公开(公告)号：CN108144586B

公开(公告)日：2020-07-17

申请号：CN201611105142.X

申请日：2016-12-05

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 李尚勇 ,  孙谧 ,  郝建华 ,  刘均忠 ,  王跃军 ,  马子宾

IPC分类号： B01J20/22 ,  B01J20/30 ,  B01D15/08 ,  C12N9/50

摘要： 本发明涉及一种对氨基苯甲脒仿生亲和配基的仿生亲和纯化方法，包括仿生亲和材料的制备及其采用对氨基苯甲脒琼脂糖凝胶柱对金属蛋白酶MP的仿生亲和纯化。该纯化方法流程简单，周期短，效率高，纯度高达98.7％。

公开(公告)号：CN105154352B

公开(公告)日：2018-07-13

申请号：CN201510439521.1

申请日：2015-07-23

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  郝建华

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N9/10 ,  C12R1/07

摘要： 本发明涉及一种产α‑环糊精葡萄糖基转移酶的海洋微生物菌株Y112及其产的酶,经过16S rDNA序列分析结合其生理生化特征，该菌株为芽孢杆菌属,测序得到16S rDNA序列长度为1420bp左右，碱基组成如图1。在医药、食品、化工、化妆品、工业和农业以及分析化学等方面得到广泛的应用。

公开(公告)号：CN108144586A

公开(公告)日：2018-06-12

申请号：CN201611105142.X

申请日：2016-12-05

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 李尚勇 ,  孙谧 ,  郝建华 ,  刘均忠 ,  王跃军 ,  马子宾

IPC分类号： B01J20/22 ,  B01J20/30 ,  B01D15/08 ,  C12N9/50

摘要： 本发明涉及一种对氨基苯甲脒仿生亲和配基的仿生亲和纯化方法，包括仿生亲和材料的制备及其采用对氨基苯甲脒琼脂糖凝胶柱对金属蛋白酶MP的仿生亲和纯化。该纯化方法流程简单，周期短，效率高，纯度高达98.7％。

公开(公告)号：CN104130955B

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201310161167.1

申请日：2013-05-03

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  郝建华 ,  刘均忠

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N9/10 ,  C12R1/08

摘要： 本发明涉及一种黄海海水分离筛选得到的高产环状糊精葡萄糖基转移酶的海洋微生物菌株cd82，是芽孢杆菌属的Bacillus的新菌种，该菌株保藏于CCTCC，保藏号为CCTCCNo：M2013155，环状糊精葡萄糖基转移酶活性达1600U/ml，将在食品、医药、农药和环保等领域有着广泛应用。

公开(公告)号：CN103555622B

公开(公告)日：2016-05-18

申请号：CN201310508772.1

申请日：2013-10-24

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  郑兰红 ,  郝建华 ,  刘均忠 ,  衣尧

IPC分类号： C12N1/20 ,  C07K7/64 ,  A61P35/00 ,  C12R1/07

摘要： 本发明涉及一种海洋芽孢杆菌S-1及其产的抗肿瘤活性多肽。该海洋芽孢杆菌S-1是从南海海域的海泥中培养分离、筛选得到一株产抗肿瘤活性多肽的海洋芽孢杆菌属（Bacillus sp.）的海洋微生物细菌菌株,该菌株S-1为好氧菌,有较好的耐盐性，在7w/v%NaCl培养液中生长良好；生长pH范围为5.0-9.0；生长温度范围较宽，在15-37℃环境下也可良好生长;菌株S-1的16S rDNA的基因序列如图1所示。该海洋芽孢杆菌S-1产的多肽具有抗肿瘤活性,有望成为治疗肝癌的抗肿瘤药物。

公开(公告)号：CN103667097A

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201310315082.4

申请日：2013-07-25

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 郑兰红 ,  孙谧 ,  陈世建 ,  衣尧 ,  郑媛 ,  王伟 ,  盛军 ,  纪晓峰

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P1/04 ,  A61K35/74 ,  A61P35/00 ,  C12R1/07

摘要： 一种海洋芽孢杆菌及其具有抗肿瘤作用的活性组分，本发明属于海洋微生物医药技术领域，海洋芽孢杆菌N11-8（Bacillus sp.N11-8）是从南极海水中分离培养得到的，该海洋芽孢杆菌N11-8于2012年11月19日保藏于中国武汉典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M2012459。该菌株能够稳定表达具有抗肿瘤作用的活性组分，该活性组分具有较好的酸碱稳定性和热稳定性，对多种肿瘤细胞具有较大的细胞毒性，对人正常细胞的细胞毒性相对较小，因此其具有较好的研究和应用价值。

