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公开(公告)号:CN119799937A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510299821.8
申请日:2025-03-14
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/63 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种海洋沉积物中三种病原菌的现场同步定量测定方法,属于病原菌检测技术领域,所述的三种病原菌为副溶血性弧菌、溶藻弧菌和大肠杆菌O157,所述的方法为采集海洋沉积物样品放入装有无菌海水的离心管中,混匀、离心,取上清液作为LAMP扩增的模板,取上清液分别加入到预装有三种病原菌的LAMP反应体系的检测管中并密封。检测管置入便携式电子等温基因扩增仪的检测通道中,测定ΔC4‑t曲线、dv/dt‑t曲线和Tp;测定完毕后,将Tp值代入工作曲线公式计算出检测管中对应海洋沉积物样品的三种病原菌的含量/浓度。本发明方法因反应无需Bst DNA聚合酶和甜菜碱,LAMP分析的成本降低了至少50%,且操作简便,1 h内即可在现场完成三种病原菌的同时定量测定。
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公开(公告)号:CN118086547A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410524010.9
申请日:2024-04-29
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/63
Abstract: 本发明涉及一种测定河口水中活的副溶血性弧菌的方法,属于资源与环境技术领域,所述方法包括1)设置电子等温基因扩增仪参数并开启升温;2)采集河口水样品;3)相等体积的样品分别加入到预装有环介导等温基因扩增(LAMP)反应体系的两个检测管中并密封;4)检测管分别置入电子等温基因扩增仪的一个检测通道中,对其中一个检测管施加特定的方波脉冲,之后开启检测;5)获得每个检测管中LAMP生化反应的速率曲线及时间峰值T;6)将T值代入工作曲线公式计算出两个检测管中样品的VP浓度;7)计算河口水样品中活性VP的浓度。本发明操作简便,可以实现现场检测,从采样到得到河口水中活性VP浓度的全部耗时不超过1 h,且结果准确。
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公开(公告)号:CN115261440B
公开(公告)日:2023-01-17
申请号:CN202211169185.X
申请日:2022-09-26
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明涉及一种对虾体内可培养细菌总数检测功能液、系统及方法,属于微生物检测领域,所述功能液的成分及终浓度为0.5%胰蛋白胨、0.3%酵母浸粉、0.1%葡萄糖、0.05%1‑丁基‑3‑甲基咪唑四氟硼酸盐和0.02%十二烷基硫酸铵。本发明还提供了一种对虾体内可培养细菌总数的检测系统,所述检测系统包括自动电子微生物生长曲线分析仪,其激励频率设定为30KHz,检测管、所述功能液和对检测管封口的装置。本发明还提供了一种检测对虾体内可培养细菌总数的方法,所述方法在检测对虾样品时无需匀浆和取样步骤,可实现对完整对虾生物体体内可培养细菌总数的检测,操作简便,效率高。
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公开(公告)号:CN111855753A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010778384.5
申请日:2020-08-05
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: G01N27/06
Abstract: 本发明涉及一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒和检测方法,属于水质检测领域,所述试剂盒包括溴化N-十二烷基异喹啉试剂、副溶血弧菌烈性噬菌体悬液和不同浓度梯度的副溶血弧菌菌悬液。利用所述试剂盒进行检测水体中副溶血弧菌的方法为将待检测水样装在检测管中,加入专用烈性噬菌体,能够特异性、快速地裂解其中的副溶血弧菌,生成多种小分子和离子,从而引起σ数值增加。由于σ增量与给检测管所装水体中副溶血弧菌的数量成正比,所以测定Δσ即可计算出待测水体样品中副溶血弧菌的定量信息。该方法可以在养殖现场快速确定含有多种微生物的复杂水体中副溶血弧菌的量,为渔业生产管理提供高时效性、准确的支撑数据。
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公开(公告)号:CN106770908A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611043494.7
申请日:2016-11-21
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: G01N31/16
CPC classification number: G01N31/16
