公开(公告)号：CN118086547B

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202410524010.9

申请日：2024-04-29

Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所

Inventor： 张旭志 ,  杨倩倩 ,  徐勇 ,  曲克明 ,  张艳 ,  陈剑磊 ,  卢峰 ,  王笑旸 ,  张圆圆 ,  梁若寒 ,  普小丹

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明涉及一种测定河口水中活的副溶血性弧菌的方法，属于资源与环境技术领域，所述方法包括1）设置电子等温基因扩增仪参数并开启升温；2）采集河口水样品；3）相等体积的样品分别加入到预装有环介导等温基因扩增（LAMP）反应体系的两个检测管中并密封；4）检测管分别置入电子等温基因扩增仪的一个检测通道中，对其中一个检测管施加特定的方波脉冲，之后开启检测；5）获得每个检测管中LAMP生化反应的速率曲线及时间峰值T；6）将T值代入工作曲线公式计算出两个检测管中样品的VP浓度；7）计算河口水样品中活性VP的浓度。本发明操作简便，可以实现现场检测，从采样到得到河口水中活性VP浓度的全部耗时不超过1 h，且结果准确。

公开(公告)号：CN119799937A

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202510299821.8

申请日：2025-03-14

Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所

Inventor： 张旭志 ,  杨倩倩 ,  卢峰 ,  徐勇 ,  陈剑磊 ,  普小丹 ,  张艳

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/63 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种海洋沉积物中三种病原菌的现场同步定量测定方法，属于病原菌检测技术领域，所述的三种病原菌为副溶血性弧菌、溶藻弧菌和大肠杆菌O157，所述的方法为采集海洋沉积物样品放入装有无菌海水的离心管中，混匀、离心，取上清液作为LAMP扩增的模板，取上清液分别加入到预装有三种病原菌的LAMP反应体系的检测管中并密封。检测管置入便携式电子等温基因扩增仪的检测通道中，测定ΔC4‑t曲线、dv/dt‑t曲线和Tp；测定完毕后，将Tp值代入工作曲线公式计算出检测管中对应海洋沉积物样品的三种病原菌的含量/浓度。本发明方法因反应无需Bst DNA聚合酶和甜菜碱，LAMP分析的成本降低了至少50%，且操作简便，1 h内即可在现场完成三种病原菌的同时定量测定。

公开(公告)号：CN118086547A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410524010.9

申请日：2024-04-29

Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所

Inventor： 张旭志 ,  杨倩倩 ,  徐勇 ,  曲克明 ,  张艳 ,  陈剑磊 ,  卢峰 ,  王笑旸 ,  张圆圆 ,  梁若寒 ,  普小丹

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明涉及一种测定河口水中活的副溶血性弧菌的方法，属于资源与环境技术领域，所述方法包括1）设置电子等温基因扩增仪参数并开启升温；2）采集河口水样品；3）相等体积的样品分别加入到预装有环介导等温基因扩增（LAMP）反应体系的两个检测管中并密封；4）检测管分别置入电子等温基因扩增仪的一个检测通道中，对其中一个检测管施加特定的方波脉冲，之后开启检测；5）获得每个检测管中LAMP生化反应的速率曲线及时间峰值T；6）将T值代入工作曲线公式计算出两个检测管中样品的VP浓度；7）计算河口水样品中活性VP的浓度。本发明操作简便，可以实现现场检测，从采样到得到河口水中活性VP浓度的全部耗时不超过1 h，且结果准确。