公开(公告)号：CN103525738A

公开(公告)日：2014-01-22

申请号：CN201310508243.1

申请日：2013-10-24

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  郝建华 ,  王伟 ,  郑鸿飞 ,  陈世建

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N9/08 ,  C12R1/01

摘要： 本发明涉及高产碱性过氧化氢酶的海洋微生物菌株YS0810,该菌株是从青岛海域底泥样品中筛选获得一株高产碱性过氧化氢酶的野生菌菌株,属于不动杆菌属（Acinetobacter sp.）革兰氏阴性杆菌，无芽孢，平板培养24h形成2-3mm乳白色的菌落，表面光滑，边缘规则，有粘性，易挑起，为短杆菌,菌体体型较小，长度大约为1μm，宽度大约为0.5μm。该菌株YS0810的16S rDNA基因序列长度为1443bp。该菌株发酵周期短,高产过氧化氢酶酶活相对较高，酶性能优良，可应用于临床分析、食品加工、纺织、造纸、医械器具的消毒及药物等。

公开(公告)号：CN103333879A

公开(公告)日：2013-10-02

申请号：CN201310254078.1

申请日：2013-06-24

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  徐甲坤 ,  盛军 ,  郑鸿飞 ,  刘均忠 ,  琚彩霞

IPC分类号： C12N11/14

摘要： 本发明涉及磁性Fe3O4@SiO2-NH2纳米微球固定化脂肪酶Bohai Sea-9145的方法,该方法将磁性Fe3O4@SiO2-NH2纳米微球置于反应器中，再向容器中加入酶蛋白浓度为0.0375-0.225mg/ml、pH4.0-10.0的海洋脂肪酶Bohai Sea-9145溶液,进行固定化反应,固定化反应温度为20-50℃,固定化反应时间为4-20小时，然后进行磁性分离，收集上清液用于测定蛋白含量，清洗固定化海洋脂肪酶Bohai Sea-9145，直至清洗液中无蛋白含量吸收后，得固定化海洋脂肪酶Bohai Sea-9145。该固定化海洋脂肪酶Bohai Sea-9145酶活稳定性提升效果显著,酶活力回收率高87.7%，得到的固定化酶重复利用性好，机械强度高，经过长时间贮藏仍然能够保持较高的脂肪酶活性，是一种理想的固定化酶方法。因此，在工业、医药、生化分析等方面拥有更广泛的应用。

公开(公告)号：CN101717762B

公开(公告)日：2013-07-24

申请号：CN200910242719.5

申请日：2009-12-15

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  郝建华 ,  王伟 ,  王芳 ,  朱重昊

IPC分类号： C12N9/52 ,  C12R1/01

摘要： 本发明涉及一种海洋细菌新型低温碱性蛋白酶MP晶体，其特征在于该低温碱性蛋白酶MP晶体为斜状晶体，是胞外酶，分子量49320Da，PI＝8.5，最适催化温度30℃，最适PH9.5，EDTA抑制酶活性，含463个氨基酸；整体结构中主要表现为几个环的位置向蛋白内移动，含有一个锌离子、两个氯离子和八个钙离子的N端结构域和C端结构域，所述N端结构域是蛋白水解结构域，含有结合锌离子活性位点，所述C端结构域是从248至463残基的一个平行β卷结构和七个结合钙离子，结合在平行β卷结构的核心。该蛋白酶MP晶体的酶制剂在洗涤、医药、皮革、纺织、饲料等领域具有广泛应用。

公开(公告)号：CN102363786A

公开(公告)日：2012-02-29

申请号：CN201110314848.8

申请日：2011-10-17

申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

发明人： 孙谧 ,  盛军 ,  王跃军 ,  刘均忠 ,  郝建华

IPC分类号： C12N15/55 ,  C12N9/20

摘要： 本发明涉及从渤海海泥中筛选到的一株能够分泌低温碱性脂肪酶的适冷性海洋酵母菌株(Bohai Sea-9145)中，利用简并引物聚合酶链式反应(PCR)与cDNA末端快速扩增(RACE)相结合的方法克隆得到了一条编码低温碱性脂肪酶(LipY)的基因。该基因含有一个1206bp的开放阅读框(ORF)，编码401个氨基酸，在氨基端含有一个28个氨基酸的信号肽。编码的氨基酸含有脂肪酶的保守序列(G-X-S-X-G)和1个潜在的N-糖基化位点。将此脂肪酶基因克隆到真核表达载体(pIC9K)上，在巴斯德毕赤酵母(GS115)中进行异源表达。以甲醇作为诱导剂，发酵96小时后在上清液中获得了高活力的重组脂肪酶。利用镍离子亲和柱对重组脂肪酶进行纯化，得到了电泳纯的脂肪酶样品。该重组脂肪酶具有低温催化活力高、碱性条件下性能稳定等一系列优点，在日化、纺织及食品加工等低温催化领域有着广阔的应用前景。