一种植物小RNA的快速提取方法

    公开(公告)号:CN103484451B

    公开(公告)日:2015-02-18

    申请号:CN201310454607.2

    申请日:2013-09-29

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种植物小RNA的快速提取方法,取植物材料经液氮研磨后与CTAB提取液混合,水浴后经水饱和酚/氯仿抽提,用乙醇沉淀得到总核酸,总核酸用异硫氰酸胍溶解后经两次酚/氯仿抽提,用PEG8000和氯化钠沉淀大片段RNA,取上清液得到小RNA。本发明工艺简单,通过酚/氯仿及异硫氰酸胍抽提去除蛋白、基因组DNA,用PEG8000和氯化钠沉淀的方法去除大片段RNA,避免了LiCl沉淀造成小分子RNA过多丢失的缺点,可以大大降低实验成本,为研究人员在实际工作中提供更多的选择,所提取的小RNA质量高,可以满足RT-PCR,miRNA等研究的需要,能够很好地用于后续的分子生物学实验研究。

    一种植物小RNA的快速提取方法

    公开(公告)号:CN103484451A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310454607.2

    申请日:2013-09-29

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种植物小RNA的快速提取方法,取植物材料经液氮研磨后与CTAB提取液混合,水浴后经水饱和酚/氯仿抽提,用乙醇沉淀得到总核酸,总核酸用异硫氰酸胍溶解后经两次酚/氯仿抽提,用PEG8000和氯化钠沉淀大片段RNA,取上清液得到小RNA。本发明工艺简单,通过酚/氯仿及异硫氰酸胍抽提去除蛋白、基因组DNA,用PEG8000和氯化钠沉淀的方法去除大片段RNA,避免了LiCl沉淀造成小分子RNA过多丢失的缺点,可以大大降低实验成本,为研究人员在实际工作中提供更多的选择,所提取的小RNA质量高,可以满足RT-PCR,miRNA等研究的需要,能够很好地用于后续的分子生物学实验研究。