Abstract: 一种高通量多功能滴定仪及使用方法,属于分析测试仪器领域,它包括底座、电容耦合非接触电导传感器、自动升降机构、直排多联装自动微量注射器、单片机和触控显示面板;电容耦合非接触电导传感器和自动升降机构固定在底座上,直排多联装微量注射器固定在升降机构的升降臂上,自动升降机构、直排多联装自动微量注射器和电容耦合非接触电导传感器的控制软件集成于单片机,终端排布在触控显示面板上;利用本发明装置和使用方法可以自动滴定微量待测样品并计算、输出滴定结果。
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公开(公告)号:CN111855753B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202010778384.5
申请日:2020-08-05
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: G01N27/06
Abstract: 本发明涉及一种水体中副溶血弧菌的现场检测试剂盒和检测方法,属于水质检测领域,所述试剂盒包括溴化N‑十二烷基异喹啉试剂、副溶血弧菌烈性噬菌体悬液和不同浓度梯度的副溶血弧菌菌悬液。利用所述试剂盒进行检测水体中副溶血弧菌的方法为将待检测水样装在检测管中,加入专用烈性噬菌体,能够特异性、快速地裂解其中的副溶血弧菌,生成多种小分子和离子,从而引起σ数值增加。由于σ增量与给检测管所装水体中副溶血弧菌的数量成正比,所以测定Δσ即可计算出待测水体样品中副溶血弧菌的定量信息。该方法可以在养殖现场快速确定含有多种微生物的复杂水体中副溶血弧菌的量,为渔业生产管理提供高时效性、准确的支撑数据。
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公开(公告)号:CN115466777A
公开(公告)日:2022-12-13
申请号:CN202211187010.1
申请日:2022-09-27
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种养殖海水中活性致病性弧菌总数的现场快检方法,涉及微生物检测技术领域,包括如下步骤:步骤S1,采用电子微生物生长传感器测定活性致病性弧菌在专用选择性液体培养基中的生长速率曲线,得到最大生长速率对应的培养时间Ct;步骤S2,将Ct代入线性方程logN=‑0.0082Ct+6.5402,计算养殖海水样品中活性致病性弧菌总数N。本发明操作简便,无需具有微生物专业背景的技术人员,用户经过简单培训即可实施检测,因此便于推广;本发明可以在现场实施、效率高,一般养殖车间或者养殖池塘水体中的活性致病性弧菌总数的测定周期不大于7.5h,因此可以为生产安全提供较为及时的预警信息。
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公开(公告)号:CN115261440A
公开(公告)日:2022-11-01
申请号:CN202211169185.X
申请日:2022-09-26
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明涉及一种对虾体内可培养细菌总数检测功能液、系统及方法,属于微生物检测领域,所述功能液的成分及终浓度为0.5%胰蛋白胨、0.3%酵母浸粉、0.1%葡萄糖、0.05%1‑丁基‑3‑甲基咪唑四氟硼酸盐和0.02%十二烷基硫酸铵。本发明还提供了一种对虾体内可培养细菌总数的检测系统,所述检测系统包括自动电子微生物生长曲线分析仪,其激励频率设定为30KHz,检测管、所述功能液和对检测管封口的装置。本发明还提供了一种检测对虾体内可培养细菌总数的方法,所述方法在检测对虾样品时无需匀浆和取样步骤,可实现对完整对虾生物体体内可培养细菌总数的检测,操作简便,效率高。
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公开(公告)号:CN106191202B
公开(公告)日:2019-06-28
申请号:CN201610537565.2
申请日:2016-07-08
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 一种大肠杆菌在水及水溶液中运动速率测定方法,属于仪器分析技术领域,所述方法采用电容耦合非接触电导传感器监测并记录该菌在玻璃检测管内的运动过程。根据设定距离(刻度玻璃检测管有效长度L)与所耗时长T计算获得大肠杆菌的运动速率R(R=L/T)。本发明方法无需贵重仪器,方便快捷。
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公开(公告)号:CN107177678A
公开(公告)日:2017-09-19
申请号:CN201710421611.7
申请日:2017-06-07
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 一种选择性检测海水中活的副溶血性弧菌的方法,属于微生物检测领域,它的步骤包括膜过滤采集总菌、叠氮化钠处理采集到的总菌和环介导等温基因扩增测定;所述活的副溶血性弧菌包括可培养状态和非可培养状态。本发明采用价格低廉、易于获得的叠氮化钠预处理死菌中的DNA和胞外DNA,使它们失去扩增活性,进而通过基因扩增实现选择性检测活的副溶血性弧菌;操作过程中无需特定光源设备和其它贵重仪器,操作简易,成本低。
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