胞培养液及应用，本发明提供了一种无胎牛血清、以各种生长因子、非必须氨基酸、丙酮酸钠等添加剂作为替代物，同时辅以少量雄性达氏鲟血清的低血清培养基，可保证精原细胞的大量增殖且精巢细胞增殖率较低，将培养至第13天的精巢细胞13d掺入25μM BrdU标记新增殖细胞，24h免疫组化实验显示掺入BrdU 24h后新增殖细胞中带有生殖细胞标记的细胞的比例为85.78%。本发明解决了目前达氏鲟精原细胞原代无法大量培养的问题，为达氏鲟生殖发育研究提供有效的细胞平台。

公开(公告)号：CN105316282A

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201510905841.1

申请日：2015-12-09

申请人： 中国水产科学研究院长江水产研究所

发明人： 颉璇 ,  厉萍 ,  危起伟 ,  叶欢 ,  杨晓鸽 ,  马杰 ,  曾令兵 ,  李创举

IPC分类号： C12N5/076

摘要： 本发明公开了一种达氏鲟精原细胞培养液及应用，本发明提供了一种无胎牛血清、以各种生长因子、非必须氨基酸、丙酮酸钠等添加剂作为替代物，同时辅以少量雄性达氏鲟血清的低血清培养基，可保证精原细胞的大量增殖且精巢细胞增殖率较低，将培养至第13天的精巢细胞13d掺入25μM BrdU标记新增殖细胞，24h免疫组化实验显示掺入BrdU 24h后新增殖细胞中带有生殖细胞标记的细胞的比例为85.78%。本发明解决了目前达氏鲟精原细胞原代无法大量培养的问题，为达氏鲟生殖发育研究提供有效的细胞平台。

公开(公告)号：CN105284789A

公开(公告)日：2016-02-03

申请号：CN201510905856.8

申请日：2015-12-09

申请人： 中国水产科学研究院长江水产研究所

发明人： 颉璇 ,  厉萍 ,  危起伟 ,  席萌丹 ,  郭威 ,  乔新美 ,  杜浩 ,  刘志刚

IPC分类号： A01N1/02

摘要： 本发明提供了一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存液及精巢细胞冷冻保存方法及应用，所述的冷冻保存液包括牛血清白蛋白、海藻糖，乙二醇、卵磷脂和胎牛血清。同时，本发明还提供了一种达氏鲟精巢细胞冷冻保存方法，利用该方法在不使用液氮降温情况下的速率较低降温方式，可最大限度降低冰晶对细胞的损伤，保证复苏后的高存活率和增殖率，使温和的冷冻保存成为可能，为达氏鲟精原细胞移植提供长期稳定的细胞供应。